HiMedia M870-100G TCBS агар (селективный)

Селективная питательная среда HiMedia M870-100G TCBS агар (селективный) — порошковый агар животного происхождения с конечным pH 8,8 ± 0,2. HiMedia M870-100G TCBS агар предназначен для селективного выделения и культивирования Vibrio cholerae и других энтеропатогенных вибрионов; хранение среды предусмотрено при 10–30 °C.

Назначение

Среда рекомендована для селективного выделения и культивирования Vibrio cholerae и других энтеропатогенных вибрионов.

Типы исследуемых образцов

• Клинические образцы: фекалии и другие материалы.
• Пищевые образцы.
• Образцы воды.

Состав

Состав среды приведён для 1 л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров эффективности.

Среда эквивалентна Oxgall.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 89,08 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Не автоклавируйте.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация результатов

TCBS агар разработан Kobayashi и соавторами на основе селективной среды Nakanishi. Первоначально среда предназначалась для выделения Vibrio cholerae и Vibrio parahaemolyticus, однако большинство вибрионов формирует крупные хорошо развитые колонии с различной морфологией.

Селективность среды повышена за счёт дополнительного селективного компонента — холата натрия. Желчь и цитрат натрия ингибируют грамположительные бактерии и колиформные микроорганизмы. Щелочной pH среды улучшает выделение Vibrio cholerae.

Специальный пептон и дрожжевой экстракт служат источниками азотсодержащих и углеродсодержащих соединений, аминокислот с длинной цепью, витаминов группы B и других необходимых питательных веществ.

Тиосульфат натрия является источником серы. В сочетании с цитратом железа он позволяет выявлять образование сероводорода H₂S.

Сахароза добавлена в качестве сбраживаемого углевода для метаболизма вибрионов. Вибрионы, способные утилизировать сахарозу, образуют жёлтые колонии. Бромтимоловый синий и тимоловый синий выполняют функцию индикаторов pH.

Штаммы Vibrio cholerae образуют на TCBS агар жёлтые колонии вследствие ферментации сахарозы. Vibrio alginolyticus также образует жёлтые колонии. Vibrio parahaemolyticus не ферментирует сахарозу и поэтому формирует сине-зелёные колонии; аналогичную окраску могут иметь колонии Vibrio vulnificus. Сбраживающие сахарозу виды Proteus могут образовывать жёлтые колонии. Некоторые штаммы Vibrio cholerae из-за замедленной ферментации сахарозы могут формировать зелёные или бесцветные колонии.

TCBS агар обладает высокой селективностью в отношении видов Vibrio. Отдельные изоляты Pseudomonas и Aeromonas также могут образовывать на среде сине-зелёные колонии. Любая колония на TCBS агар, отрицательная по H₂S, может рассматриваться как предположительно положительная на Vibrio и требует дальнейшей идентификации.

Обогащение в щелочной пептонной воде M618 с последующим выделением на TCBS агар является стандартно используемой схемой выделения Vibrio cholerae. TCBS агар также рекомендован APHA для селективного выделения Vibrio cholerae и Vibrio parahaemolyticus.

Пробоподготовка и обращение с образцами

При посеве фекальных образцов среду следует инокулировать обильно, поскольку рост некоторых видов может ингибироваться вследствие ферментации сахарозы и накопления кислот.

Для образцов воды необходимо применять соответствующие методы отбора и обработки проб в соответствии с установленными руководствами и местными нормативами.

Для пищевых образцов необходимо применять соответствующие методы отбора и обработки проб в соответствии с установленными руководствами.

Для клинических образцов необходимо соблюдать соответствующие методы обращения с материалом в соответствии с утверждёнными руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

1. Среду следует инокулировать обильно фекальными образцами, поскольку рост некоторых видов может ингибироваться вследствие ферментации сахарозы и накопления кислот.
2. Отдельные изоляты Pseudomonas и Aeromonas также могут образовывать на TCBS агар сине-зелёные колонии.
3. Сбраживающие сахарозу виды Proteus могут образовывать жёлтые колонии.
4. TCBS агар не подходит для проведения оксидазного теста у видов Vibrio.
5. Некоторые штаммы Vibrio cholerae могут выглядеть зелёными или бесцветными на TCBS агар из-за замедленной ферментации сахарозы.
6. TCBS агар обладает высокой селективностью в отношении видов Vibrio. Любая колония на TCBS агар, отрицательная по H₂S, может рассматриваться как предположительно положительная на Vibrio.
7. Для полной идентификации необходимо провести дополнительные биохимические и серологические тесты.

Условия инкубации и культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Дополнительные микробиологические испытания

Proteus hauseri ранее обозначался как Proteus vulgaris.

Контроль качества

Внешний вид

Однород