HiMedia M892-100G Модифицированная основа буферного агара с активированным углем

Питательная среда HiMedia M892-100G Модифицированная основа буферного агара с активированным углём — порошковая агаровая основа массой 100 г для выделения и культивирования видов Legionella. Среда применяется для анализа клинических и водных образцов; хранение продукта выполняется при 10–30 °C в плотно закрытой упаковке.

Назначение

Среда предназначена для выделения и культивирования видов Legionella из клинических и других образцов.

Типы образцов

• Клинические образцы: моча.
• Образцы воды.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 20,0 г порошка в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте среду в автоклаве при давлении 15 фунтов (≈0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте стерильное восстановленное содержимое одного флакона добавки Legi Growth Supplement (FD041A).
6. Для придания среде селективных свойств добавьте восстановленное содержимое одного флакона MWY Selective Supplement (FD040).
7. Тщательно перемешайте среду и разлейте её в стерильные чашки Петри. Во время разливания обеспечьте постоянное перемешивание, чтобы частицы активированного угля равномерно распределялись в среде.
8. Для дополнительного повышения селективности в расплавленную среду можно добавить селективные добавки FD017, FD037 и FD038 по выбору.

Принцип действия и интерпретация

Виды Legionella представляют собой не образующие спор узкие грамотрицательные палочки. Legionella вызывает пневмонию, включая болезнь легионеров (1), или лёгкое лихорадочное заболевание, известное как лихорадка Понтиака.

В обычных питательных средах виды Legionella не окисляют и не ферментируют углеводы, а также не растут на кровяном агаре с кровью барана. Рост происходит значительно лучше и быстрее на буферном угольно-дрожжевом агаре (2,3).

Основными источниками энергии для Legionella служат аминокислоты. Аминокислота L-цистин является необходимой для роста, поскольку играет важную роль в метаболизме роста Legionella (4). L-цистин и пирофосфат железа способствуют росту Legionella.

Модифицированная буферная угольная агаровая среда аналогична основе буферного угольно-дрожжевого агара, однако дрожжевой экстракт в ней заменён протеозным пептоном. Среда предназначена для выделения и культивирования видов Legionella из клинических и природных образцов. Формула разработана Feeley и соавторами (5), а затем дополнительно модифицирована Edelstein (6).

Функции компонентов среды:

• активированный уголь действует как детоксифицирующий компонент;
• протеозный пептон служит источником витаминов, азота и углерода;
• буфер ACES поддерживает оптимальный pH для роста;
• гидрохлорид L-цистина, пирофосфат железа и α-кетоглутарат стимулируют рост видов Legionella.

Для селективного выделения можно использовать антибиотические добавки, подавляющие рост посторонних микроорганизмов:

• селективная добавка C3V (FD037) содержит цефалотин, колистин, ванкомицин и циклогексимид (7);
• селективная добавка MWY (FD040) содержит глицин, полимиксин B, анизомицин, ванкомицин, бромтимоловый синий и бромкрезоловый пурпурный (8).

При работе с культурами Legionella необходимо использовать халат, маску и перчатки. Работы следует проводить в защитном боксе.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными руководствами (9,10).

Для образцов воды используйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно руководствам и местным нормативным требованиям (11).

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открыванием контейнера ознакомьтесь с этикеткой.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы.
• При обращении с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Указания по безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Для окончательного подтверждения результата необходимо провести дополнительные биохимические исследования.

Контроль качества

Внешний вид

Серый или чёрный однородный свободно сыпучий порошок.

Гелеобразование

Прочный гель, сопоставимый с гелем 1,7%-ного агара.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется серо-чёрный опалесцирующий гель.

Реакция

Реакция 4%-ного водного раствора при 25 °C: pH 6,9 ± 0,2.

Значение pH

pH: 6,70–7,10.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления добавок FD041A и FD040 и инкубации при 35–37 °C во влажной атмосфере.

Примечание: () — соответствующие номера WDCM.*

Оценка эффективности

Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с указаниями на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Упаковка при хранении: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Использование: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия продукт необходимо хранить в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности продукта.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Место хранения: сухая проветриваемая зона, защищённая от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования контейнер необходимо плотно закрывать.
• Для сохранения рабочих характеристик продукт следует использовать в пределах установленного срока годности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками (9,10).

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: M892-100G
• Назначение изделия: агаровая основа питательной среды
• Масса: 100 г
• Физическая форма: порошок
• Тип упаковки: HDPE (полиэтилен высокой плотности)
• Происхождение: животное
• Температура хранения продукта: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C
• Конечный pH при 25 °C: 6,9 ± 0,2
• pH 4%-ного водного раствора: 6,70–7,10

Отличие от исходной буферной угольно-дрожжевой среды

В модифицированной