Основа кровяного агара № 2 HiMedia M834-500G (уп/500 гр)

Диагностическая питательная среда «Основа кровяного агара № 2 HiMedia M834-500G (уп/500 гр)» обеспечивает после добавления крови максимальное выделение стрептококков, пневмококков и других прихотливых патогенных микроорганизмов без влияния на гемолитические реакции. Среда предназначена для выделения и дифференциации микроорганизмов в клинических и пищевых образцах, однако не поддерживает рост H. haemolyticus при использовании овечьей крови.

Назначение

После добавления крови среда применяется для выделения стрептококков, пневмококков и других прихотливых патогенных микроорганизмов без влияния на их гемолитические реакции.

Области применения:

• первичное выделение микроорганизмов из клинического материала;
• исследование пищевых образцов;
• дифференциация Brucella и Campylobacter при добавлении соответствующих селективных антибиотических добавок;
• приготовление шоколадного агара для выделения Haemophilus и Neisseria;
• первичное выделение Haemophilus при использовании лошадиной крови для обогащения.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия рабочим характеристикам среды. Экстракт HL эквивалентен экстракту печени.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 21,25 г порошка в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов/дюйм² (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите основу до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 7 % об./об. стерильной дефибринированной крови.
6. При необходимости внесите соответствующую селективную добавку и тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Добавки для отдельных групп микроорганизмов

• Для видов Brucella: добавьте регидратированное содержимое 1 флакона селективной добавки NPBCVN (FD005) к 500 мл стерильной расплавленной основы.
• Для видов Campylobacter: добавьте регидратированное содержимое 1 флакона одной из следующих добавок к 500 мл стерильной расплавленной основы:
  • селективная добавка Blaser–Wang (FD006);
  • селективная добавка Butzler (FD007);
  • селективная добавка Skirrow (FD008);
  • минеральная ростовая добавка (FD009).
• Для видов Streptococcus: добавьте регидратированное содержимое 1 флакона селективной добавки NNP (FD031) к 500 мл стерильной расплавленной основы. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Прихотливый микроорганизм характеризуется полными пищевыми потребностями и нуждается в дополнительных молекулах — структурных компонентах клеток — для выживания.

Основа кровяного агара № 2 является высокопитательной средой. Микроорганизмы, продуцирующие гемолизин, образуют на среде видимые зоны гемолиза. При добавлении различных антибиотических добавок среда также используется как дифференциальная для видов Brucella и Campylobacter.

Культуры Brucella обладают высокой инфекционностью и требуют осторожного обращения. Инкубацию предпочтительно проводить в атмосфере с содержанием углекислого газа 5–10 %.

Сравнительные исследования крови лошади, кролика и овцы показали, что овечья кровь обеспечивает наиболее чёткие и воспроизводимые характеристики колоний и гемолиза после 24 и 48 ч инкубации.

Экстракт HL и дрожжевой экстракт усиливают рост и гемолитические реакции прихотливых микроорганизмов, включая стрептококки и пневмококки. Протеозный пептон служит источником азота, а экстракт HL и дрожжевой экстракт обеспечивают микроорганизмы необходимыми источниками углерода, витаминов, азота и аминокислот. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие. Добавление крови в концентрации 5–10 % обеспечивает дополнительные факторы роста и создаёт основу для определения гемолитических реакций.

Характер гемолиза может изменяться в зависимости от источника животной крови и типа использованной основы.

Для первичного выделения Haemophilus можно использовать лошадиную кровь в качестве обогащающего компонента. Для получения лучших результатов половину чашки с лошадиной кровяной средой рекомендуется обработать двумя каплями 10%-ного сапонина.

Типы образцов

• Клинический материал: фекалии, моча.
• Пищевые образцы.

Сбор и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с материалом согласно установленным методическим рекомендациям.

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно действующим методическим рекомендациям.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед вскрытием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила работы микробиологической лаборатории при обращении с образцами и культурами.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным методическим рекомендациям.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Для выявления гемолиза рекомендуется добавлять овечью кровь. При использовании овечьей крови среда не поддерживает рост H. haemolyticus.
2. Добавление лошадиной или кроличьей крови к основе поддерживает рост H. haemolyticus, однако такие культуры могут быть похожи на β-гемолитические стрептококки и требуют подтверждения.
3. Характер гемолиза изменяется в зависимости от источника используемой крови.

Рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при применении согласно инструкции на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованных условиях.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, соп