Основа бульона Мюллера-Кауфмана с тетратионатом HiMedia M876-500G (уп/500 гр)

Питательная среда HiMedia Основа бульона Мюллера-Кауфмана с тетратионатом HiMedia M876-500G (уп/500 гр) — селективная основа для обогащения и выделения Salmonella, соответствующая ГОСТ Р 52814-2007. Основа применяется при исследовании пищевых продуктов, а приготовленная среда нестабильна и должна использоваться немедленно либо храниться в тёмном месте при 2–8 °C не более 7 суток.

Назначение

Основа бульона Мюллера–Кауфмана с тетратионатом предназначена для улучшенного обогащения и выделения Salmonella из пищевых образцов.

• Тип питательной среды: элективный
• Назначение изделия: основа
• Тип образца: пищевые продукты
• Сертификат: ФСЗ 2009/03706
• Соответствие: ГОСТ Р 52814-2007; состав основы соответствует спецификациям ISO

Состав

Формула рассчитана и стандартизирована для обеспечения заданных показателей эффективности.

Жёлчь # эквивалентна бычьей жёлчи.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 82,05 г основы в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте среду только до кипения.
3. Не автоклавируйте среду.
4. Охладите приготовленную основу.
5. Непосредственно перед использованием в асептических условиях добавьте 19 мл йодного раствора следующего состава: 20 г йода и 25 г йодида калия на 100 мл стерильной дистиллированной воды.
6. Добавьте 9,5 мл 0,1%-ного раствора бриллиантового зелёного.
7. Тщательно перемешайте среду перед разливом в стерильные пробирки, чтобы равномерно распределить карбонат кальция.

Из-за присутствия карбоната кальция приготовленная среда образует опалесцирующий раствор с белым осадком.

Принцип действия и интерпретация

Исследование различных видов пищевой продукции на наличие Salmonella требует методов, отличающихся от методов, применяемых в клинических лабораториях. Это связано с обычно низким содержанием Salmonella в пищевых продуктах и часто неудовлетворительным физиологическим состоянием патогенов после воздействия стрессовых факторов при производстве или хранении пищевых продуктов.

Повреждённые клетки Salmonella восстанавливаются в неселективной жидкой питательной среде, что облегчает обнаружение сублетально повреждённых микроорганизмов. Оптимальная среда предварительного обогащения должна обеспечивать восстановление повреждений клеток, разбавление токсичных или ингибирующих веществ и достаточную питательность для роста Salmonella.

При исследовании пищевых продуктов на наличие Salmonella культуры предварительного обогащения обычно инкубируют при 35–37 °C в течение 18–24 ч, после чего часть культуры пересевают в одну или несколько селективных жидких сред обогащения. Обычно 1 мл культуры предварительного обогащения вносят в 9 мл селективной среды обогащения.

Селективные среды обогащения содержат компоненты, стимулирующие размножение Salmonella и подавляющие рост конкурирующих несальмонеллёзных микроорганизмов. Для предварительного обогащения Salmonella из пищевых продуктов BAM рекомендует бульон Лактоза (M1003). Селективное обогащение проводят в тетратионатном бульоне и среде Раппапорта–Вассилиадиса. Для обнаружения пищевых Salmonella широко применяются различные модификации тетратионатного бульона.

Мюллер рекомендовал тетратионатный бульон как селективную среду для выделения Salmonella. Кауфман модифицировал формулу, включив бычью жёлчь и бриллиантовый зелёный в качестве селективных компонентов для подавления, в частности, бактерий рода Proteus. Бриллиантово-зелёный тетратионатный бульон указан в спецификации Британского стандарта для выделения Salmonella из мяса и мясных продуктов, а также из птицы и продуктов из птицы. Среда также рекомендована для селективного выделения Salmonella из фекалий животных и сточных вод, загрязнённых канализационными стоками.

Селективность обеспечивается тетратионатом, образующимся в результате реакции тиосульфата с йодом. Применение более чем одной селективной жидкой среды повышает вероятность выделения Salmonella из образцов, содержащих несколько серотипов.

Триптон и соевый пептон служат источниками углерода, азота, витаминов и минеральных веществ. Жёлчь и добавленный бриллиантовый зелёный являются селективными компонентами, подавляющими грамположительные и другие грамотрицательные микроорганизмы. Карбонат кальция выполняет функцию буфера. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие. Тиосульфат натрия служит источником серы. Анионы тетратионата S₄O₆²⁻ являются основным селективным компонентом среды обогащения.

Помимо Salmonella, в среде могут расти Morganella morganii и некоторые представители семейства Enterobacteriaceae. Поэтому для всех предположительно идентифицированных колоний Salmonella необходимо проводить подтверждающие тесты.

Пробоподготовка и условия проведения

1. При необходимости добавьте 4 мг новобиоцина на 1 л бульона для подавления видов Proteus.
2. Внесите приблизительно 10 г образца в 100 мл бульона.
3. Тщательно встряхните суспензию.
4. Поместите колбу на 15 мин в водяную баню при 45 °C.
5. Перенесите колбу в инкубатор или водяную баню, установленные на 43 °C.
6. Инкубируйте 18–24 ч и 48 ч.
7. После инкубации выполните пересев на модифицированный бриллиантово-зелёный агар (M016).

По данным исследований, инкубация селективной среды обогащения при 43 °C повышает выделение Salmonella.

Полная среда не подходит для выращивания Salmonella Typhi, Salmonella Sendai, Salmonella Pullorum и других указанных видов.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

После добавления растворов бриллиантового зелёного и йода образуется светло-зелёный опалесцирующий раствор с обильным белым осадком.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после пересева на соево-казеиновый агар и инкубации при 43 °C в течение 18–24 ч с добавленными растворами йода и бриллиантового зелёного.

* Соответствующие номера WDCM.

Стабильность и хранение

• Условия хранения сухой основы: 10–30 °C, плотно закрытый контейнер.
• Условия хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок хранения приготовленной среды: в тёмном месте не более 7 суток.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.
• После вскрытия: хранить продукт в сухом виде, плотно закрыв флакон.
• Требования к месту хранения: сухое проветриваемое помещение, защищённое от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования контейнер необходимо плотно закрывать.

Продукт гигроскопичен. При недостаточно плотном закрытии или ненадлежащем хранении возможно образование комков. Приготовленная полная среда нестабильна и должна использоваться немедленно.

Ограничения применения

1. Полная среда нестабильна и должна использоваться немедленно. Допускается хранение при 2–8 °C в тёмном месте не более 7 суток.
2. Подтверждающие тесты необходимо проводить для всех предположительно идентифицированных колоний Salmonella.
3. В среде могут расти микроорганизмы, отличные от Salmonella, включая Morganella morganii и некоторые представители Enterobacteriaceae.
4. Среда не подходит для выращивания Salmonella Typhi, Salmonella Sendai, *