HiMedia M889-1KG Основа селективного бульона для листерий

Сухая питательная среда HiMedia M889-1KG Основа селективного бульона для листерий предназначена для селективного выделения и культивирования Listeria monocytogenes из клинических образцов и выпускается в форме порошка. Среда используется для обогащения образцов, содержащих небольшое количество листерий, при этом окончательная идентификация изолированных микроорганизмов требует последующего выделения на селективном агаре и проведения биохимических тестов.

Назначение

Основа селективного бульона предназначена для селективного выделения и культивирования Listeria monocytogenes из клинических образцов, включая фекалии. Среда также применяется для селективного обогащения видов Listeria из молока, молочных продуктов и других пищевых продуктов.

• Назначение изделия: основа питательной среды
• Форма выпуска: порошок
• Масса: 1 кг
• Происхождение: животного происхождения
• Тип продукта: стандартный
• Тип упаковки: ПЭВП (HDPE, полиэтилен высокой плотности)

Состав

Формула рассчитана и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Принцип действия и интерпретация

Listeria monocytogenes — короткая грамположительная неспорообразующая палочковидная бактерия, которая в более старых культурах приобретает коккоидную форму. Listeria размножается в широком диапазоне температур — от 3 °C до 45 °C; оптимальный диапазон составляет 30–37 °C.

L. monocytogenes выделяется из многочисленных объектов окружающей среды, включая силос, почву, разлагающуюся растительность, сточные воды, влажную землю, солому и фекалии. Небольшое количество микроорганизмов часто обнаруживается в сыром молоке, мясе, овощах, морепродуктах и объектах пищевого производства.

Для выделения небольшого количества L. monocytogenes применяют процедуры обогащения. Повреждённые клетки L. monocytogenes подвергаются сублетальному стрессу после воздействия нагревания, замораживания или кислой среды. Для восстановления таких клеток требуется ресусцитация в неселективной среде при температуре, благоприятной для устранения сублетального повреждения.

Селективный бульон для листерий сформулирован по методике Lovett и соавторов для селективного обогащения видов Listeria из молока, молочных продуктов и других пищевых продуктов. Рецептура рекомендована комитетом ISO с модификацией состава селективной добавки FD063I.

Триптон, соевый пептон и дрожжевой экстракт обеспечивают среду соединениями углерода и азота, аминокислотами с длинной цепью и витаминами, необходимыми для бактериального метаболизма. Декстроза служит источником энергии. Селективность среды обеспечивается добавлением селективной добавки:

• циклогексимид подавляет рост сапрофитных грибов;
• налидиксовая кислота подавляет рост грамотрицательных микроорганизмов;
• акрифлавин подавляет грамположительные микроорганизмы.

Акрифлавин является производным акридина с бактериостатическими свойствами в отношении многих грамположительных бактерий и слабой фунгицидной активностью.

Методика приготовления и проведения обогащения

1. Суспендируйте 36,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте смесь для полного растворения среды.
3. Простерилизуйте среду в автоклаве при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до комнатной температуры.
5. В асептических условиях добавьте восстановленное содержимое одного флакона селективной добавки ANC FD063 или двух флаконов селективной добавки ANC FD0631 — в зависимости от выбранной схемы.
6. Тщательно перемешайте среду.
7. Разлейте среду в стерильные пробирки или колбы необходимого объёма.

Для проведения обогащения внесите 25 г или 25 мл образца в 225 мл среды в пакет для гомогенизатора. При необходимости гомогенизируйте материал.

• Температура инкубации: 30 °C
• Продолжительность инкубации: до 7 суток
• Пересеваемая среда: селективный агар для листерий M567
• Сроки пересева: через 1, 2 и 7 суток

Семисуточная инкубация позволяет эффективнее выделять подвергшиеся стрессу в окружающей среде клетки Listeria из молока и молочных продуктов.

Тип образца

• Клинические образцы: фекалии

Отбор и обращение с образцами

При работе с клиническими образцами необходимо применять соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными руководствами. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед вскрытием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.
• Listeria monocytogenes является высокопатогенным микроорганизмом; при работе с культурой необходимо соблюдать соответствующие меры предосторожности.

Контроль качества

Внешний вид

Кремовый или жёлтый однородный сыпучий порошок.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Флуоресцентно-жёлтый прозрачный раствор в пробирках.

Реакция среды

• Условия определения: водный раствор с массово-объёмной концентрацией 3,6 % при 25 °C
• pH: 7,3 ± 0,2

Диапазон pH

• pH: 7,10–7,50

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления селективной добавки ANC FD063 или FD0631 и инкубации при 30–35 °C в течение 24–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ограничения применения

• Для окончательной идентификации выделенных микроорганизмов необходимы последующее селективное выделение и биохимические тесты.
• Listeria monocytogenes является высокопатогенным микроорганизмом; при работе с ним необходимо соблюдать соответствующие меры предосторожности.

Оценка рабочих характеристик

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C
• Условия хранения приготовленной среды: 2–8