Железосодержащий сульфитный агар HiMedia M868-500G (уп/500 гр)

Диагностическая питательная среда Железосодержащий сульфитный агар HiMedia M868-500G (уп/500 гр) производства HiMedia. Рекомендуется для обнаружения термофильных анаэробных организмов, вызывающих «сульфидную» порчу пищевых продуктов; соответствует ГОСТ Р 54354-2011.

Принцип измерения и интерпретация

Железосодержащий сульфитный агар является модификацией агара Кэмерона, разработанной Национальной ассоциацией консервщиков Америки. В данной формуле концентрация сульфита снижена до 0,05 %, что устраняет ингибирующее действие на некоторые штаммы Clostridium sporogenes.

Большинство клостридий обладают сульфитредуктазой в цитоплазме, но не способны выводить её наружу. При восстановлении сульфита до H₂S в присутствии цитрата железа образуется осадок сульфида железа, что приводит к почернению колоний. Триптон обеспечивает азот и другие питательные вещества, необходимые для роста бактерий.

Почернение является предварительным доказательством роста клостридий; для окончательной идентификации необходимо проведение подтверждающих биохимических тестов. Некоторые грамотрицательные бактерии также способны восстанавливать сульфит, однако в этих случаях ферменты являются внеклеточными, из-за чего темнеет вся среда, что делает подсчёт колоний невозможным.

Методика проведения анализа

Для обнаружения организмов, вызывающих сульфидную порчу, применяются два метода:

Метод глубокого посева (Deep-Shake Culture Method)

1. Разлейте среду в пробирки по 10 мл.
2. Внесите пробу в среду, когда её температура составляет около 50 °C.
3. Дайте среде застыть и инкубируйте при 55 °C в течение 24–48 часов.
4. Типичные термофильные виды, такие как Desulfotomaculum nigrificans, образуют отчетливые черные сферические колонии в толще среды.

Метод Аттенборо и Скарра (Attenborough and Scarr Method)

1. Профильтруйте разбавленные пробы сахара или других пищевых продуктов через мембранные фильтры.
2. Сверните фильтры в рулон и поместите в пробирки, содержащие достаточное количество агара (при температуре 50 °C), чтобы полностью покрыть фильтр.
3. Дайте среде застыть и инкубируйте при 55–56 °C в течение 24–48 часов.
4. После инкубации подсчитайте количество черных колоний на мембранном фильтре.
5. Проведите подтверждающие тесты для идентификации выросшего организма.

Приготовление и стерилизация

1. Суспендируйте 26 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Общие параметры:

• Тип среды: Диагностический агар
• Физическая форма: Порошок
• Цвет готовой среды: Жёлтый, слегка опалесцирующий гель
• pH готового раствора (25 °C): 6,90–7,30
• Происхождение компонентов: Животное
• Материал упаковки: ПНД (HDPE)
• Сертификат: ФСЗ 2009/03705

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются в анаэробных условиях после инкубации при 55–56 °C в течение 24–48 часов.

Область применения и ограничения

• Тип образцов: Пищевые продукты.
• Ограничения: Среда общего назначения и может не поддерживать рост требовательных (fastidious) организмов.
• Требования: Для окончательной идентификации микроорганизмов обязательно проведение дополнительных биохимических тестов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: В плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом месте, защищенном от источников возгорания и экстремальных температур.
• Хранение готовой среды: При температуре 20–30 °C.
• Особенности: Продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание образования комков.

Утилизация

Загрязненные материалы и использованные среды должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации (сжиганию) в соответствии с установленными лабораторными процедурами по обращению с инфекционными материалами.