Основа бульона для обогащения листерий (UVM) HiMedia M890A-500G (уп/500 гр)

Элективная основа бульона для обогащения листерий (UVM) HiMedia M890A-500G (уп/500 г) производства HiMedia. Рекомендуется для селективного выделения и культивирования Listeria monocytogenes из клинического материала.

Принцип измерения

Бульон UVM (University of Vermont Modification) представляет собой двухэтапную селективную среду для обогащения, которая обеспечивает более высокий уровень изоляции Listeria monocytogenes из образцов (включая мясные продукты) в течение 3–4 дней. Данная основа рекомендуется в качестве первичного бульона для восстановления поврежденных нагревом клеток Listeria.

В составе среды триптон, протеоз-пептон, HM-пептон B и экстракт дрожжей обеспечивают необходимые азотистые и углеродные соединения, длинноцепочечные аминокислоты и другие питательные вещества. Эскулин придает среде дифференциальные свойства. Селективность обеспечивается сочетанием налидиксовой кислоты, гидрохлорида акрифлавина и высокой концентрации фосфатов: налидиксовая кислота подавляет рост грамотрицательных организмов, а акрифлавин гидрохлорид — грамположительных.

Методика проведения анализа

Для достижения максимальной эффективности обнаружения L. monocytogenes используется метод двухэтапного селективного обогащения:

1. Первичное обогащение:

   • Внесите 25 г или 25 мл образца в 225 мл бульона Listeria Enrichment Medium Base с добавлением селективной добавки UVM I (FD136).
   • Инкубируйте в течение 24 часов.
   • После инкубации высейте 0,2 мл среды на чашки с селективным агаром для листерий (Listeria Selective Agar, M567).

2. Вторичное обогащение:

   • Одновременно с первым этапом перенесите 0,1 мл бульона первичного обогащения в 10 мл свежего бульона Listeria Enrichment Medium Base с добавлением селективной добавки UVM II (FD137).
   • Инкубируйте в течение 24 часов.
   • Высейте 0,2 мл среды на чашки с селективным агаром для листерий (Listeria Selective Agar, M567).

Важное примечание: Культуры Listeria в бульоне более опасны, чем колонии на агаре; при работе с ними необходимо соблюдать строгие меры предосторожности.

Приготовление и стерилизация

1. Растворите 27,17 г порошка в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте содержимое 1 флакона селективной добавки UVM I (FD136) для первичного обогащения или 1 флакона добавки UVM II (FD137) для вторичного обогащения.
6. Тщательно перемешайте и разлейте по пробиркам или колбам.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Общие параметры:

Контроль качества

Внешний вид и реакция

• Вид порошка: однородный свободнотекучий порошок от кремового до светло-коричневого цвета.
• Цвет и прозрачность среды: янтарный раствор, слегка опалесцирующий с голубоватым оттенком.
• Реакция: pH 7,4 $\pm$ 0,2 (для 5,43% в/в водного раствора при 25 °C).
• Диапазон pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов.

*Соответствующие номера WDCM.

Область применения и ограничения

Применяется для анализа клинических образцов. Ограничение: Среда не является дифференциальной, поэтому для идентификации конкретных видов Listeria требуется дополнительное биохимическое тестирование.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C. Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание образования комков. Хранить в сухом проветриваемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Утилизация: использованные или непригодные препараты подлежат стерилизации в автоклаве и/или сжиганию в соответствии с лабораторными протоколами по обращению с инфекционными материалами.

Меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro. Только для профессионального использования.
• Использовать средства индивидуальной защиты: перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдать правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.