

Основа агара Риппи-Кабелли HiMedia M859-100G (уп/100 гр)
Питательная среда «Основа агара Риппи-Кабелли HiMedia M859-100G (уп/100 гр)» — порошковая основа для селективного культивирования и предварительной идентификации Aeromonas hydrophila из воды методом мембранной фильтрации. Основа применяется с селективной добавкой FD107, а после инкубации при 35–37 °C в течение 24 ч колонии Aeromonas ферментируют трегалозу и приобретают жёлтую окраску.
Описание
Питательная среда «Основа агара Риппи-Кабелли HiMedia M859-100G (уп/100 гр)» — порошковая основа для селективного культивирования и предварительной идентификации Aeromonas hydrophila из воды методом мембранной фильтрации. Основа применяется с селективной добавкой FD107, а после инкубации при 35–37 °C в течение 24 ч колонии Aeromonas ферментируют трегалозу и приобретают жёлтую окраску.
Назначение и область применения
Основа агара Риппи-Кабелли M859 предназначена для подсчёта и предварительной идентификации подвижных аэромонад, включая Aeromonas hydrophila, в пробах воды методом мембранной фильтрации.
Среда является:
- дифференциальной — по способности микроорганизмов ферментировать трегалозу;
- селективной — благодаря введению селективных агентов;
- основой, которую применяют после добавления селективной добавки Риппи-Кабелли FD107.
Селективное культивирование проводят для контроля воды и выявления Aeromonas, включая микроорганизмы, представляющие риск для гидробионтов, аквакультуры и людей с ослабленным иммунитетом.
Состав
Состав на 1 л:
| Компонент | г/л |
|---|---|
| Триптоза | 5,000 |
| Трегалоза | 5,000 |
| Дрожжевой экстракт | 2,000 |
| Хлорид натрия | 3,000 |
| Хлорид калия | 2,000 |
| Сульфат магния | 0,200 |
| Хлорид железа(III) | 0,100 |
| Бромтимоловый синий | 0,040 |
| Агар | 15,000 |
| Конечное значение pH при 25 °C | 8,0 ± 0,2 |
Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.
Принцип действия и интерпретация
Виды Aeromonas являются естественными обитателями водной среды. Их численность в природных водах изменяется в зависимости от сезона. Аэромонады вызывают заболевания водных животных и могут создавать экономические риски для аквакультуры. Подвижные аэромонады рассматриваются как микробиологический фактор риска для человека, особенно для лиц с ослабленным иммунитетом.
Подсчёт аэромонад в воде выполняют методом мембранной фильтрации. Мембранный фильтр с отфильтрованной пробой воды асептически переносят на чашку с агаром Риппи—Кабелли. После инкубации при 35–37 °C в течение 24 ч Aeromonas ферментирует трегалозу и образует жёлтые колонии.
Триптоза и дрожжевой экстракт поддерживают рост видов Aeromonas. Бромтимоловый синий служит индикатором pH: в кислой среде, образующейся при ферментации трегалозы, окраска изменяется с синей на жёлтую. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие. Хлорид калия, сульфат магния и хлорид железа(III) обеспечивают микроорганизмы необходимыми ионами.
Ампициллин, дезоксихолат натрия и этанол являются селективными агентами, подавляющими рост грамположительных бактерий, колиформных бактерий, видов Shigella, Proteus mirabilis и Actinomyces. Этанол препятствует чрезмерному росту видов Klebsiella на мембранном фильтре.
Большинство представителей семейства Enterobacteriaceae ферментируют трегалозу, поэтому их трудно отличить от Aeromonas. При работе с чистыми культурами среда обеспечивает более высокую специфичность и чувствительность. Ампициллин не подходит в качестве селективного агента при работе с Plesiomonas.
Методика приготовления среды
- Суспендируйте 16,17 г порошка в 500 мл дистиллированной воды.
- Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
- Стерилизуйте среду в автоклаве при температуре 121 °C и давлении около 0,103 МПа (15 фунтов давления) в течение 15 мин.
- Охладите среду до 50 °C.
- В асептических условиях добавьте 5 мл этанола и регидратированное содержимое одного флакона селективной добавки Риппи—Кабелли FD107.
- Тщательно перемешайте.
- Разлейте среду в стерильные чашки Петри.
Методика анализа проб воды
- Отфильтруйте пробу воды через мембранный фильтр.
- Асептически поместите мембранный фильтр с отфильтрованной пробой на чашку с приготовленной средой — основой агара Риппи—Кабелли M859 с добавленной селективной добавкой FD107.
- Инкубируйте при 35–37 °C в течение 24 ч.
- Оцените рост колоний: Aeromonas ферментирует трегалозу и образует жёлтые колонии.
Контроль качества
Внешний вид
Светло-жёлтый или бледно-зелёный однородный сыпучий порошок.
Гелеобразование
Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.
Цвет и прозрачность приготовленной среды
В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель тёмно-зелёного цвета.
Реакция и pH
Реакция 3,23%-ного водного раствора при 25 °C: pH 8,0 ± 0,2.
Диапазон pH: 7,80–8,20.
Культуральные характеристики
Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 24 ч на среде с добавленной селективной добавкой Риппи—Кабелли FD107.
| Организм | Посевная доза (КОЕ) | Рост | Восстановление | Ферментация трегалозы |
|---|---|---|---|---|
| Aeromonas hydrophila ATCC 7966 | 50–100 | от хорошего до обильного | ≥50 % | положительная реакция, жёлтая окраска |
| Escherichia coli ATCC 25922 | 50–100 | от отсутствующего до слабого | ≤10 % | отрицательная реакция, сине-зелёная окраска |
| Shigella flexneri ATCC 12022 | ≥10³ | рост подавлен | 0 % | |
| Staphylococcus aureus ATCC 25923 | ≥10³ | рост подавлен | 0 % |
Технические характеристики
- Производитель: HiMedia
- Артикул: M859-100G
- Полное наименование: Основа агара Риппи-Кабелли HiMedia M859-100G (уп/100 гр)
- Тип питательной среды: селективная
- Назначение изделия: основа питательной среды
- Физическая форма: порошок
- Происхождение: животное
- Тип продукта: стандартный
- Тип упаковки: ПНД (полиэтилен высокой плотности)
- Сертификат: ФСЗ 2009/03709
- Конечное значение pH при 25 °C: 8,0 ± 0,2
- Диапазон pH: 7,80–8,20
Хранение и срок годности
- Температура хранения сухой среды: ниже 30 °C
- Условия хранения сухой среды: в плотно закрытой ёмкости
- Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C
- Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке
Селективная добавка
Для приготовления селективной среды используют:
- FD107 — селективная добавка Риппи—Кабелли; добавляют регидратированное содержимое одного флакона.
Комплект поставки
Характеристики
Производитель/Серия
| Производитель | HiMedia |
|---|
Тип питательной среды
| Тип питательной среды | Элективный |
|---|
Сертификат
| Сертификат | ФСЗ 2009/03709 |
|---|
Назначение изделия
| Назначение изделия | Основа |
|---|



