Питательная среда HiMedia M870A-100G Модифицированный TCBS агар — селективный агар для выделения Vibrio cholerae и других энтеропатогенных вибрионов из клинических и не клинических образцов. Модифицированный TCBS агар применяют для анализа фекалий, пищевых продуктов и воды; среда подавляет сопутствующую невибрионную микрофлору и позволяет дифференцировать вибрионы по ферментации сахарозы и цвету колоний.

Назначение

Модифицированный тиосульфат-цитрат-жёлчно-сахарозный агар (TCBS) предназначен для селективного выделения Vibrio cholerae и других энтеропатогенных вибрионов из клинических и не клинических образцов.

Типы образцов

• Клинические образцы: фекалии и другие образцы.
• Пищевые продукты.
• Вода.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с рабочими характеристиками среды.

Эквивалентно Oxgall.

Принцип действия и интерпретация

TCBS-агар первоначально разработан Nakanishi и позднее модифицирован Kobayashi и соавторами. Среда обеспечивает быстрый рост патогенных вибрионов после инкубации в течение 24 ч при 37 °C, подавляя сопутствующие невибрионные микроорганизмы.

• Специальный пептон и дрожжевой экстракт обеспечивают азотистые и углеродистые соединения, аминокислоты с длинной цепью, витамины группы B и другие необходимые питательные вещества.
• Жёлчь, являющаяся производным жёлчных солей, и цитрат натрия подавляют грамположительные бактерии.
• Тиосульфат натрия служит источником серы, которая в сочетании с цитратом железа позволяет выявлять образование сероводорода H₂S.
• Сахароза добавлена как ферментируемый углевод для метаболизма вибрионов.
• Бромтимоловый синий и тимоловый синий используются как индикаторы pH.
• Щелочная реакция среды повышает выделение Vibrio cholerae.
• Штаммы Vibrio cholerae образуют на TCBS-агаре жёлтые колонии вследствие ферментации сахарозы.
• Vibrio alginolyticus также образует жёлтые колонии.
• Vibrio parahaemolyticus не ферментирует сахарозу и образует сине-зелёные колонии; аналогичный цвет может наблюдаться у Vibrio vulnificus.
• Отдельные изоляты видов Pseudomonas и Aeromonas также могут образовывать сине-зелёные колонии, однако TCBS-агар обладает высокой селективностью, и любая колония, отрицательная по H₂S, может предположительно относиться к видам Vibrio.

Фекальные образцы следует наносить на среду в большом количестве, поскольку некоторые виды Vibrio быстро отмирают на среде из-за ферментации сахарозы и накопления кислот.

Методика приготовления среды

1. Приостановите 88,08 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Не стерилизуйте в автоклаве.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте.
6. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.
7. Высушите чашки в течение ночи или при 37–45 °C перед использованием.

Сбор и обработка образцов

• Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным методическим рекомендациям.
• Для пищевых образцов используйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно методическим рекомендациям.
• Для водных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно методическим рекомендациям и местным нормативным требованиям.
• После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики вне организма.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным методическим рекомендациям.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Фекальные образцы следует наносить на среду в большом количестве, поскольку рост некоторых видов может подавляться вследствие ферментации сахарозы и накопления кислот.
2. Отдельные изоляты видов Pseudomonas и Aeromonas также могут образовывать на TCBS-агаре сине-зелёные колонии.
3. Ферментирующие сахарозу виды Proteus могут образовывать жёлтые колонии.
4. TCBS-агар не подходит для проведения оксидазного теста у видов Vibrio.
5. Некоторые штаммы V. cholerae могут иметь зелёные или бесцветные колонии из-за замедленной ферментации сахарозы.
6. TCBS-агар обладает высокой селективностью в отношении видов Vibrio. Любую колонию TCBS-агара, отрицательную по H₂S, можно рассматривать как предположительно положительную на Vibrio.
7. Для полной идентификации необходимо провести дополнительные биохимические и серологические тесты.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или желтовато-коричневый однородный сыпучий порошок.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,4%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель сине-зелёного цвета.

Реакция среды

Реакция 8,8%-ного водного раствора при 25 °C: pH 8,6 ± 0,1.

Диапазон pH

pH: 8,50–8,70.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Продуктивность

Специфичность

Дополнительные микробиологические испытания

* Соответствующие номера WDCM.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: M870A-100G
• Назначение: агаровая питательная среда
• Физическая форма: порошок
• Масса: 100 г
• Происхождение: животного происхождения
• Тип продукта: стандартный
• Тип упаковки: ПЭВП (HDPE)
• Конечный pH при 25 °C: 8,6 ± 0,1
• Диапазон pH: 8,50–8,70
• Температура хранения: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C

Хранение и срок годности

Храните