HiMedia M889-2.5KG Основа селективного бульона для листерий

Основа селективного бульона для листерий HiMedia M889-2.5KG (производство HiMedia) предназначена для селективного выделения и культивирования Listeria monocytogenes из клинических образцов. Среда используется для обогащения проб с низким содержанием микроорганизмов; вес упаковки составляет 2,5 кг.

Принцип измерения

Основа бульона разработана согласно методике Lovett et al. и рекомендована комитетом ISO (с модификацией добавки FD063I) для селективного обогащения видов Listeria из молока, молочных продуктов и других пищевых продуктов.

Компоненты среды выполняют следующие функции:

• Триптон, соевый пептон и экстракт дрожжей: обеспечивают углеродные и азотные соединения, длинноцепочечные аминокислоты и витамины, необходимые для метаболизма бактерий.
• Декстроза (глюкоза): служит источником энергии.
• Селективные добавки (вводятся отдельно):
  • Циклогексимид: подавляет рост сапрофитных грибов.
  • Налидиксовая кислота: ингибирует рост грамотрицательных организмов.
  • Акрифлавин: производное акридина, обладающее бактериостатическим действием на многие грамположительные бактерии и слабой фунгицидной активностью.

Состав

Состав, г/л:

Методика приготовления и применения

Приготовление среды

1. Суспендировать 36,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагреть до полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$ 0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладить до комнатной температуры.
5. В асептических условиях добавить одну ампулу селективной добавки ANC (FD063) или две ампулы ANC (FD0631) в зависимости от требований.
6. Тщательно перемешать перед разливом в стерильные пробирки или колбы.

Процедура обогащения

1. Образец массой 25 г или объёмом 25 мл добавить к 225 мл среды (например, в пакет для гомогенизатора).
2. При необходимости гомогенизировать материал.
3. Инкубировать при температуре 30 °C до 7 суток. Срок инкубации в 7 дней обеспечивает лучший выход экологически стрессированных штаммов Listeria из молочных продуктов.
4. После 1, 2 и 7 дней инкубации произвести пересев бульона на селективный агар для листерий (Listeria Selective Agar, M567).

Технические характеристики

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Цвет и прозрачность готовой среды: прозрачный раствор флуоресцентного жёлтого цвета.
• Реакция 3,6% (масса/объём) водного раствора при 25 °C: pH 7,3 ± 0,2.
• Диапазон pH: 7,10–7,50.

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают с добавлением селективной добавки ANC (FD063 / FD0631) после инкубации при 30–35 °C в течение 24–48 часов.

*Соответствующие номера WDCM.

Область применения и ограничения

Среда рекомендована для анализа клинических образцов (в частности, фекалий).

Ограничения:

• Для окончательной идентификации изолированных организмов требуются дополнительные селективные методы выделения и биохимические тесты.
• Listeria monocytogenes является высокопатогенным организмом; работа с культурами должна проводиться с соблюдением строгих мер предосторожности.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение сухого порошка: при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников воспламенения и экстремальных температур.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты, а также материалы, контактировавшие с клиническими образцами, подлежат обязательной стерилизации в автоклаве или сжиганию в соответствии с лабораторными протоколами по обращению с инфекционными материалами.