Основа кровяного агара № 2 HiMedia M834A-500G (уп/500 гр)

Элективная питательная среда Основа кровяного агара № 2 HiMedia M834A-500G (уп/500 гр) с содержанием агара 1,2 %. Применяется для максимального восстановления прихотливых патогенных микроорганизмов без влияния на их гемолитические реакции.

Принцип измерения и интерпретация

Среда предназначена для культивирования прихотливых организмов с полными требованиями к питанию, нуждающихся в дополнительных клеточных строительных молекулах для выживания. Высокопитательный состав позволяет визуализировать зоны гемолиза, создаваемые микроорганизмами, вырабатывающими гемолизин.

При добавлении соответствующих антибиотиков среда служит дифференциальной для выделения видов Brucella и Campylobacter. Для получения наиболее четких и надежных характеристик колоний и гемолиза при инкубации в течение 24 и 48 часов рекомендуется использовать кровь овцы.

Роль компонентов

• Протеозо-пептон: источник азота.
• Экстракт печени (HL extract) и экстракт дрожжей: источники углерода, витаминов, азота и аминокислот; усиливают рост и гемолитические реакции стрептококков и пневмококков.
• Хлорид натрия: поддерживает осмотический баланс.
• Кровь (5–10 %): обеспечивает дополнительные факторы роста и служит основой для определения гемолитических реакций.

Особенности применения

• Среда может использоваться для приготовления шоколадного агара для изоляции видов Haemophilus и Neisseria.
• Для первичной изоляции видов Haemophilus при использовании обогащения кровью лошади рекомендуется распределить по поверхности пластины 2 капли 10 % сапонина.

Методика приготовления и использования

Приготовление базовой среды

1. Суспендируйте 19,75 г порошка в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$ 0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 7 % (об/об) стерильной дефибринированной крови.

Специальные модификации

Для выделения конкретных групп микроорганизмов в 500 мл стерильной расплавленной основы добавляют:

• Для видов Brucella: 1 флакон селективной добавки NPBCVN (FD005).
• Для видов Campylobacter: 1 флакон селективной добавки Blaser-Wang (FD006), Butzler (FD007), Skirrow (FD008) или Minerals Growth Supplement (FD009).
• Для видов Streptococcus: 1 флакон селективной добавки NNP (FD031).

После добавления тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Область применения

• Клинический материал: моча, фекалии, гной.
• Пищевые продукты.

Технические характеристики

Состав, г/л

Общие параметры

• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от кремового до желтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,2 % агаром.
• Цвет и прозрачность: базовая среда — светло-янтарный прозрачный или слегка опалесцирующий гель; после добавления 5 % стерильной дефибринированной крови — вишнево-красный непрозрачный гель.
• Реакция 4 % водного раствора при 25 °C: pH 7,4 ± 0,2.
• Диапазон pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются при добавлении 5 % стерильной дефибринированной крови после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 часов.

Ограничения и предостережения

• Для обнаружения гемолиза рекомендуется добавление крови овцы. Среда не поддерживает рост H. haemolyticus.
• Добавление крови лошади или кролика поддерживает рост H. haemolyticus, однако колонии напоминают бета-гемолитические стрептококки, что требует подтверждения.
• Характер гемолиза может варьироваться в зависимости от источника крови.
• Культуры Brucella высокоинфекционны и требуют осторожного обращения. Инкубацию предпочтительно проводить в атмосфере с 5–10 % CO₂.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищенном от экстремальных температур и источников возгорания.

Утилизация

Загрязненные материалы и использованные среды должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации в соответствии с установленными лабораторными процедурами по обращению с инфекционными материалами.