Основа агара для Clostridium perfringens HiMedia M837-500G (уп/500 гр)

Питательная среда Основа агара для Clostridium perfringens HiMedia M837-500G (уп/500 гр) производства HiMedia предназначена для предварительной идентификации и количественного определения Clostridium perfringens в пищевых продуктах и соответствует ГОСТ Р 54354-2011. Основа используется с селективными и обогащающими добавками, при этом для окончательной идентификации требуются дополнительные биохимические и серологические тесты.

Назначение

Основа агара Perfringens Agar Base с добавлением селективной добавки и обогащающего компонента применяется для предположительной идентификации и подсчёта Clostridium perfringens.

Области применения:

• анализ пищевых образцов;
• исследование клинических образцов: кала и содержимого абсцессов;
• предварительная идентификация и количественное восстановление Clostridium perfringens.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Наименование среды: Perfringens Agar Base (T.S.C./S.F.P.)
• Тип питательной среды: элективная
• Назначение изделия: основа
• Форма выпуска: порошок
• Тип продукта: стандартный
• Тип упаковки: HDPE (полиэтилен высокой плотности)
• Происхождение: животное
• Фасовка: 500 г
• Сертификат: ФСЗ 2009/03709
• Нормативный документ: ГОСТ Р 54354-2011

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров. Пептон HM B эквивалентен мясному экстракту.

Принцип действия и интерпретация результатов

Трёхсахарный сульфит-циклосериновый агар (TSC) первоначально разработан Harmon и соавторами для количественного определения C. perfringens в пищевых продуктах. Среда TSC предназначена для количественного выделения C. perfringens с подавлением роста других факультативных анаэробов.

Основа агара TSC с добавкой FD014 или основа агара SFP с добавкой FD013 сопоставимы по эффективности выделения C. perfringens. Основа агара Perfringens также рекомендована APHA. Селективность среды обеспечивается:

• D-циклосерином при использовании добавки FD014;
• канамицином и полимиксином B при использовании добавки FD013.

Триптоза, соевый пептон, дрожжевой экстракт и пептон HM B обеспечивают микроорганизмы азотсодержащими соединениями, углеродом, серой, витаминами группы B и микроэлементами, необходимыми для роста клостридий.

Метабисульфит натрия и цитрат аммония и железа служат индикаторами восстановления сульфита: реакция проявляется образованием колоний чёрного цвета.

D-циклосерин из добавки FD014, канамицин и полимиксин B из добавки FD013 способствуют селективному выделению C. perfringens за счёт подавления сопутствующей микрофлоры.

Эмульсия яичного желтка служит источником лецитина, используемого C. perfringens.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 23,5 г порошка в 475 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения и полностью растворите среду.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на кв. дюйм, что соответствует примерно 0,10 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите основу до 45–50 °C.
5. Добавьте 25 мл эмульсии яичного желтка FD045.
6. Добавьте регидратированное содержимое одного флакона селективной добавки S.F.P. FD013 или T.S.C. FD014.
7. При необходимости флуорогенного обнаружения вместо FD013 или FD014 добавьте регидратированное содержимое одного флакона селективной добавки CMF FD243.
8. Тщательно перемешайте среду.
9. Разлейте приготовленную среду в стерильные чашки Петри.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют в анаэробных условиях после добавления селективной добавки T.S.C. FD014, S.F.P. FD013 или CMF FD243 и эмульсии яичного желтка FD045, после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Paeniclostridium sordellii ранее назывался Clostridium sordellii.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от светло-жёлтого до желтовато-коричневого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Базовая среда: прозрачный или слегка опалесцирующий гель янтарного цвета.
• После добавления эмульсии яичного желтка FD045: в чашках Петри образуется непрозрачный гель жёлтого цвета.

Реакция

Реакция 4,7%-ного водного раствора при 25 °C: pH 7,6 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 7,40–7,80.

Образцы

Тип образца

• Клинические образцы: кал, содержимое абсцессов.
• Пищевые образцы.

Сбор и обращение с образцами

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

Для клинических образцов используйте соответствующие методы обращения с образцами согласно утверждённым руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Селективные и обогащающие добавки

По заявке поставляются:

• FD013 — добавка S.F.P. с канамицином и полимиксином B.
• FD014 — добавка S.F.P. с циклосерином.
• FD045 — эмульсия яичного желтка, 100 мл во флаконе.
• FD243 — селективная добавка CMF для флуорогенного обнаружения.

Для основы агара применяются следующие варианты селективности:

• FD014 — добавка D-циклосерина для приготовления TSC;
• FD013 — добавка канамицина и полимиксина B для приготовления SFP;
• FD243 — добавка CMF, если требуется флуорогенное обнаружение.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Условия хранения: плотно закрытый контейнер, сухое проветриваемое помещение, защита от экстремальных температур и источников воспламенения.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия флакон необходимо плотно закрывать и хранить продукт в сухом состоянии. Порошок обладает гигроскопичностью; ненадлежащее хранение может привести к образованию комков. После каждого использования контейнер следует герметично закрывать.

Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение указанного срока годности и соблюдении рекомендованной температуры хранения.

Меры безопасности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы при обращении с образцами и культурами.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Дополнительные требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Разные микроорганизмы имеют индивидуальные требования к условиям роста и могут демонстрировать вариабельные характеристики роста на данной среде.
2. Для окончательной идентификации необходимо провести дополнительные биохимические и серологические тесты.
3. Каждая серия среды протестирована на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа (COA). При работе с конкретными микроорганизмами, не указанными в COA, пользователю рекомендуется валидировать среду с учётом специфических требований исследования.

Оценка рабочих характеристик

Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении и использовании согласно инструкции на этикетке, в пределах установленного срока годности и при хранении в рекомендованных температурных условиях.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать утверждённые лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими методами лабораторной работы.

Комплект поставки

• Основа агара для Clostridium perfringens HiMedia M837-500G, 500 г.

Техническое отличие вариантов среды

Основа M837 может быть переведена в селективную