HiMedia M890A-100G Основа среды для обогащения листерий (UVM)

Компонент питательной среды HiMedia M890A-100G Основа среды для обогащения листерий (UVM) производства HiMedia представляет собой порошковую основу для селективного выделения и культивирования Listeria monocytogenes. Применяется для анализа клинических образцов; среда не является дифференциальной и требует дополнительных биохимических тестов для идентификации вида.

Назначение

Основа среды для обогащения листерий (UVM) предназначена для селективного культивирования и выделения Listeria monocytogenes из клинических образцов.

• Тип образца: клинические образцы
• Назначение изделия: основа питательной среды
• Масса: 100 г
• Форма: порошок

Состав

Состав приведён для конечной среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров эффективности. Пептон HM B эквивалентен мясному экстракту.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 27,17 г порошка в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте восстановленное содержимое одного флакона селективной добавки UVM I (FD136) для первичного обогащения или одного флакона селективной добавки UVM II (FD137) для вторичного обогащения.
6. Тщательно перемешайте и разлейте среду в пробирки или колбы в необходимом объёме.

Принцип действия и интерпретация

Листериоз вызывается короткими неспорообразующими грамположительными палочками Listeria monocytogenes. Бактерии распространены в почве и кишечнике многих животных, включая птиц, рыб, сельскохозяйственных животных, молочный скот и домашних питомцев. Передача человеку происходит через пищевые продукты, загрязнённые фекалиями, а также при употреблении продуктов животного происхождения, содержащих бактерии.

Среда для обогащения листерий предназначена для селективного культивирования и выделения L. monocytogenes из клинических образцов. Первоначальная формула среды разработана Donnelly и Baigent. Позднее концентрацию налидиксовой кислоты в селективных добавках уменьшили, а концентрацию акрифлавина увеличили.

Модифицированная среда Университета Вермонта (UVM) использует двухэтапное селективное обогащение, обеспечивающее более высокую частоту выделения L. monocytogenes из мясных продуктов в течение 3–4 суток. Бульон UVM рекомендуется в качестве бульона для первичного обогащения при восстановлении повреждённых нагреванием клеток Listeria.

• Триптон, пептон протеозный, пептон HM B и дрожжевой экстракт обеспечивают среду азотистыми и углеродистыми соединениями, аминокислотами с длинной цепью и другими необходимыми питательными веществами.
• Эскулин придаёт среде дифференциальные свойства.
• Налидиксовая кислота и гидрохлорид акрифлавина совместно с повышенной концентрацией фосфатов обеспечивают селективность среды для Listeria.
• Налидиксовая кислота ингибирует грамотрицательные микроорганизмы.
• Гидрохлорид акрифлавина ингибирует грамположительные микроорганизмы.

Разработанный двухэтапный метод селективного обогащения повышает частоту обнаружения L. monocytogenes в образцах и занимает 3–4 суток.

Методика первичного и вторичного обогащения

1. Для первичного выделения внесите 25 г или 25 мл образца в 225 мл основы среды для обогащения листерий с добавленной селективной добавкой UVM I (FD136).
2. Инкубируйте среду в течение 24 ч.
3. После инкубации нанесите 0,2 мл среды на чашку с селективным агаром для листерий (M567).
4. Одновременно перенесите 0,1 мл бульона обогащения в 10 мл свежей основы среды для обогащения листерий с добавленной селективной добавкой UVM II (FD137).
5. Для вторичного обогащения инкубируйте полученную среду в течение 24 ч.
6. После вторичного обогащения нанесите 0,2 мл среды на чашку с селективным агаром для листерий (M567).

Бульонные культуры Listeria опаснее колоний на агаризованных средах. При работе с бульонными культурами необходимо соблюдать соответствующие меры предосторожности.

Условия работы с образцами

Для клинических образцов используйте соответствующие методы обращения с материалом согласно установленным лабораторным руководствам.

После завершения работы загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры безопасности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открыванием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• Используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При работе с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической практики.
• При обращении с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Среда не является дифференциальной. Для идентификации среди видов Listeria необходимо дополнительное биохимическое тестирование.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: M890A-100G
• Тип продукта: стандартный
• Происхождение: животное
• Физическая форма: порошок
• Тип упаковки: ПЭВП (HDPE, полиэтилен высокой плотности)
• Масса: 100 г
• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок кремового или светло-коричневого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Раствор янтарного цвета, слегка опалесцирующий, с голубоватым оттенком.

Реакция среды

• Концентрация водного раствора: 5,43 % масс./об.
• Температура определения: 25 °C
• pH: 7,4 ± 0,2

Диапазон pH

7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Хранение и срок годности

• Храните сухой продукт при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Приготовленную среду храните при температуре 2–8 °C.
• Используйте продукт до истечения срока годности, указанного на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение