Основа селективного агара для клостридий ботулизма HiMedia M911-500G (уп/500 гр)

Элективная основа селективного агара для клостридий ботулизма HiMedia M911-500G (уп/500 г). Применяется для быстрого селективного выделения Clostridium botulinum из пищевых продуктов и клинических образцов (фекалии, абсцессы); состав разработан в соответствии с рекомендациями APHA.

Принцип измерения

Среда предназначена для выделения Clostridium botulinum — анаэробных спорообразующих бактерий, вырабатывающих нейротоксин ботулин. Селективность обеспечивается антибиотиками широкого спектра (циклосерин, сульфаметоксазол и триметоприм), входящими в состав добавки FD049.

Для идентификации используются следующие показатели:

• Лецитиназная активность: лецитиназа расщепляет лецитин яичного желтка, образуя нерастворимый опалесцирующий (матовый) осадок вокруг колоний.
• Липазная активность: липаза расщепляет свободные жиры желтка, что создает радужную («масляную») пленку на поверхности колоний.
• Протеолитическая активность: оценивается по способности микроорганизмов расщеплять белки.

Триптон и экстракт дрожжей обеспечивают аминокислоты и витамины группы B, декстроза служит ферментируемым углеводом, гидрофосфат натрия поддерживает pH, а сульфат магния способствует споруляции.

Методика проведения анализа

Подготовка образцов

1. Посев: в 15 мл обогатительного бульона (например, среда с вареным мясом M149) вносят 1–2 г твердого или 1–2 мл жидкого пищевого продукта.
2. Инкубация: пробу выдерживают при 35 °C в течение 7 суток.
3. Оценка: проверяют образец на наличие помутнения, газообразования и переваривания мяса. Выполняют окраску по Грамму и окраску спор.
4. Изоляция: для выделения чистой культуры обогатительный бульон смешивают с равным количеством стерильного этанола (алкогольная обработка). Полученную культуру высевают на агар M911. Примечание: нелеченые обогатительные культуры или образцы фекалий могут быть высеяны на агар M911 напрямую.

Приготовление среды

1. Суспендировать 37,0 г порошка в 450 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавить 50 мл стерильной эмульсии яичного желтка (FD045) и содержимое одного флакона восстановленной добавки CBI (FD049).
6. Тщательно перемешать и разлить по стерильным чашкам Петри.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Общие параметры

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободнотекучий порошок от кремового до желтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 2,0 % агаром.
• Цвет и прозрачность: базовая среда представляет собой желтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель. После добавления эмульсии яичного желтка гель становится светло-желтым и непрозрачным.
• Реакция (pH): 7,20–7,60 (при 25 °C).

Культуральные характеристики

Характеристики определены в анаэробных условиях с добавлением эмульсии яичного желтка (FD045) и добавки CBI (FD049) после инкубации при 35–37 °C в течение 48 часов.

Область применения и ограничения

Среда используется для анализа:

• Пищевых продуктов и молочной продукции.
• Клинических образцов (фекалии, абсцессы и др.).

Ограничения:

• Некоторые штаммы могут демонстрировать слабый рост из-за вариаций в питательных потребностях.
• Для окончательного подтверждения необходимо проведение дополнительных биохимических и серологических тестов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом месте, защищенном от источников возгорания и экстремальных температур.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; неправильное хранение может привести к образованию комков.

Комплект поставки и совместимость

По заявке поставляется:

• FD049 |Селективная добавка для клостридий ботулизма (C.B.I. Supplement)|

Для приготовления среды также требуется:

• Эмульсия яичного желтка FD045.
• Обогатительная среда с вареным мясом M149.