HiMedia M889-5KG Основа селективного бульона для листерий

Основа селективного бульона для листерий HiMedia M889-5KG производства HiMedia в форме порошка. Рекомендуется для селективной изоляции и культивирования Listeria monocytogenes из клинических образцов и пищевых продуктов.

Принцип измерения

Listeria monocytogenes представляет собой короткую грамположительную неспорообразующую палочковидную бактерию, которая в старых культурах может выглядеть коккоподобно. Вид Listeria размножается в широком диапазоне температур от 3 °C до 45 °C (оптимум 30–37 °C).

Среда разработана согласно методике Lovett et al. для селективного обогащения видов Listeria из молока, молочных продуктов и других пищевых продуктов; также рекомендована комитетом ISO (с модификацией добавки FD063I).

Функции компонентов:

• Триптон, соевый пептон и экстракт дрожжей: обеспечивают углеродные и азотистые соединения, длинноцепочечные аминокислоты и витамины, необходимые для метаболизма бактерий.
• Декстроза (глюкоза): служит источником энергии.
• Селективные добавки (вводятся отдельно):
  • Циклогексимид: подавляет рост сапрофитных грибов.
  • Налидиксовая кислота: ингибирует рост грамотрицательных организмов.
  • Акрифлавин: производное акридина, подавляет многие грамположительные микроорганизмы и обладает слабым фунгицидным действием.

Методика проведения анализа

Приготовление среды

1. {36,0 г} порошка суспендировать в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагреть до полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 lbs) в течение 15 минут.
4. Охладить до комнатной температуры.
5. Асептически добавить одну ампулу селективной добавки ANC (FD063) или две ампулы добавки ANC (FD0631) в зависимости от требований.
6. Тщательно перемешать перед разливом в стерильные пробирки или колбы.

Процедура обогащения

1. Образец массой 25 г или объёмом 25 мл добавить к 225 мл среды в пакет для гомогенизатора (stomacher bag).
2. При необходимости гомогенизировать материал.
3. Инкубировать при температуре 30 °C до 7 суток. Срок инкубации в 7 дней обеспечивает лучший выход Listeria из молочных продуктов и окружающей среды.
4. Выполнить пересев обогащённого бульона на селективный агар для листерий (Listeria Selective Agar M567) через 1, 2 и 7 дней инкубации.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Общие параметры

• Происхождение компонентов: животное
• Тип продукта: стандартный
• Физическая форма: порошок
• Материал упаковки: ПНД (HDPE)
• Вес: 5 кг

Контроль качества

Внешний вид и реакция

• Внешний вид: однородный свободнотекучий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Цвет и прозрачность готовой среды: прозрачный раствор флуоресцентного жёлтого цвета.
• Реакция 3,6% (масс./об.) водного раствора при 25 °C: pH 7,3 $\pm$ 0,2.
• Диапазон pH: 7,10–7,50.

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются при использовании селективной добавки ANC (FD063 / FD0631) после инкубации при 30–35 °C в течение 24–48 часов.

Область применения и ограничения

Типы образцов

• Клинические образцы: фекалии.
• Пищевые продукты: сырое молоко, мясо, овощи, морепродукты.
• Объекты окружающей среды: силос, почва, гниющая растительность, сточные воды, солома.

Ограничения

• Для окончательной идентификации изолированных организмов требуются дальнейшая селективная изоляция и биохимические тесты.
• Listeria monocytogenes является высокопатогенным организмом; при работе с культурами необходимо соблюдать строгие меры предосторожности.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение сухого порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом помещении.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание комкования.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты, а также материалы, контактировавшие с клиническими образцами, подлежат обязательному обеззараживанию путем автоклавирования или сжигания в соответствии с лабораторными протоколами по обращению с инфекционными материалами.