HiMedia M902F-500G Основа анаэробного яичного агара

Основа анаэробного яичного агара HiMedia M902F-500G для выявления Clostridium botulinum в пищевых продуктах. Применяется для определения липазной активности Yersinia sp. и идентификации ботулизма в соответствии с методиками FDA BAM.

Принцип измерения

Среда предназначена для выделения и идентификации анаэробных бактерий. Казеиновый ферментный гидролизат и протеоз-пептон обеспечивают комплекс азотистыми питательными веществами и аминокислотами, а дрожжевой экстракт поставляет необходимые витамины группы B. Натрия хлорид поддерживает осмотический баланс клеток.

После добавления эмульсии яичного желтка среда позволяет оценивать активность лецитиназы и липазы:

• Yersinia sp. расщепляет лецитин яичного желтка, образуя нерастворимый матовый осадок.
• Липаза расщепляет свободные жиры яичного желтка, что приводит к появлению радужного блеска на поверхности колоний.
• Протеолиз проявляется в виде зон просветления среды вокруг роста микроорганизмов.

Методика проведения анализа

Пробоподготовка и обогащение

1. Репрезентативные образцы продукта (1–2 г твердого или 1–2 мл жидкого материала) обогащают в среде с вареным мясом (Cooked Meat Media, M149F) в течение 5 суток при температуре 35 °C в анаэробных условиях.
2. Для уничтожения вегетативных клеток проводят либо обработку спиртом, либо термическую обработку: аликвоту 1–2 мл нагревают при 80 °C в течение 10–15 мин.
3. Обработанные культуры пересевают на модифицированный печеночно-телячий агар (M1872) или основу анаэробного яичного агара (M902F).

Интерпретация результатов

Типичные колонии C. botulinum могут быть выпуклыми, с гладкой или шероховатой поверхностью, имеют неправильный край и склонны к распространению. При осмотре под косым светом на яично-желточной среде колонии обычно демонстрируют поверхностную иризацию (радужный блеск), образуя так называемый «жемчужный слой», который выходит за контуры колонии.

• Колонии типов C, D и E обычно окружены широкой зоной (2–4 мм) желтого осадка.
• Колонии типов A и B характеризуются более узкой зоной осаждения. Для окончательной дифференциации от других видов Clostridium требуются дополнительные биохимические тесты.

Приготовление среды

1. Растворить 55 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C и асептически добавить 80 мл стерильной эмульсии яичного желтка (FD045F).
5. Тщательно перемешать перед розливом в стерильные чашки Петри.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Общие параметры:

• Происхождение компонентов: животное
• Тип продукта: регулярный
• Физическая форма: порошок
• Материал упаковки: ПНД (HDPE)
• Вес: 500 г
• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до желтого цвета
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 2,0 % раствором агара
• Цвет и прозрачность:
  • Базовая среда: светло-желтый, прозрачный или очень слабо опалесцирующий гель.
  • После добавления эмульсии желтка: светло-желтый, матовый гель.
• Диапазон pH: 6,80–7,20

Культуральные характеристики

Характеристики определены при добавлении 50 % эмульсии яичного желтка (FD045F) и инкубации в анаэробных условиях при 35–37 °C в течение 18–24 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: при температуре ниже 30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.
• Температура хранения (общая): 10–30 °C.