Основа забуференного угольного агара модифицированная HiMedia M892-500G (уп/500 гр)

Основа питательной среды Основа забуференного угольного агара модифицированная HiMedia M892-500G (уп/500 гр) — порошкообразный препарат с конечным pH 6,9±0,2. Применяется для выделения и культивирования видов Legionella из клинических и других образцов, при этом для окончательной идентификации требуется дополнительное биохимическое подтверждение.

Назначение

Основа модифицированного забуференного угольного агара используется с добавками для выделения и культивирования видов Legionella из клинических и других образцов.

Тип образца:

• Клинические образцы: моча.
• Образцы воды.

Препарат предназначен для применения в качестве основы питательной среды; для придания селективности в расплавленную среду добавляют соответствующие селективные добавки.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: M892-500G
• Форма выпуска: порошок
• Тип питательной среды: элективный
• Назначение изделия: основа
• Происхождение компонентов: животное
• Тип продукта: стандартный
• Материал упаковки: ПНД (полиэтилен высокой плотности)
• Фасовка: 500 г
• Сертификат: ФСЗ 2009/03706

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заявленных рабочих характеристик.

Методика приготовления среды

1. Взвесьте 20,0 г порошка и суспендируйте в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Простерилизуйте среду в автоклаве при давлении 15 фунтов (≈0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте стерильное восстановленное содержимое одного флакона добавки для роста легионелл FD041A.
6. Для придания среде селективности добавьте восстановленное содержимое одного флакона селективной добавки MWY FD040.
7. Тщательно перемешайте среду и разлейте её в стерильные чашки Петри. Во время разливания постоянно перемешивайте среду, чтобы частицы угля распределялись равномерно.
8. Для дополнительного повышения селективности в расплавленную среду по выбору могут быть добавлены селективные добавки FD017, FD037 и FD038.

Принцип действия и интерпретация

Виды Legionella представляют собой не образующие спор узкие грамотрицательные палочки. Legionella вызывает пневмонию — болезнь легионеров — или лёгкое лихорадочное заболевание, известное как понтиакская лихорадка.

В обычных питательных средах виды Legionella не окисляют и не ферментируют углеводы, а также не растут на кровяном агаре с кровью овцы. Более обильный и быстрый рост наблюдается на забуференном угольно-дрожжевом агаре.

Основными источниками энергии для Legionella служат аминокислоты. Аминокислота L-цистин необходима для роста, поскольку играет важную роль в метаболизме роста Legionella. L-цистин и пирофосфат железа способствуют росту микроорганизмов. Модифицированный забуференный угольный агар аналогичен основе забуференного угольно-дрожжевого агара, за исключением замены дрожжевого экстракта на протеозный пептон. Среда предназначена для выделения и культивирования видов Legionella из клинических и объектов окружающей среды. Формула среды разработана Feeley и дополнительно модифицирована Edelstein.

Функции компонентов среды:

• Уголь действует как детоксицирующий компонент.
• Протеозный пептон является источником витаминов, азота и углерода.
• Буфер ACES поддерживает оптимальный для роста pH.
• L-цистина гидрохлорид, пирофосфат железа и альфа-кетоглутарат стимулируют рост видов Legionella.
• Селективные антибиотические добавки подавляют сопутствующую загрязняющую микрофлору и применяются для селективного выделения легионелл.

Для селективного выделения могут использоваться:

• Селективная добавка C3V FD037, содержащая цефалотин, колистин, ванкомицин и циклогексимид.
• Селективная добавка MWY FD040, содержащая глицин, полимиксин B, анизомицин, ванкомицин, бромтимоловый синий и бромкрезоловый пурпурный.

При работе с культурами Legionella необходимо использовать халат, маску и перчатки. Работы следует проводить в защитном боксе.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными руководствами.

Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов в соответствии с руководствами и местными нормативными требованиями.

После использования загрязнённые материалы необходимо простерилизовать в автоклаве перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики вне организма.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при работе с образцами и культурами.
• При обращении с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности.
• При необходимости руководствуйтесь требованиями безопасности, указанными в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Для окончательного подтверждения результата необходимо провести дополнительные биохимические исследования.

Рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении и применении в соответствии с инструкцией на этикетке, а также при использовании продукта до истечения срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок серого или чёрного цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,7%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется гель серо-чёрного цвета с опалесценцией.

Реакция

Реакция 4%-ного водного раствора при 25 °C: pH 6,9±0,2.

Диапазон pH

pH: 6,70–7,10.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после добавления добавок FD041A и FD040 и инкубации при 35–37 °C во влажной атмосфере.