Основа модифицированного агара МакБрайда для листерий HiMedia M891-500G (уп/500 гр)

Питательная среда Основа модифицированного агара МакБрайда для листерий HiMedia M891-500G (уп/500 гр) — порошковая основа с конечным pH 7,3±0,2. Предназначена для селективного выделения и культивирования Listeria monocytogenes из пищевых, клинических и молочных образцов; рабочая среда используется с селективной добавкой МакБрайда.

Назначение

Основа модифицированного агара МакБрайда применяется для селективного выделения и культивирования Listeria monocytogenes из:

• пищевых продуктов;
• клинических образцов;
• молочных образцов;
• других материалов.

Тип питательной среды: селективная.
Назначение изделия: основа.
Сертификат: ФСЗ 2009/03709.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия рабочим характеристикам. HM peptone B является эквивалентом мясного экстракта.

Принцип действия и интерпретация

Листериоз часто вызывает аборты у крупного рогатого скота и овец. У человека заболевание проявляется септицемией, энцефалитом и циркуляторным моноцитозом. У женщин Listeria может присутствовать в половых путях и передаваться трансплацентарно от инфицированных околоплодных вод и влагалищных выделений новорождённым.

Listeria впервые была достоверно описана Мюрреем и соавторами в связи с эпизоотическим заболеванием среди лабораторных морских свинок и кроликов. Поскольку виды Listeria обычно связаны с животными, вспышки листериоза часто ассоциируются с контаминированными молочными продуктами.

Listeria размножается в широком диапазоне температур — от 3 до 45 °C — и при значениях pH от 5,0 до 9,6. Бактерия также выживает в пищевых продуктах с уровнями pH за пределами указанных диапазонов. Благодаря этим свойствам Listeria сохраняется после различных методов обработки пищевых продуктов.

Основа модифицированного агара МакБрайда для листерий отличается от основы агара МакБрайда для листерий источником питательных веществ, доступных видам Listeria.

• Триптон, пептон и HM peptone B обеспечивают микроорганизмы азотом, углеродом, серой и необходимыми микроэлементами.
• Фенилэтиловый спирт оказывает бактериостатическое действие на грамотрицательные бактерии, избирательно подавляя синтез ДНК.
• Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс среды.
• Глицин ингибирует некоторые грамотрицательные и грамположительные бактерии, включая распространённые сопутствующие контаминанты Escherichia coli и Enterococcus faecalis.
• Хлорид лития также обладает антибактериальной активностью.
• Дополнительная селективность достигается добавлением селективной добавки МакБрайда FD070.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 46,00 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения компонентов среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (ориентировочно 0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. До начала гелеобразования асептически внесите стерильное регидратированное содержимое одного флакона селективной добавки МакБрайда FD070.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Типы образцов

• Клинические образцы: кровь и биологические жидкости.
• Пищевые и молочные образцы.

Пробоподготовка, сбор и обращение с образцами

Выявление L. monocytogenes значительно улучшается при предварительном обогащении в жидких средах. Предварительное обогащение проводят одностадийным или двухстадийным методом.

Одностадийный метод

Инфицированный материал непосредственно инокулируют в основу селективного бульона для листерий M889.

Двухстадийный метод

1. Инфицированный материал инокулируют в основу обогатительного бульона для листерий UVM M890A.
2. Инкубируют при температуре 4 °C в течение нескольких недель. Такой этап называют холодовым обогащением; его применение основано на способности микроорганизма расти при низкой температуре.
3. Затем материал инокулируют в основу вторичного обогатительного бульона Фрейзера M1083.
4. После этого выполняют высев на селективный агар, например на модифицированный агар МакБрайда для листерий.

Предположительные колонии Listeria отбирают при трансиллюминации под углом 45°. Колонии Listeria имеют плотный белый или переливчато-белый цвет и внешний вид дроблёного стекла. Мелкие колонии обычно имеют синий цвет; колонии, не относящиеся к Listeria, имеют желтовато-оранжевую окраску и подлежат дальнейшей очистке.

После использования контаминированные материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид: однородный сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-янтарного цвета.

Реакция: реакция водного раствора с массово-объёмной концентрацией 4,6 % при 25 °C.

Диапазон pH: 7,10–7,50.

Культуральные характеристики определяют в анаэробных условиях с добавлением селективной добавки МакБрайда FD070 после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения сухого продукта: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом состоянии.
• Продукт гигроскопичен; при нарушении условий хранения возможно образование комков.
• Хранить в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования контейнер необходимо герметично закрывать.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение установленного срока годности и при соблюдении рекомендованных условий хранения.

Ограничения применения

• Разные микроорганизмы предъявляют неодинаковые требования к условиям роста и могут демонстрировать различающиеся характеристики роста на этой среде.
• Каждая серия среды протестирована на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа (COA).
• Для выявления конкретного микроорганизма, не указанного в COA, рекомендуется валидировать среду с учётом специфических требований пользователя.
• Для подтверждения результата необходимо провести дополнительные биохимические тесты.
• Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении и использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, а также в пределах установленного срока годности.

Меры предосторожности

Продукт предназначен для диагностики in vitro и профессионального применения.

Перед открытием контейнера необходимо ознакомиться с этикеткой. При работе следует использовать:

• защитные перчатки;
• защитную одежду;
• средства защиты глаз;
• средства защиты лица