Diphtheria Virulence Agar Base HiMedia M882-500G (500 г)

Сухая питательная среда Diphtheria Virulence Agar Base HiMedia M882-500G (500 г) производства HiMedia. Рекомендуется для определения токсигенности Corynebacterium diphtheriae.

Область применения

Среда используется для диагностики токсигенности возбудителя дифтерии. В качестве образца материала применяются клинические пробы, в частности, мазки из зева.

Принцип измерения и интерпретация

Патогенность Corynebacterium diphtheriae обусловлена выработкой мощного экзотоксина, воздействующего на сердечную мышцу и периферические нервы. Принцип анализа основан на методе Элека: токсин, диффундирующий от штриха культуры подозреваемого возбудителя, вступает в реакцию с дифтерийным антитоксином, который диффундирует из полоски фильтровальной бумаги, помещенной в агар. В месте их встречи образуется белая линия преципитатов (осадка).

Техническая основа среды:

• Протеозопептон: обеспечивает источники углерода и азота, необходимые для роста широкого спектра микроорганизмов и продукции токсина.
• Хлорид натрия: поддерживает осмотический баланс.
• Агар: твердеющий агент.
• Теллурит калия (добавляется в виде supplements): подавляет рост большинства грамотрицательных бактерий, за исключением видов Corynebacterium, Streptococcus mitis, Streptococcus salivarius и энтерококков.

Интерпретация результатов:

• Положительный результат: образование линии преципитатов при инкубации инокулированной чашки.
• Ограничения: линию преципитатов также могут образовывать Corynebacterium ulcerans и Corynebacterium pseudotuberculosis. Возможны ложноположительные результаты, в связи с чем параллельно всегда должен проводиться положительный контроль.

Состав

Состав, г/л:

Методика приготовления и проведения анализа

Приготовление базовой среды

1. Суспендируйте 37,5 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладите до 55–60 °C.

Подготовка чашки и посев

1. В чашку Петри диаметром 100 мм асептически добавьте 2 мл стерильного обогатителя KL Virulence Enrichment (FD072) и 0,5 мл стерильной селективной добавки PTe 1% Selective Supplement (FD052).
2. Быстро добавьте 10 мл стерильной базовой среды Diphtheria Virulence Agar Base.
3. До затвердевания среды поместите по диаметру чашки полоску фильтровальной бумаги, насыщенную potent Diphtheria antitoxin, так, чтобы полоска опустилась на дно.
4. Выполните обильный посев культуры поперек полоски.

Культуральные характеристики

Характеристики определены при использовании KL Virulence Enrichment (FD072) и 0,5 мл PTe 1% Selective Supplement (FD052) после инкубации при 35–37 °C в течение 24–72 часов.

Технические характеристики

• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от кремового до желтого цвета
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,5 % агаром
• Цвет и прозрачность готовой среды: янтарный цвет, слегка опалесцирующий гель
• Реакция водного раствора (3,75 % мас./об. при 25 °C): pH 7,8 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,60–8,00
• Происхождение компонентов: животное
• Форма выпуска: порошок
• Тип упаковки: ПНД (HDPE)

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом месте, защищенном от источников возгорания и экстремальных температур.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, после вскрытия флакон следует плотно закрывать для предотвращения комкования.

Меры предосторожности и утилизация

• Только для диагностики in vitro.
• При работе использовать защитные перчатки, одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности при работе с клиническими образцами.
• Утилизация: все загрязненные материалы и остатки среды должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией.