HiMedia M912-100G Основа среды для теста на декарбоксилазу (Фальков)

Сухая основа питательной среды HiMedia M912-100G Основа среды для теста на декарбоксилазу (Фальков) предназначена для определения активности декарбоксилаз аминокислот и выпускается в виде порошка. Используется для дифференциации бактерий по способности декарбоксилировать L-лизин, L-аргинин и L-орнитин; среда может не поддерживать рост требовательных микроорганизмов.

Назначение

Основа среды предназначена для тестирования активности декарбоксилаз аминокислот. Среда используется для дифференциации бактерий по способности декарбоксилировать аминокислоты.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения установленных рабочих характеристик.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 9,02 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию для полного растворения среды.
3. Разделите приготовленную среду на четыре равные части.
4. Одну часть разлейте в пробирки без добавления аминокислот.
5. В остальные три части отдельно добавьте по одной из трёх аминокислот: гидрохлориду L-лизина, гидрохлориду L-аргинина и гидрохлориду L-орнитина. Конечная концентрация каждой аминокислоты должна составлять 0,5 %.
6. Разлейте среду порциями по 3–4 мл в пробирки с завинчивающимися крышками.
7. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм, что соответствует приблизительно 0,10 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
8. Для предотвращения ложного защелачивания поверхности среды перед стерилизацией рекомендуется добавить жидкий парафин слоем высотой около 5 мм.

Принцип измерения и интерпретация

Основа среды для теста на декарбоксилазу применяется для дифференциации бактерий по способности декарбоксилировать аминокислоты. Первое практическое применение теста на декарбоксилазы аминокислот было описано Moeller для различения различных микроорганизмов. Работа Moeller основывалась на исследованиях Gale, а также Gale и Epps, посвящённых бактериальным декарбоксилазам аминокислот.

Moeller установил, что образование декарбоксилаз лизина, аргинина и орнитина различными представителями семейства Enterobacteriaceae является важным дополнением к другим биохимическим тестам при дифференциации близкородственных групп бактерий. Для дифференциации Salmonella серотипа Arizonae и Citrobacter Calquist разработал среду, использующую реакцию декарбоксилирования лизина. Позднее Falkow разработал и акцентировал применение среды для декарбоксилазы лизина при дифференциации Salmonellae и Shigella с использованием достоверных и воспроизводимых результатов.

Энтеробактерии ферментируют декстрозу, что приводит к снижению pH и подкислению среды. Бактерии, образующие декарбоксилазы лизина, орнитина или аргинина, формируют щелочные продукты, повышающие pH. Реакция через 24–96 ч у бактерий, продуцирующих декарбоксилазы, проявляется щелочной реакцией и фиолетовой окраской среды; у бактерий, не продуцирующих декарбоксилазы, — кислым pH и жёлтой окраской.

Инокулированные пробирки необходимо защищать от контакта с воздухом, покрывая поверхность среды стерильным минеральным маслом, чтобы предотвратить ложное защелачивание поверхности. Контрольные пробирки с базовой средой также необходимо инокулировать.

Биохимическое тестирование следует проводить только с чистой культурой после выполнения дифференциальных исследований. Реакции декарбоксилазы могут служить ориентировочным признаком определённого рода или вида, но окончательная идентификация микроорганизмов не может основываться только на результатах реакций декарбоксилазы.

Тип образцов

• Пищевые образцы — чистые изоляты.
• Клинические образцы.

Сбор и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными руководствами.

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов в соответствии с руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Изделие предназначено для диагностики in vitro (вне организма).
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы при обращении с образцами и культурами.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Правила безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Среда является универсальной и может не поддерживать рост требовательных микроорганизмов.

Рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, свободно сыпучий порошок от светло-жёлтого до зеленовато-жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Прозрачный раствор фиолетового цвета без осадка в пробирках.

Реакция

Реакция водного раствора концентрацией 0,9 % по массе к объёму при 25 °C.

• pH: 6,8 ± 0,2

Значение pH

• pH: 6,60–7,00

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение не более 4 суток с добавлением соответствующих аминокислот и покрытием среды стерильным минеральным маслом.