Основа селективного агара для клостридий ботулизма HiMedia M911-500G (уп/500 гр)

Порошковая питательная среда «Основа селективного агара для клостридий ботулизма HiMedia M911-500G (уп/500 гр)» предназначена для быстрого селективного выделения Clostridium botulinum. Среда применяется для анализа пищевых и клинических образцов, включая фекалии при пищевом ботулизме и ботулизме грудных детей, а также пищевые продукты.

Назначение

Основа селективного агара для быстрого селективного выделения Clostridium botulinum из пищевых и клинических образцов.

Тип питательной среды: элективный
Назначение изделия: основа
Сертификат: ФСЗ 2009/03709
Форма выпуска: порошок
Масса: 500 г

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров эффективности.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 37,0 г порошка в 450 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте стерильную 50-миллилитровую эмульсию яичного желтка FD045 и восстановленное содержимое 1 флакона селективной добавки CBI FD049.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Clostridium botulinum — анаэробная спорообразующая бактерия, продуцирующая белковый нейротоксин — ботулинический токсин. Тяжёлое пищевое отравление возникает при употреблении продуктов, контаминированных Clostridium botulinum, в которых может образоваться этот токсин.

Основа агара для выделения Clostridium botulinum разработана для селективного выделения микроорганизма из пищевых образцов в соответствии с рекомендациями APHA.

Селективная добавка FD049 содержит антибиотики широкого спектра действия:

• циклосерин;
• сульфаметоксазол;
• триметоприм.

Компоненты среды выполняют следующие функции:

• эмульсия яичного желтка позволяет выявлять лецитиназную, липазную и протеолитическую активность;
• лецитиназа разрушает лецитин, содержащийся в яичном желтке, с образованием нерастворимого непрозрачного осадка в среде вокруг зоны роста;
• липаза расщепляет свободные жиры яичного желтка, вызывая появление на поверхности колоний радужной плёнки, напоминающей масляную плёнку на воде;
• триптон и дрожжевой экстракт обеспечивают аминокислотами, другими азотистыми соединениями и витаминами группы B;
• декстроза является сбраживаемым углеводом;
• динатрий фосфат поддерживает буферные свойства среды;
• сульфат магния способствует спорообразованию микроорганизмов;
• хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие.

Ботулинический токсин термолабилен. Поэтому исследуемые образцы и культуры следует хранить при температуре охлаждения. pH токсичного материала также следует поддерживать на слабокислом уровне, поскольку при щелочном pH стабильность ботулинического токсина снижается.

Обогащение и выделение Clostridium botulinum

1. Внесите 1–2 г твёрдого пищевого образца или 1–2 мл жидкого пищевого образца в 15 мл обогатительной среды.
2. Используйте в качестве обогатительной среды варёную мясную среду Cooked Meat Medium (M149).
3. Инкубируйте при 35 °C в течение 7 суток.
4. Оцените наличие помутнения, газообразования и переваривания мяса.
5. Выполните окрашивание по Граму и окрашивание спор.
6. Для выделения Clostridium botulinum смешайте обогатительную культуру с равным объёмом стерильного этанола и проведите обработку спиртом.
7. После спиртовой обработки нанесите культуру штриховым посевом на основу агара для выделения Clostridium botulinum M911.
8. В качестве альтернативы необработанную обогатительную культуру или образец фекалий можно непосредственно нанести штриховым посевом на основу агара M911.

Типы образцов

• пищевые образцы;
• клинические образцы:
  • фекалии;
  • содержимое абсцессов;
  • другие клинические материалы.

Отбор и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с материалом в соответствии с установленными руководствами.

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб в соответствии с установленными руководствами.

После использования контаминированные материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Среда предназначена для диагностики вне организма.
• Только для профессионального применения.
• Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при обращении с образцами и культурами.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• При необходимости обращайтесь к требованиям безопасности, приведённым в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Из-за различий в пищевых потребностях некоторые штаммы могут демонстрировать слабый рост.
2. Для подтверждения необходимо выполнить дополнительные биохимические и серологические исследования.

Рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды ожидаются при использовании в соответствии с указаниями на этикетке и в пределах срока годности при хранении в рекомендованных условиях.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 2,0%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Базовая среда: прозрачный или слегка опалесцирующий гель жёлтого цвета.
• После добавления эмульсии яичного желтка: в чашках Петри образуется непрозрачный гель светло-жёлтого цвета.

Реакция среды

Реакция среды для суспензии 7,4 г в 90 мл дистиллированной воды при 25 °C: pH 7,4 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют в анаэробных условиях с добавлением эмульсии яичного желтка FD045 и селективной добавки CBI FD049 после инкубации при 35–37 °C в течение 48 ч.

Хранение и срок годности

• Температура хранения закрытого контейнера: 10–30 °C.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия хранить продукт в сухом виде в плотно закрытом флаконе.
• Плотно закрывать флакон после каждого использования для предотвращения образования комков вследствие гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• Плотно закрывать контейнер после использования.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в пределах установленного срока годности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материал, контактировавший с клиническим образцом, необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Комплект поставки