Основа бульона для обогащения листерий (UVM) HiMedia M890A-500G (уп/500 гр)

Питательная среда Основа бульона для обогащения листерий (UVM) HiMedia M890A-500G (уп/500 гр) — порошковая элективная основа с конечным pH 7,4±0,2. Применяется для селективного выделения и культивирования Listeria monocytogenes из клинических образцов; среда не является дифференциальной, поэтому для идентификации видов Listeria необходимы дополнительные биохимические исследования.

Назначение и область применения

Среда предназначена для селективного обогащения, выделения и культивирования Listeria monocytogenes из клинических образцов.

Тип образца: клинический материал.

Тип питательной среды: элективный.

Назначение изделия: основа.

Сертификат: ФСЗ 2009/03706.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с рабочими характеристиками среды.

Пептон HM B эквивалентен мясному экстракту.

Принцип действия и интерпретация

Листериоз вызывается Listeria monocytogenes — короткой неспорообразующей грамположительной палочкой. Бактерии широко распространены в почве и кишечнике многих животных, включая птиц, рыб, сельскохозяйственных животных, молочный скот и домашних питомцев. Передача человеку происходит через пищевые продукты, загрязнённые фекалиями, а также при употреблении продуктов животного происхождения, контаминированных бактериями.

Основа бульона для обогащения листерий применяется для селективного культивирования и выделения L. monocytogenes из клинических образцов. Среда первоначально разработана Donnelly и Baigent. Позднее состав был модифицирован: концентрацию налидиксовой кислоты в селективных добавках уменьшили, а концентрацию акрифлавина впоследствии увеличили.

Модифицированная среда Университета Вермонта (UVM) использует двухэтапное селективное обогащение, позволяющее повысить частоту выделения L. monocytogenes из мясных продуктов в течение 3–4 дней. Бульон UVM рекомендован в качестве среды первичного обогащения для восстановления термически повреждённых клеток Listeria.

Триптон, протеозный пептон, пептон HM B и дрожжевой экстракт обеспечивают среду азотистыми и углеродистыми соединениями, аминокислотами с длинной цепью и другими необходимыми питательными веществами. Эскулин придаёт среде дифференциальные свойства. Налидиксовая кислота и гидрохлорид акрифлавина в сочетании с повышенной концентрацией фосфатов обеспечивают селективность среды для Listeria. Налидиксовая кислота подавляет грамотрицательные микроорганизмы, а гидрохлорид акрифлавина — грамположительные микроорганизмы.

Разработанный двухэтапный метод селективного обогащения повышает частоту обнаружения L. monocytogenes в образцах и позволяет завершить процедуру за 3–4 дня.

Культуры Listeria в бульоне опаснее колоний на агаризованных средах, поэтому при работе с бульонными культурами необходимо соблюдать надлежащие меры предосторожности.

Приготовление среды

1. Взвесьте 27,17 г сухой среды и суспендируйте в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте среду автоклавированием при давлении около 0,103 МПа (15 psi) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте восстановленное содержимое одного флакона селективной добавки UVM I (FD136) для первичного обогащения или одного флакона селективной добавки UVM II (FD137) для вторичного обогащения.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте приготовленную среду в пробирки или колбы в необходимом объёме.

Методика первичного и вторичного обогащения

1. Для первичного выделения внесите 25 г или 25 мл образца в 225 мл основы бульона для обогащения листерий с добавленной селективной добавкой UVM I (FD136).
2. Инкубируйте материал в течение 24 ч.
3. После инкубации нанесите 0,2 мл полученной среды на чашку с селективным агаром для Listeria (M567).
4. Одновременно перенесите 0,1 мл бульона обогащения в 10 мл свежей основы бульона для обогащения листерий с добавленной селективной добавкой UVM II (FD137).
5. Для вторичного обогащения инкубируйте приготовленный материал в течение следующих 24 ч.
6. После вторичного обогащения нанесите 0,2 мл среды на чашку с селективным агаром для Listeria (M567).

Требования к образцам и обращению

Для клинических образцов используйте соответствующие методы обращения с материалом в соответствии с установленными руководствами.

После использования контаминированные материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Тип продукта: стандартный
• Физическая форма: порошок
• Происхождение: животного происхождения
• Тип упаковки: HDPE — полиэтилен высокой плотности
• Масса упаковки: 500 г
• Концентрация при приготовлении: 27,17 г на 500 мл воды
• Конечный pH при 25 °C: 7,4±0,2
• Диапазон pH: 7,20–7,60

Контроль качества

Внешний вид

Порошок от кремового до светло-коричневого цвета, однородный, сыпучий.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Раствор янтарного цвета, слегка опалесцирующий, с голубоватым оттенком.

Реакция

Реакция водного раствора с концентрацией 5,43 % (м/об) при 25 °C.

pH: 7,4±0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °