Основа селективного агара для Clostridium difficile HiMedia M836-500G (уп/500 гр)

Диагностическая основа селективного агара для Clostridium difficile HiMedia M836-500G (уп/500 г) производства HiMedia. Рекомендуется для селективного выделения Clostridium difficile из пищевых продуктов и патологических образцов (фекалий).

Принцип измерения

Среда предназначена для первичного выделения C. difficile (патогенного возбудителя, вызывающего псевдомембранозный колит, антибиотик-ассоциированный колит, а также хронические воспалительные заболевания кишечника и послеоперационную диарею). Состав среды обеспечивает обильный рост C. difficile. Селективность достигается за счет добавления D-циклосерина и цефокситина, которые подавляют рост большинства представителей семейства Enterobacteriaceae, Enterococcus faecalis, стафилококков, грамотрицательных анаэробных бацилл и других видов Clostridium. Добавление 7 % (об/об) крови лошадей или овец повышает степень восстановления C. difficile и увеличивает размер колоний.

В данной формуле отсутствует индикатор нейтральный красный, так как среда предназначена для использования с кровью.

Методика проведения анализа

Подготовка среды

1. Суспендируйте 34,55 г порошка в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Осторожно нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте содержимое одной ампулы селективной добавки CC Selective Supplement I |FD010| и 7 % (об/об) дефибринированной крови лошади или овцы.
6. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри.

Процедура посева и инкубации

1. Распределите часть образца фекалий по поверхности среды для получения изолированных колоний.
2. Инкубируйте чашки в анаэробных условиях при 37 °C в течение 18–48 часов.

Интерпретация результатов

Через 48 часов C. difficile образует серовато-белые, неправильные, выпуклые и непрозрачные колонии диаметром 4–6 мм. Важно: из-за наличия антибиотиков в среде типичная морфология при окраске по Грамму в колониях может быть не выражена. Для подтверждения характеристик рекомендуется пересев на кровяной агар (M073). Колонии C. difficile на данной среде не проявляют типичной флуоресценции и окраски, в отличие от других видов Clostridia. Для окончательной идентификации необходимо проведение биохимических тестов, определение специфических цитотоксинов и клиническое наблюдение.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Общие параметры:

• Тип питательной среды: Диагностический
• Назначение: Основа
• Сертификат: ФСЗ 2009/03709
• Происхождение компонентов: Животное
• Физическая форма: Порошок
• Тип упаковки: ПНД (HDPE)

Контроль качества:

• Внешний вид: Крем-желтый однородный свободно текущий порошок.
• Желирование: Плотный гель, сопоставим с 1,5 % агаром.
• Цвет и прозрачность: Базовая среда — светло-янтарный прозрачный или слегка опалесцирующий гель. После добавления 7 % крови лошади — вишнево-красный непрозрачный гель.
• Реакция: pH 7,4 $\pm$ 0,2 (6,91 % водный раствор при 25 °C).
• Диапазон pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдались в анаэробных условиях с добавлением селективной добавки CC Selective Supplement I |FD010| и 7 % (об/об) дефибринированной крови лошади после инкубации при 35–37 °C в течение 48 часов.

Область применения и требования к образцам

• Типы образцов: клинические образцы (фекалии), образцы пищевых продуктов.
• Сбор и обработка: сбор и транспортировка должны осуществляться в соответствии с установленными руководствами по работе с клиническими и пищевыми пробами.
• Ограничения: для окончательной идентификации штамма обязательно проведение дополнительных биохимических и серологических тестов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере. Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание комкования. Хранить в сухом проветриваемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Утилизация: загрязненные материалы и использованные среды подлежат обязательному стерилизованию в автоклаве или сжиганию.

Комплект поставки и совместимость

По заявке поставляется:

• FD010 Clostridium Difficile Supplement / Добавка для выделения Clostridium difficile