Основа селективного бульона для листерий HiMedia M889-500G (уп/500 гр)

Питательная среда «Основа селективного бульона для листерий HiMedia M889-500G (уп/500 гр)» — порошковая основа для селективного выделения и культивирования Listeria monocytogenes. Применяется для обогащения клинических образцов, включая фекалии, а также молока, молочных продуктов и других пищевых продуктов; инкубация проводится при 30 °C до 7 суток.

Назначение

Среда предназначена для селективного выделения и культивирования видов Listeria, прежде всего Listeria monocytogenes, из клинических образцов, молока, молочных продуктов и других пищевых продуктов.

Тип питательной среды: селективная
Назначение изделия: основа селективного бульона
Форма выпуска: порошок
Масса: 500 г
Сертификат: ФСЗ 2009/03709
Происхождение: животное
Тип продукта: стандартный
Тип упаковки: ПЭВП (HDPE)

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация

Listeria monocytogenes — короткая грамположительная неспорообразующая палочковидная бактерия, которая в старых культурах приобретает кокковидную форму. Listeria размножается в широком диапазоне температур — от 3 до 45 °C; оптимальный диапазон температуры составляет 30–37 °C.

L. monocytogenes выделяют из многочисленных объектов окружающей среды, включая силос, почву, разлагающуюся растительность, сточные воды, влажную землю, солому и фекалии. Небольшое количество микроорганизмов обычно обнаруживается в сыром молоке, мясе, овощах, морепродуктах и объектах пищевого производства.

Для выделения небольшого количества L. monocytogenes применяют процедуры обогащения. Повреждённые клетки L. monocytogenes могут находиться в состоянии сублетального стресса после воздействия нагревания, замораживания или кислой среды. Для восстановления таких клеток требуется ресусцитация в неселективной среде при температуре, благоприятной для устранения сублетальных повреждений.

Селективный бульон для листерий разработан по формуле Lovett и соавторов для селективного обогащения видов Listeria из молока, молочных продуктов и других пищевых продуктов. Среда рекомендована комитетом ISO с модификацией состава селективной добавки FD063I.

Триптон, соевый пептон и дрожжевой экстракт обеспечивают среду соединениями углерода и азота, аминокислотами с длинной цепью и витаминами, необходимыми для метаболизма бактерий. Декстроза служит источником энергии.

Селективность среды обеспечивается добавлением селективной добавки:

• циклогексимид подавляет рост сапрофитных грибов;
• налидиксовая кислота подавляет рост грамотрицательных микроорганизмов;
• акрифлавин подавляет грамположительные микроорганизмы.

Акрифлавин представляет собой производное акридина с бактериостатическими свойствами в отношении многих грамположительных бактерий и слабой фунгицидной активностью.

Методика приготовления и обогащения

1. Суспендируйте 36,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте среду в автоклаве при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (примерно 0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до комнатной температуры.
5. В асептических условиях добавьте восстановленное содержимое одного флакона селективной добавки ANC Selective Supplement FD063 либо двух флаконов селективной добавки ANC Selective Supplement FD0631 — в зависимости от выбранной схемы.
6. Тщательно перемешайте среду.
7. Разлейте среду в стерильные пробирки или колбы необходимого объёма.

Для обогащения добавьте 25 г или 25 мл образца к 225 мл среды в мешке для гомогенизатора. При необходимости гомогенизируйте материал.

Инкубируйте при 30 °C до 7 суток. Инкубация в течение 7 суток способствует лучшему восстановлению находящихся в состоянии стресса клеток Listeria из молока и молочных продуктов.

Проводите дальнейший пересев обогатительного бульона на селективный агар для листерий M567 через 1, 2 и 7 суток.

Тип образца

Тип образца: клинические образцы — фекалии.

Сбор и обращение с образцами

При работе с клиническими образцами применяйте соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Технические характеристики

• Концентрация при приготовлении: 36,0 г/л
• Конечный pH при 25 °C: 7,3 ± 0,2
• Форма: порошок
• Цвет и внешний вид порошка: от кремового до жёлтого, однородный, сыпучий порошок
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: флуоресцентно-жёлтый прозрачный раствор в пробирках
• Реакция: реакция водного раствора концентрацией 3,6 % масса/объём при 25 °C
• Диапазон pH: 7,10–7,50
• Условия хранения сухого продукта: 10–30 °C в плотно закрытой ёмкости
• Условия хранения приготовленной среды: 2–8 °C
• Упаковка: ПЭВП (HDPE)

Контроль культуральных свойств

Культуральные характеристики определяют с добавлением селективной добавки ANC Selective Supplement FD063 или FD0631 после инкубации при 30–35 °C в течение 24–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Условия хранения и срок годности

Храните сухую среду при температуре 10–30 °C в плотно закрытой ёмкости, а приготовленную среду — при температуре 2–8 °C. Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде, чтобы предотвратить комкование из-за гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к образованию комков.

Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После использования плотно закрывайте ёмкость. Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в течение указанного срока годности.

Меры предосторожности

• Только для применения in vitro.
• Только для профессион