HiMedia M839-100G Основа олеинового бульона Дюбо

Питательная среда HiMedia M839-100G Основа олеинового бульона Дюбо предназначена для культивирования микобактерий и поставляется в порошковой форме. Основа используется для первичного выделения и последующего выращивания микобактерий из клинических образцов, включая мокроту, с добавлением олеин-альбуминовой добавки FD020 и пенициллина.

Назначение

Основа олеинового бульона Дюбо рекомендована для культивирования микобактерий, включая Mycobacterium tuberculosis. Тип клинического образца: мокрота.

Состав

Состав на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Принцип действия и интерпретация

Туберкулёз остаётся значимой проблемой общественного здравоохранения. Mycobacterium tuberculosis, вызывающая туберкулёз у человека, переносится в содержащихся в воздухе капельных ядрах, образующихся при кашле пациентов с туберкулёзом лёгких. Инфицирование происходит при вдыхании восприимчивым человеком капельных ядер, содержащих бактерии.

Основа олеинового бульона Дюбо рекомендована Дюбо и Миддлбруком для первичного выделения и последующего культивирования туберкулёзных бактерий. В сравнительных исследованиях различных питательных сред олеиново-альбуминовая агаризованная основа Дюбо показала более высокую эффективность для первичного выделения Mycobacteria по сравнению с другими средами. При внесении в жидкую питательную среду Mycobacteria растут очень быстро, поэтому рекомендуется предварительно культивировать все исследуемые образцы в бульонной среде.

Триптон и L-аспарагин служат источниками азота. Фосфаты совместно с хлоридом кальция буферируют среду и являются источниками фосфатов. Сульфат магния, сульфат цинка, сульфат меди и цитрат аммония и железа обеспечивают среду микроэлементами и сульфатами.

При выделении Mycobacteria из исследуемых образцов необходимо следовать стандартным процедурам. Перед культивированием образец следует надлежащим образом обеззаразить в соответствии со стандартными методами. При работе с культурами микобактерий необходимо соблюдать максимальную осторожность, поскольку культуры обладают высокой инфекционностью.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 1 г порошка в 180 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте среду в автоклаве при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм, что соответствует примерно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 20 мл стерильной олеин-альбуминовой добавки FD020 и 5000–10 000 единиц пенициллина.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные пробирки.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Указания по безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

При отсутствии надлежащих аэробных условий и повышенного содержания CO₂ во время инкубации возможны ошибочные результаты.

Условия проведения и оценка роста

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 2–6 недель. Для проведения оценки к среде добавляют олеин-альбуминовую добавку FD020 и 5000–10 000 единиц пенициллина.

Рабочие характеристики среды ожидаются при применении согласно инструкции на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный сыпучий порошок от почти белого до бежевого цвета.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: раствор светло-янтарного цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий, с мелкодисперсным осадком.
• Реакция среды: реакцию определяют для водного раствора с массовой концентрацией 0,5 %, содержащего 0,1 % FD020, при 25 °C.
• pH: 6,40–6,80.
• Номинальный pH: 6,6 ± 0,2.

Технические характеристики

Хранение и срок годности

Храните сухой продукт в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C, а приготовленную среду — при 2–8 °C. Используйте продукт до даты истечения срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия бутылку необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к образованию комков.

Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После каждого использования плотно закрывайте контейнер. Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение указанного срока годности.

Утилизация

Использователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов путём автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Сравнительное отличие

Олеиново-альбуминовая агаризованная основа Дюбо в сравнительных исследованиях применялась для первичного выделения микобактерий, тогда как основа олеинового бульона Дюбо предназначена для жидкого культивирования с предварительным внесением олеин-альбуминовой добавки FD020 и пенициллина.