Основа анаэробного желточного агара HiMedia M902-500G (уп/500 гр)

Питательная среда Основа анаэробного желточного агара HiMedia M902-500G (уп/500 гр) — порошкообразная основа для выявления Clostridium perfringens в пищевых продуктах. Применяется для анализа пищевых и молочных образцов после добавления 80 мл стерильной эмульсии яичного желтка; готовая среда позволяет выявлять лецитиназную, липазную активность и протеолиз.

Назначение

Основа анаэробного желточного агара с добавлением эмульсии яичного желтка предназначена для выявления Clostridium perfringens в пищевых продуктах.

Тип образца: пищевые и молочные образцы.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 55 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 80 мл стерильной эмульсии яичного желтка FD045.
6. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Clostridium perfringens, уступая видам рода Salmonella и Staphylococcus aureus, является третьим по распространённости этиологическим агентом пищевых заболеваний. Виды Clostridium представляют собой спорообразующие грамположительные палочки, естественно встречающиеся в почве.

Пищевое отравление, вызываемое C. perfringens, развивается после употребления контаминированной пищи. Основным фактором вирулентности C. perfringens является энтеротоксин CPE, секретируемый при проникновении возбудителя в кишечник хозяина и участвующий в развитии пищевого отравления и других желудочно-кишечных заболеваний.

Клетки C. perfringens могут терять жизнеспособность при хранении подозрительных пищевых образцов в холодильнике, что затрудняет установление роли микроорганизма в вспышках пищевых отравлений.

Анаэробный желточный агар относится к средам, рекомендованным APHA для выявления C. perfringens в пищевых продуктах. Триптон и пептон протеозы обеспечивают поступление длинноцепочечных аминокислот и других сложных азотистых питательных веществ. Дрожжевой экстракт поставляет необходимые витамины группы B.

Эмульсию яичного желтка добавляют в среду для наблюдения лецитиназной и липазной активности:

• лецитиназа C. perfringens расщепляет лецитин яичного желтка с образованием нерастворимого непрозрачного осадка;
• липаза расщепляет свободные жиры, содержащиеся в яичном желтке, вследствие чего на поверхности колонии появляется радужный блеск;
• для выявления липазной реакции чашки можно инкубировать до одной недели;
• протеолиз проявляется в виде прозрачных зон в среде вокруг зоны роста.

Тип и обработка образцов

Для сбора и обработки пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методики согласно установленным руководствам.

После использования контаминированные материалы перед утилизацией необходимо стерилизовать автоклавированием.

Предупреждения и меры предосторожности

Перед открытием контейнера прочитайте этикетку. При работе с образцами и культурами используйте:

• защитные перчатки;
• защитную одежду;
• средства защиты глаз;
• средства защиты лица.

Соблюдайте надлежащие правила работы в микробиологической лаборатории при обращении с образцами и культурами. При работе с образцами необходимо выполнять стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами. Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Для окончательной идентификации необходимо провести дополнительные биохимические и серологические исследования.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 2,0%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Основная среда: светло-жёлтый прозрачный или от прозрачного до слегка опалесцирующего геля.
• После добавления эмульсии яичного желтка: в чашках Петри образуется светло-жёлтый непрозрачный гель.

Реакция

Реакция водного раствора с концентрацией 5,5 % масс./об. при 25 °C.

pH: 7,0 ± 0,2.

Диапазон pH

6,80–7,20.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления эмульсии яичного желтка FD045 и анаэробной инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Хранение и срок годности

• Температура хранения порошка: 10–30 °C.
• Условия хранения порошка: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Срок использования: до даты истечения срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде. Продукт обладает гигроскопичностью; попадание влаги может привести к образованию комков. Неправильное хранение также может вызвать комкование.

Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После каждого использования плотно закрывайте контейнер. Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в пределах указанного срока годности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцами, необходимо обеззараживать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Технические характеристики

Комплект поставки и дополнительные компоненты

Основа поставляется в упаковке 500 г.

По заявке поставляется эмульсия яичного желтка:

• FD045 — эмульсия яичного желтка, 100 мл во флаконе.