HiMedia M845-100G Основа лизин-железо-цистинового бульона

Основа лизин-железо-цистинового бульона HiMedia M845-100G для экспресс-детекции Salmonellae в пищевых продуктах, ингредиентах и кормах. Применяется для предварительного выявления сальмонелл в течение трёх дней; вес упаковки составляет 100 г.

Принцип измерения

Лизин-железо-цистиновый бульон является модификацией формулы Хобена, Эштона и Петерсона.

• Источники питания: Триптон и L-цистин обеспечивают углеродными и азотистыми соединениями, экстракт дрожжей поставляет витамины комплекса B.
• Ферментируемые углеводы: Декстроза (глюкоза), маннит и салицин.
• Индикация H₂S: Цитрат железа-аммония и тиосульфат натрия служат индикаторами образования сероводорода. Культуры, продуцирующие H₂S, вызывают почернение среды вследствие образования сульфида железа.
• Метаболизм лизина: Декарбоксилирование лизина приводит к щелочной реакции (пурпурный цвет) с образованием амина кадаверина. Организмы, не декарбоксилирующие лизин, создают кислую среду в столбике (жёлтый цвет).
• Дезаминирование: Организмы, дезаминирующие лизин, образуют α-кетокарбоновую кислоту, которая под воздействием кислорода реагирует с солью железа у поверхности среды, образуя красно-коричневое соединение.

Состав

Состав, г/л:

Методика проведения анализа

Приготовление среды

1. Растворить 25,7 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагреть для полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$ 0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладить до комнатной температуры и асептически добавить одну ампулу восстановленного селективного дополнения Новобиоцин (FD101).
5. Тщательно перемешать перед разливом в стерильные пробирки или колбы.

Процедура анализа и пробоподготовка

1. Первичный обогатительный бульон: 25 г исследуемого образца (пищевой продукт) добавить в лактозный бульон (M026), перемешать и инкубировать при 35 ± 2 °C в течение 24 часов.
2. Вторичный обогатительный бульон: 1 мл первичной культуры добавить в 10 мл тиосульфатного бульона (M032) и инкубировать при 35 ± 2 °C в течение 24 часов.
3. Посев в среду: 1 мл вторичной культуры добавить в 10 мл лизин-железо-цистинового бульона с новобиоцином.
4. Инкубация: Инкубировать при 35 ± 2 °C в течение 24 часов. Для исключения пропуска штаммов Salmonellae, не продуцирующих H₂S, увеличить время инкубации еще на 16–24 часа.
5. Интерпретация: В каждую пробирку добавить 0,1 мл раствора бромтимолового синего (0,3 % в 0,1 N NaOH и 50 % этаноле). Изменение цвета с жёлтого на тёмно-зелёный или синий указывает на щелочную реакцию и наличие видов Salmonella.

Культуральные характеристики

Характеристики определены при использовании селективного дополнения Новобиоцин (FD101) после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч.

* — после добавления бромтимолового синего.

Технические характеристики

• Внешний вид: светло-жёлтый или розовый однородный свободнотекучий порошок
• Цвет и прозрачность готовой среды: красный прозрачный раствор (допускаются единичные частицы в пробирках)
• pH (водный раствор 2,57 % при 25 °C): 6,2 ± 0,2
• Диапазон pH: 6,00–6,40
• Происхождение компонентов: животное
• Форма выпуска: порошок
• Тип упаковки: ПНД (HDPE)

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 2–8 °C.
• Особенности: Продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон следует плотно закрывать для предотвращения комкования. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Меры предосторожности и утилизация

• При работе использовать защитные перчатки, спецодежду и средства защиты глаз/лица.
• Соблюдать стандартные правила микробиологической лабораторной практики.
• Утилизация: использованные или непригодные препараты подлежат обязательному автоклавированию и/или сжиганию в соответствии с правилами утилизации инфекционных материалов.