Питательная агаризованная среда HiMedia M870A-500G Модифицированный TCBS агар предназначена для селективного выделения Vibrio cholerae и других энтеропатогенных вибрионов из клинических и неклинических образцов; масса упаковки — 500 г. Среда применяется для анализа фекалий, пищевых продуктов и воды, но не подходит для оксидазного тестирования вибрионов.

Назначение

Модифицированный TCBS-агар рекомендован для селективного выделения Vibrio cholerae и других энтеропатогенных вибрионов из клинических и неклинических образцов.

Типы исследуемых образцов

• Клинические образцы: фекалии и другие материалы.
• Образцы пищевых продуктов.
• Образцы воды.

Состав

Расход компонентов указан на 1 л среды.

** Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заявленных параметров эффективности.

Эквивалентна Oxgall.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 88,08 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Не автоклавируйте.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.
6. Перед использованием высушите чашки в течение ночи или при температуре 37–45 °C.

Принцип действия и интерпретация результатов

TCBS-агар впервые разработан Наканиси и позднее модифицирован Кобаяси и соавторами. Среда обеспечивает быстрый рост патогенных вибрионов после инкубации в течение 24 ч при 37 °C и подавляет сопутствующую невибрионную микрофлору.

• Специальный пептон и дрожжевой экстракт обеспечивают среду азотистыми и углеродистыми соединениями, аминокислотами с длинной цепью, витаминами группы B и другими необходимыми питательными веществами.
• Желчь, являющаяся производным желчных солей, и цитрат натрия подавляют рост грамположительных бактерий.
• Тиосульфат натрия служит источником серы, которая в сочетании с цитратом железа позволяет выявлять образование сероводорода (H₂S).
• Сахароза добавлена как ферментируемый углевод для метаболизма вибрионов.
• Бромтимоловый синий и тимоловый синий выполняют функцию индикаторов pH.
• Щелочной pH среды улучшает выделение Vibrio cholerae.

Штаммы Vibrio cholerae образуют на TCBS-агаре жёлтые колонии вследствие ферментации сахарозы. Vibrio alginolyticus также образует жёлтые колонии. Vibrio parahaemolyticus не ферментирует сахарозу и образует сине-зелёные колонии, как и Vibrio vulnificus. Отдельные изоляты видов Pseudomonas и Aeromonas также могут образовывать сине-зелёные колонии, однако TCBS-агар в целом обладает высокой селективностью, поэтому любая колония, отрицательная по H₂S, может предположительно относиться к вибрионам.

Фекальные образцы следует наносить на среду в большом количестве, поскольку некоторые виды вибрионов быстро погибают на среде из-за ферментации сахарозы и накопления кислот.

Сбор и обращение с образцами

• При работе с клиническими образцами используйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным руководствам.
• Для образцов пищевых продуктов применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно руководствам.
• Для образцов воды используйте соответствующие методы отбора и обработки согласно руководствам и местным стандартам.
• После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте надлежащие правила работы в микробиологической лаборатории при обращении с образцами и культурами.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Указания по безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Фекальные образцы следует наносить на среду в большом количестве, поскольку рост некоторых видов может подавляться из-за ферментации сахарозы и накопления кислот.
2. Отдельные изоляты видов Pseudomonas и Aeromonas также могут образовывать на TCBS-агаре сине-зелёные колонии.
3. Ферментирующие сахарозу виды Proteus могут образовывать жёлтые колонии.
4. TCBS-агар не подходит для проведения оксидазного теста вибрионов.
5. Некоторые штаммы V. cholerae могут образовывать на TCBS-агаре зелёные или бесцветные колонии из-за замедленной ферментации сахарозы.
6. TCBS-агар обладает высокой селективностью в отношении видов Vibrio. Любая колония на TCBS-агаре, отрицательная по H₂S, может рассматриваться как предположительно положительная на наличие вибрионов.
7. Для полной идентификации необходимо провести дополнительные биохимические и серологические тесты.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от светло-жёлтого до желтовато-коричневого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,4%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель сине-зелёного цвета.

Реакция среды

Реакция 8,8%-ного водного раствора при 25 °C: pH 8,6 ± 0,1.

Значение pH

pH: 8,50–8,70.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Продуктивность

Специфичность

Дополнительные микробиологические испытания

* Соответствующие номера WDCM.

Технические характеристики

Хранение и срок годности

Храните порошок в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C, а приготовленную среду — при температуре 20–30 °C. Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

После открытия тщательно закрывайте флакон и хран