HiMedia M834-100G Основа кровяного агара №2

Порошковая питательная среда HiMedia M834-100G Основа кровяного агара №2 производства HiMedia предназначена для приготовления кровяного агара с конечным pH 7,4 ± 0,2. Среда применяется для выделения стрептококков, пневмококков и других требовательных патогенных микроорганизмов; масса упаковки составляет 100 г, температура хранения — 10–30 °C.

Назначение

После добавления крови среда обеспечивает максимальное восстановление стрептококков, пневмококков и других требовательных патогенных микроорганизмов без нарушения оценки их гемолитических реакций.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения установленных рабочих характеристик.

Экстракт HL эквивалентен экстракту печени.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 21,25 г порошка в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C в течение 15 мин и давлении 15 фунтов, что соответствует приблизительно 0,103 МПа.
4. Охладите основу до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 7 % об./об. стерильной дефибринированной крови.

Добавки для селективного выделения микроорганизмов

• Для видов Brucella: добавьте регидратированное содержимое одного флакона селективной добавки NPBCVN (FD005) к 500 мл стерильной расплавленной основы.
• Для видов Campylobacter: добавьте регидратированное содержимое одного флакона одной из следующих добавок к 500 мл стерильной расплавленной основы:
  • селективная добавка Blaser-Wang (FD006);
  • селективная добавка Butzler (FD007);
  • селективная добавка Skirrow (FD008);
  • минеральная ростовая добавка (FD009).
• Для видов Streptococcus: добавьте регидратированное содержимое одного флакона селективной добавки NNP (FD031) к 500 мл стерильной расплавленной основы. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Требовательные микроорганизмы имеют полный набор питательных потребностей и нуждаются в дополнительных молекулах — структурных компонентах клеток, необходимых для выживания.

Основа кровяного агара №2 представляет собой высокопитательную среду. Микроорганизмы, продуцирующие гемолизин, образуют на среде видимые зоны гемолиза.

Среда также используется как дифференциальная для видов Brucella и Campylobacter при добавлении различных антибиотических добавок, предназначенных для соответствующих бактерий. Культуры Brucella высокоинфекционны и требуют осторожного обращения.

Инкубацию предпочтительно проводить в атмосфере, содержащей 5–10 % CO₂.

Сравнительные исследования крови лошади, кролика и овцы показали, что овечья кровь обеспечивает наиболее чёткие и воспроизводимые характеристики колоний и гемолиза после 24 и 48 ч инкубации.

Среда может использоваться для приготовления шоколадного агара при выделении видов Haemophilus и Neisseria.

Основа также может применяться для первичного выделения видов Haemophilus с использованием крови лошади для обогащения. Для получения лучших результатов половину чашки с конским кровяным агаром рекомендуется покрыть двумя каплями 10%-го сапонина.

Экстракт HML и дрожжевой экстракт усиливают рост и гемолитические реакции требовательных микроорганизмов, включая стрептококки и пневмококки. Протеозопептон служит источником азота, а экстракт HML и дрожжевой экстракт обеспечивают микроорганизмы необходимыми источниками углерода, витаминов, азота и аминокислот. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие.

Добавление крови в концентрации 5–10 % обеспечивает дополнительные факторы роста и служит основой для определения гемолитических реакций. Характер гемолиза может изменяться в зависимости от источника животной крови и типа использованной питательной основы.

Типы образцов

• Клинический материал: фекалии, моча.
• Пищевые образцы.

Сбор и обращение с образцами

Для клинических образцов используйте соответствующие методы обращения с материалом в соответствии с установленными руководствами.

Для пищевых образцов используйте соответствующие методы отбора и обработки проб в соответствии с действующими руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Назначение: диагностика in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открыванием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• При необходимости обращайтесь к требованиям безопасности, указанным в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Для выявления гемолиза рекомендуется добавлять овечью кровь. Среда не поддерживает рост H. haemolyticus.
2. Добавление крови лошади или кролика к основе поддерживает рост H. haemolyticus, однако такие культуры могут имитировать β-гемолитические стрептококки и требуют подтверждения.
3. Характер гемолиза изменяется в зависимости от источника используемой крови.

Рабочие характеристики и оценка

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-м агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Базовая среда: прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-янтарного цвета.
• После добавления 5 % об./об. стерильной дефибринированной крови: в чашках Петри образуется непрозрачный гель вишнёво-красного цвета.

Реакция

Реакция 4,0%-го масс./об. водного раствора при 25 °C.

pH: 7,4 ± 0,2.

Диапазон pH

7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяли после добавления 5 % масс./об. стерильной дефибринированной крови и инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухого порошка: 10–30 °C.
• Условия хранения сухой среды: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскры