Основа бульона Мюллера-Кауфмана с тетратионатом HiMedia M876-100G (уп/100 гр)

Элективная питательная среда «Основа бульона Мюллера-Кауфмана с тетратионатом HiMedia M876-100G (уп/100 гр)» в форме порошка массой 100 г. Предназначена для обогащения и выделения Salmonella из пищевых образцов; приготовленная среда нестабильна и должна использоваться непосредственно после приготовления.

Назначение и область применения

Основа бульона Мюллера—Кауфмана с тетратионатом предназначена для селективного обогащения и выделения Salmonella из пищевых образцов.

Исследование пищевых продуктов на наличие Salmonella требует методов, отличающихся от применяемых в клинических лабораториях. Это связано с обычно низким содержанием Salmonella в пищевых продуктах и часто неудовлетворительным физиологическим состоянием возбудителей после воздействия стрессовых факторов при производстве или хранении продуктов.

Повреждённые клетки Salmonella восстанавливаются в неселективной жидкой питательной среде, что облегчает выявление сублетально повреждённых микроорганизмов. Идеальная среда для предварительного обогащения должна обеспечивать восстановление клеточных повреждений, разбавление токсичных или ингибирующих веществ и достаточную питательность для роста Salmonella.

При анализе пищевых продуктов культуры предварительного обогащения обычно инкубируют при 35–37 °C в течение 18–24 ч, после чего часть культуры пересевают в одну или несколько селективных жидких сред обогащения. Обычно 1 мл культуры предварительного обогащения вносят в 9 мл селективной среды обогащения.

Лактозный бульон M1003 рекомендован BAM для предварительного обогащения при выделении Salmonella из пищевых продуктов. Селективное обогащение проводят в тетратионатном бульоне и среде Раппапорта—Вассилиадиса. Для выявления пищевых Salmonella широко применяются различные модификации тетратионатного бульона.

Бульон Мюллера—Кауфмана с тетратионатом рекомендован как селективная жидкая среда для выделения Salmonella. Формула Кауфмана была модифицирована добавлением бычьей желчи и бриллиантового зелёного в качестве селективных компонентов для подавления, в частности, бактерий рода Proteus. Среда применяется для выделения Salmonella из мяса и мясных продуктов, птицы и продуктов из птицы, а также из фекалий животных и воды, загрязнённой сточными водами. Селективность обеспечивается тетратионатом, образующимся в результате реакции тиосульфата и йода. Использование более одной селективной жидкой среды повышает вероятность выделения Salmonella из образцов, содержащих несколько серотипов.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров. Компонент Bile # эквивалентен бычьей желчи.

Принцип действия и интерпретация

Триптон и соевый пептон служат источниками углерода, азота, витаминов и минеральных веществ. Желчь и добавляемый бриллиантовый зелёный являются селективными компонентами, подавляющими рост грамположительных и других грамотрицательных микроорганизмов.

Карбонат кальция выполняет функцию буфера. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие. Тиосульфат натрия служит источником серы. Анионы тетратионата S₄O₆²⁻ являются основным селективным компонентом среды обогащения.

В среде могут расти микроорганизмы, отличные от Salmonella, включая Morganella morganii и некоторые представители семейства Enterobacteriaceae. Поэтому все предположительно выделенные колонии Salmonella необходимо подвергать подтверждающим тестам.

Полная среда соответствует требованиям ISO. В отличие от неселективного предварительного обогащения, бульон Мюллера—Кауфмана с тетратионатом содержит тетратионат, желчь и бриллиантовый зелёный, обеспечивающие селективное обогащение.

Технические характеристики

• Тип питательной среды: элективная
• Назначение изделия: основа
• Физическая форма: порошок
• Происхождение: животное
• Тип упаковки: HDPE
• Масса: 100 г

Приготовление среды

1. Суспендируйте 82,05 г основы в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте среду только до кипения.
3. Не стерилизуйте в автоклаве.
4. Охладите среду.
5. Непосредственно перед использованием в асептических условиях добавьте 19 мл раствора йода следующего состава: 20 г йода и 25 г йодида калия в 100 мл стерильной дистиллированной воды.
6. Добавьте 9,5 мл 0,1%-ного раствора бриллиантового зелёного.
7. Тщательно перемешайте среду перед разливом в стерильные пробирки, чтобы равномерно распределить карбонат кальция.

Из-за присутствия карбоната кальция приготовленная среда образует опалесцирующий раствор с белым осадком.

Пробоподготовка и проведение анализа

Тип образца: пищевые продукты.

При необходимости для подавления бактерий рода Proteus в бульон можно добавить 4 мг новобиоцина на литр среды.

1. Внесите приблизительно 10 г образца в 100 мл бульона.
2. Тщательно встряхните.
3. Поместите колбу на водяную баню при 45 °C на 15 мин.
4. Извлеките колбу и поместите её в термостат или на водяную баню при 43 °C.
5. Инкубируйте 18–24 ч и 48 ч.
6. После инкубации выполните пересев на модифицированный агар с бриллиантовым зелёным M016.

Несколько исследований показали повышение выделения Salmonella после инкубации селективной среды обогащения при 43 °C.

Полная среда не подходит для выращивания Salmonella Typhi, Salmonella Sendai, Salmonella Pullorum и других указанных видов.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после пересева на соево-казеиновый агар при 43 °C в течение 18–24 ч с добавлением растворов йода и бриллиантового зелёного.

* Соответствующие номера WDCM.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

После добавления бриллиантового зелёного и раствора йода образуется раствор светло-зелёного цвета с опалесценцией и обильным белым осадком.

Реакция

Реакция водного раствора с концентрацией 8,20 % масс./об. при 25 °C.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения основы: 10–30 °C
• Условия хранения основы: в плотно закрытой ёмкости
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C
• Срок хранения приготовленной среды: не более 7 суток в тёмном месте
• Срок использования: до даты, указанной на этикетке

После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к образованию комков. Хранить в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После каждого использования ёмкость необходимо плотно закрывать. Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение установленного срока годности.

Ограничения применения

• Полная среда нестабильна и должна использоваться непосредственно после приготовления.
• Приготовленную среду допускается хранить в тёмном месте при 2–8 °C не более 7 суток.
• Все предположительно выделенные колонии Salmonella необходимо подвергать подтверждающим тестам.
• Среда не подходит для выращивания Salmonella Typhi, Salmonella Sendai, Salmonella Pullorum и других указанных видов.

Требования безопасности

Перед открытием контейнера прочитайте этикетку. При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.

При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила работы микробиологической лаборатории и стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами. Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты необходимо ути