Основа селективного агара для йерсиний HiMedia M843-500G (уп/500 гр)

Основа селективного агара для йерсиний HiMedia M843-500G (уп/500 гр) — порошковая питательная среда для приготовления селективного агара, фасовка 500 г. Применяется для селективного выделения и количественного определения Yersinia enterocolitica из клинического материала, пищевых и молочных продуктов с добавлением селективной добавки FD034.

Назначение

Основа селективного агара для йерсиний предназначена для селективного выделения и подсчёта Yersinia enterocolitica из клинических образцов, пищевых и молочных продуктов.

• Тип питательной среды: диагностическая
• Назначение изделия: основа питательной среды
• Сертификат: ФСЗ 2009/03709
• Нормативные документы: МР 02.009-06, Саратов, 2006; ГОСТ Р 54354-2011

Состав

Состав рассчитан на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заявленных характеристик эффективности среды.

Методика приготовления

1. Приготовьте суспензию 29,02 г порошка в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов/дюйм² (ориентировочно ≈0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте восстановленное содержимое 1 флакона селективной добавки CTN для йерсиний FD034.
6. Тщательно перемешайте среду и разлейте в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Yersinia enterocolitica широко распространена в озёрах и водохранилищах. У различных животных возникают эпизоотические вспышки диареи, лимфаденопатии, пневмонии и самопроизвольных абортов. Yersinia enterocolitica является наиболее распространённым видом рода Yersinia, выделяемым из клинических образцов.

Биохимическая активность Yersinia enterocolitica при комнатной температуре выше, чем при 37 °C. Основа селективного агара для йерсиний с добавленной селективной добавкой применяется для выделения Yersinia enterocolitica из клинических и неклинических образцов.

Рецептура среды основана на агаре CIN по Шиману. В предыдущую формулу среды CIN Шиман внёс изменения, заменив соли желчных кислот дезоксихолатом натрия.

Среда дифференцирует бактерии, ферментирующие и не ферментирующие маннитол:

• микроорганизмы, ферментирующие маннитол, подкисляют среду и вызывают локальное снижение pH вокруг колоний;
• в присутствии нейтрального красного колонии приобретают красную окраску;
• микроорганизмы, не ферментирующие маннитол, образуют бесцветные полупрозрачные колонии.

Селективность среды обеспечивается дезоксихолатом натрия и кристаллическим фиолетовым, которые подавляют грамположительные и ряд грамотрицательных бактерий. Добавление антибиотической селективной добавки повышает селективность среды в отношении Yersinia.

Типичные колонии Yersinia enterocolitica имеют тёмно-красную окраску и напоминают «бычий глаз»; обычно колонии окружены прозрачной зоной. Размер колоний, гладкость поверхности и соотношение диаметра прозрачной зоны к диаметру центральной части могут различаться у разных серотипов.

Проведение анализа

Для выделения Yersinia enterocolitica методом прямого посева и методом заливки образец непосредственно инокулируют на приготовленную среду.

1. Инокулируйте клинический, пищевой или другой исследуемый образец непосредственно на среду.
2. Инкубируйте при 22–32 °C в течение 24–48 ч.

Для предварительного обогащения пищевых образцов, фекалий и других материалов:

1. Поместите образец в стерильный фосфатно-солевой буферный раствор.
2. Инкубируйте суспензию при 4 °C до 21 суток.
3. Периодически выполняйте пересев образца на чашки с агаром для йерсиний.
4. Инкубируйте чашки при 22–32 °C в течение 24–48 ч.

Типы образцов

• Клинические образцы: фекалии, моча и другие материалы.
• Пищевые и молочные образцы.

Сбор и обращение с образцами

Для клинических образцов используйте соответствующие методы обращения с материалом согласно установленным руководствам.

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно действующим руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открыванием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения метода

Serratia liquefaciens, Citrobacter freundii и Enterobacter agglomerans могут иметь морфологическое сходство с Yersinia enterocolitica. Для окончательной идентификации таких микроорганизмов необходимо проводить биохимические тесты.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или розовый однородный сыпучий порошок.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,25%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель оранжево-красного цвета.

Реакция

Реакция 5,8%-ного водного раствора при 25 °C: pH 7,4 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики получены после добавления селективной добавки CTN для йерсиний FD034 и инкубации при 22–32 °C в течение 24–48 ч.