Агар для определения остаточных количеств пенициллина в молоке HiMedia M849-100G (уп/100 гр)

Питательная агаровая среда HiMedia M849-100G для определения остаточных количеств пенициллина в молоке содержит индикатор бромкрезоловый пурпурный и предназначена для качественного дискового анализа. Среда применяется с культурой Bacillus stearothermophilus для скрининга ингибирующих веществ и подтверждения наличия β-лактамных остатков в молоке.

Назначение и область применения

HiMedia M849-100G используют для быстрого качественного определения следовых количеств пенициллина в молоке с применением дисков и культуры Bacillus stearothermophilus. Методика предназначена для скринингового анализа, а при положительном результате — для подтверждающего анализа с целью определения, относится ли ингибирующее вещество к β-лактамным остаткам.

• Тип питательной среды: диагностическая
• Назначение изделия: агар
• Сертификат: ФСЗ 2009/03707
• Методика: качественный дисковый метод, рекомендованный AOAC
• Тест-организм: Bacillus stearothermophilus

Состав

Состав среды, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация

Среда предназначена для выявления следовых количеств пенициллина в молоке с использованием качественных дисков с Bacillus stearothermophilus, рекомендованных AOAC. Состав среды разработан на основе формулы, опубликованной по итогам 18-го ежегодного совещания Национального совета по маститу. Метод является модификацией метода Международной молочной федерации для качественного определения пенициллина в молоке.

Ранее для выявления пенициллина в молоке с использованием Bacillus subtilis предлагалась среда, называемая восстановительной средой. HiMedia M849-100G поддерживает рост и образование кислоты культурой B. stearothermophilus, чувствительной к пенициллину и β-лактамным остаткам. Для выявления следовых количеств пенициллина применяется качественный дисковый метод, также рекомендованный AOAC.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 3,2 г порошка в 100 мл дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов, что соответствует приблизительно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в необходимом объёме.

Подготовка контрольных суспензий и дисков

Среду инокулируют 1 мл равномерно диспергированной суспензии B. stearothermophilus, приготовленной в соответствии с методикой AOAC.

Для положительного контроля приготовьте разведения стандартного пенициллина G с концентрациями в диапазоне 0,005–0,1 ед./мл.

Для отрицательного контроля используйте суспензию обезжиренного сухого молока, не содержащего ингибиторов.

Методика скринингового анализа

1. Поместите на поверхность агара диск холостого контроля, диск отрицательного контроля и диск положительного контроля.
2. Переверните чашку.
3. Инкубируйте до образования вокруг диска положительного контроля зон ингибирования диаметром 17–20 мм.
4. Интерпретируйте результат по наличию и диаметру зон ингибирования вокруг диска исследуемой пробы и контрольных дисков.

Интерпретация скринингового анализа

Методика подтверждающего анализа

1. Инактивируйте пробу молока нагреванием при 82 °C в течение 2 мин.
2. Быстро охладите пробу до комнатной температуры.
3. Переверните чашку.
4. Инкубируйте в условиях, использованных для скринингового анализа.
5. Интерпретируйте результат по зонам ингибирования вокруг диска инактивированной пробы молока, диска положительного контроля и диска пробы, обработанной пенициллиназой.

Интерпретация подтверждающего анализа

Контроль качества

• Внешний вид: однородный сыпучий порошок от бежевого до голубовато-серого цвета
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель фиолетового цвета
• Реакция: реакция водного раствора концентрацией 3,2 % масс./об. при 25 °C; pH 7,8 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,60–8,00
• Происхождение: животное

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при указанных температуре и времени.

Технические характеристики

• Масса упаковки: 100 г
• Конечный pH при 25 °C: 7,8 ± 0,2
• Рабочий диапазон pH: 7,60–8,00

Условия хранения и срок годности

• Условия хранения сухой среды: при температуре ниже 30 °C в плотно закрытой ёмкости
• Условия хранения приготовленной среды: 2–8 °C
• Срок использования: до даты, указанной на этикетке

Отличие методики

В отличие от исходного варианта восстановительной среды