ТЦЖС агар (селективный) HiMedia M870-500G (уп/500 гр)

Селективная питательная среда ТЦЖС агар (селективный) HiMedia M870-500G (уп/500 гр) для выделения Vibrio cholerae и других энтеропатогенных вибрионов. Среда применяется для культивирования микроорганизмов из клинических, пищевых и водных образцов; ферментация сахарозы позволяет дифференцировать вибрионы по цвету колоний.

Назначение

ТЦЖС агар (селективный) предназначен для селективного выделения и культивирования Vibrio cholerae и других энтеропатогенных вибрионов. Среда используется для анализа:

• клинических образцов: фекалии и другие материалы;
• пищевых образцов;
• проб воды.

Среда соответствует назначению, указанному для ТЦЖС-агара, и применяется согласно ФСЗ 2009/03709 и методическим рекомендациям Роспотребнадзора МР 02.009-06.Саратов.2006.

Состав

Концентрация компонентов указана на 1 л среды.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик. Желчь эквивалентна Oxgall.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Модель/артикул: M870-500G
• Форма выпуска: порошок
• Тип питательной среды: селективная
• Назначение изделия: агар
• Происхождение: животное
• Тип упаковки: ПЭВП (HDPE)
• Масса упаковки: 500 г
• Сертификат: ФСЗ 2009/03709
• Конечный pH при 25 °C: 8,8 ± 0,2
• Диапазон pH: 8,60–9,00
• Реакция: pH 8,8 ± 0,2 для 8,9 % водного раствора при 25 °C

Приготовление среды

1. Суспендируйте 89,08 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Не автоклавируйте среду.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте.
6. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

ТЦЖС-агар разработан Kobayashi и соавторами на основе селективной среды Nakanishi. Среда первоначально предназначалась для выделения Vibrio cholerae и Vibrio parahaemolyticus, однако большинство вибрионов образует крупные полноценные колонии, различающиеся по морфологии. ТЦЖС-агар также рекомендован Американской ассоциацией общественного здравоохранения (APHA) для селективного выделения Vibrio cholerae и Vibrio parahaemolyticus.

Для выделения Vibrio cholerae обычно применяют обогащение в щелочной пептонной воде M618 с последующим высевом на ТЦЖС-агар. Селективный ТЦЖС-агар содержит дополнительный селективный компонент — холат натрия, повышающий селективность среды.

Специальный пептон и дрожжевой экстракт обеспечивают среду азотистыми и углеродистыми соединениями, аминокислотами с длинной цепью, витаминами группы B и другими необходимыми питательными веществами. Желчь и цитрат натрия подавляют рост грамположительных бактерий и колиформных микроорганизмов.

Тиосульфат натрия служит источником серы и в сочетании с цитратом железа позволяет выявлять образование сероводорода (H₂S). Сахароза добавлена как ферментируемый углевод для метаболизма вибрионов. Вибрионы, способные утилизировать сахарозу, образуют жёлтые колонии. Бромтимоловый синий и тимоловый синий используются как индикаторы pH.

Щелочной pH среды повышает выделение Vibrio cholerae. Штаммы Vibrio cholerae образуют на ТЦЖС-агаре жёлтые колонии вследствие ферментации сахарозы. Vibrio alginolyticus также образует жёлтые колонии. Vibrio parahaemolyticus не ферментирует сахарозу и поэтому образует сине-зелёные колонии; аналогичный цвет могут иметь колонии Vibrio vulnificus. Ферментирующие сахарозу виды Proteus могут образовывать жёлтые колонии.

ТЦЖС-агар не подходит для проведения оксидазного теста у видов Vibrio. Некоторые штаммы Vibrio cholerae вследствие замедленной ферментации сахарозы могут образовывать на среде зелёные или бесцветные колонии.

Среда обладает высокой селективностью в отношении видов Vibrio, однако отдельные изоляты Pseudomonas и Aeromonas также могут образовывать сине-зелёные колонии. Любую колонию на ТЦЖС-агаре, не продуцирующую H₂S, можно рассматривать как предположительно положительную на Vibrio; для окончательной идентификации необходимо провести дополнительные биохимические и серологические тесты.

Фекальные образцы следует высевать на среду в большом количестве, поскольку рост некоторых видов может подавляться вследствие ферментации сахарозы и накопления кислот.

Пробоподготовка, сбор и обращение с образцами

• Для проб воды применяйте соответствующие методики отбора и обработки образцов согласно действующим руководствам и местным стандартам.
• Для пищевых образцов применяйте соответствующие методики отбора и обработки согласно установленным руководствам.
• Для клинических образцов применяйте утверждённые методики обращения с образцами согласно установленным руководствам.
• После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

1. Фекальные образцы следует высевать на среду в большом количестве, поскольку рост некоторых видов может подавляться вследствие ферментации сахарозы и накопления кислот.
2. Отдельные изоляты Pseudomonas и Aeromonas могут образовывать на ТЦЖС-агаре сине-зелёные колонии.
3. Ферментирующие сахарозу виды Proteus могут образовывать жёлтые колонии.
4. ТЦЖС-агар не подходит для проведения оксидазного теста у видов Vibrio.
5. Некоторые штаммы Vibrio cholerae вследствие замедленной ферментации сахарозы могут образовывать зелёные или бесцветные колонии.
6. ТЦЖС-агар обладает высокой селективностью в отношении видов Vibrio. Любую колонию, не продуцирующую H₂S, можно рассматривать как предположительно положительную на Vibrio.
7. Для полной идентификации необходимо провести дополнительные биохимические и серологические тесты.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от светло-жёлтого до светло-коричневого цвета.

Желирование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель сине-зелёного цвета.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24