HiMedia M843F-500G Основа селективного агара для Yersinia с 1.2% агара

Питательная среда HiMedia M843F-500G Основа селективного агара для Yersinia с 1.2% агара выпускается в виде порошка массой 500 г. Предназначена для селективного выделения и количественного определения Yersinia enterocolitica из пищевых и молочных образцов; температура хранения закрытого продукта — 10–30 °C.

Назначение

Среда рекомендована для селективного выделения, изоляции и количественного определения Yersinia enterocolitica из пищевых образцов в соответствии с протоколом FDA BAM, 1998.

Тип образца: пищевые и молочные продукты.

Состав

Состав приведён в расчёте на 1 л среды.

Добавки после автоклавирования

Селективная добавка CTN FD034

Добавляют содержимое 1 флакона.

Селективная добавка SC

Добавляют содержимое 1 флакона.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения установленных характеристик рабочих свойств среды.

Принцип действия и интерпретация

Основа селективного агара для Yersinia с 1,2 % агара предназначена для выделения Yersinia из пищевых образцов в соответствии с протоколом FDA BAM, 1998.

Виды Yersinia являются возбудителями иерсиниоза — группы заболеваний и синдромов от гастроэнтерита до чумы. Передача микроорганизмов происходит при употреблении контаминированных пищевых продуктов, часто молока и свинины, а также воды, предположительно фекально-оральным путём или при контакте с инфицированными животными. Механизмы патогенности энтеропатогенных Yersinia сложны; эти микроорганизмы используются как модели для изучения инфекционного процесса у различных энтеропатогенных бактерий.

Пищевые образцы с предполагаемой контаминацией Yersinia обрабатывают для выделения бактерий с использованием селективных агаризованных сред. Пептон и дрожжевой экстракт обеспечивают среду азотистыми и углеродистыми соединениями, аминокислотами с длинной цепью и другими необходимыми компонентами. Маннитол служит источником энергии. Дезоксихолат натрия подавляет рост большинства неэнтеробактериальных микроорганизмов. Сульфат магния обеспечивает необходимые ионы, а хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие среды. Нейтральный красный и кристаллический фиолетовый выполняют функцию индикаторов. Агар используется как желирующий компонент.

На агаре для Yersinia колонии Yersinia имеют тёмно-красный центр с чёткой границей, окружённый прозрачной бесцветной зоной; край колонии ровный. На агаре МакКонки колонии выглядят плоскими, бесцветными или бледно-розовыми. Выделенные колонии необходимо подтвердить биохимическими и серологическими тестами.

Методика пробоподготовки и выделения

Согласно протоколу BAM:

1. Асептически внесите 25 г образца в 225 мл пептон-сорбитол-жёлчного бульона M1231.
2. Гомогенизированные образцы инкубируйте в течение 10 суток при 10 °C.
3. При подозрении на высокое содержание Yersinia до инкубации бульонной культуры нанесите по 0,1 мл гомогената методом поверхностного посева на агар МакКонки M081D и основу селективного агара для Yersinia с 1,2 % агара M843F.
4. Дополнительно перенесите 1 мл гомогената в 9 мл 0,5%-ного раствора KOH в 0,5%-ном физиологическом растворе.
5. Перемешивайте смесь в течение 2–3 с.
6. Нанесите 0,1 мл смеси методом поверхностного посева на агар МакКонки и агар CIN.
7. Инкубируйте агаровые чашки при 30 °C в течение 1–2 суток.
8. Повторите посев на 10-е сутки инкубации бульонной культуры.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 28,77 г обезвоженной среды, что соответствует количеству среды на 1 л, в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте восстановленное содержимое 1 флакона селективной добавки CTN FD034 и 1 флакона селективной добавки SC II FD301.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Технические характеристики

• Назначение: агар, основа селективной питательной среды
• Форма выпуска: порошок
• Масса: 500 г
• Происхождение: животное
• Тип продукта: стандартный
• Тип упаковки: ПЭВП (полиэтилен высокой плотности)
• Конечный pH при 25 °C: 7,40 ± 0,2
• pH 5,75%-ного водного раствора при 25 °C: 7,20–7,60
• Концентрация агара: 1,2 %
• Температура хранения продукта: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или розовый однородный сыпучий порошок.

Желирование

Плотный гель, сопоставимый с гелем, содержащим 1,2 % агара.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель оранжево-красного цвета.

Реакция

Реакция 5,75%-ного водного раствора при 25 °C: pH 7,40 ± 0,2.

Диапазон pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления селективных добавок CTN FD034 и SC FD301 и инкубации при 30 °C в течение 24–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ограничения применения

Serratia liquefaciens, Citrobacter freundi и Enterobacter agglomerans могут иметь морфологическое сходство с Y. enterocolitica. Для их дополнительной иден