Основа агара для Bacillus cereus HiMedia M833-500G (уп/500 гр)

Основа агара HiMedia M833-500G (уп/500 гр) для селективного выделения и подсчёта Bacillus cereus из пищевых и клинических образцов. Питательная среда применяется для микробиологического контроля продуктов питания, молочных продуктов и клинического материала, при этом Bacillus cereus на среде неотличим от Bacillus thuringiensis без подтверждающих биохимических тестов.

Назначение

Основа агара HiMedia M833-500G рекомендована как селективная среда для выделения и количественного определения Bacillus cereus из пищевых и клинических образцов.

Тип питательной среды: элективный
Назначение изделия: основа
Сертификат: ФСЗ 2009/03709
Соответствие: ГОСТ Р 54354-2011
Физическая форма: порошок
Тип упаковки: HDPE (полиэтилен высокой плотности)
Происхождение: животное

Состав

Формула рассчитана и стандартизирована для обеспечения заявленных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация

Bacillus cereus вызывает пищевые отравления при употреблении контаминированного риса, глазные инфекции, а также ряд других клинических состояний, включая образование абсцессов, менингит, септицемию и инфицирование ран. Bacillus cereus также является причиной мастита у животных, особенно у овец и тёлок.

Среда Bacillus cereus Agar, разработанная Holbrook и Anderson, предназначена для выделения и подсчёта Bacillus cereus из пищевых продуктов. Среда поддерживает рост даже небольшого количества клеток и спор Bacillus cereus при наличии большого количества другой сопутствующей микрофлоры пищевых продуктов.

Типичные колонии Bacillus cereus имеют зазубренные края, диаметр около 5 мм и характерную окраску от бирюзовой до павлинье-синей. Вокруг колоний образуется выраженный осадок яичного желтка такого же цвета. Бактерии не ферментируют маннит, поэтому вокруг колоний не происходит изменения цвета индикаторного красителя.

Для повышения селективности среды при выделении Bacillus cereus добавляют сульфат полимиксина B до конечной концентрации 100 единиц на 1 мл среды. Добавка подавляет рост сопутствующей бактериальной флоры. Если в посевном материале предполагается наличие плесневых грибов, для подавления плесневой контаминации допускается внесение фильтрованного стерилизованного циклогексимида в конечной концентрации 40 мкг/мл.

Некоторые штаммы Bacillus cereus дают очень слабую реакцию с яичным желтком. На этой среде Bacillus cereus неотличим от Bacillus thuringiensis.

Пептон обеспечивает питательные компоненты, а пируват натрия улучшает образование осадка яичного желтка и усиливает спорообразование. Бромтимоловый синий действует как индикатор pH для выявления ферментации маннита.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 20,5 г порошка в 475 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,103 МПа) при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте восстановленное содержимое 1 флакона селективной добавки PolyB FD003 и 25 мл стерильной эмульсии яичного желтка FD045.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Методика выделения и подсчёта Bacillus cereus

Для выделения и количественного определения Bacillus cereus в пищевых продуктах рекомендуется следующая процедура:

1. Гомогенизированный образец, разведённый в пептонной воде M028, внесите в объёме 0,1 мл на поверхность приготовленной среды.
2. Инкубируйте при 37 °C в аэробных условиях в течение 24–48 ч.
3. Для существенного снижения роста контаминирующей микрофлоры используйте инкубацию в течение 24 ч.
4. Представьте результат как количество колоний Bacillus cereus на 1 г пищевого образца.
5. Перед интерпретацией выполните подтверждающие тесты.

Образцы

Тип образца: пищевые и молочные продукты, клинический материал из абсцессов и ран.

Сбор и обработка образцов

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки согласно действующим методическим рекомендациям.

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки согласно действующим методическим рекомендациям.

После использования контаминированные материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, легко пересыпаемый порошок от кремового до зеленовато-жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Базовая среда: прозрачный или слегка опалесцирующий гель зелёного цвета.

После добавления эмульсии яичного желтка: в чашках Петри образуется мутный гель желтовато-зелёного цвета.

Реакция

Реакция 4,1%-ного водного раствора базовой среды при 25 °C.

pH: 7,2 ± 0,2.

Диапазон pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч с добавлением селективной добавки PolyB FD003 и эмульсии яичного желтка FD045.

• — соответствующие номера WDCM.
  Proteus hauseri — ранее известен как Proteus vulgaris.

Ограничения метода

• Bacillus cereus и Bacillus thuringiensis демонстрируют идентичные характеристики, поэтому их трудно идентифицировать только по результатам на этой среде.
• Идентификация Bacillus cereus проводится по характеристикам колоний и реакциям, однако для подтверждения необходимо дополнительно исследовать биохимические характеристики.
• Некоторые штаммы Bacillus cereus могут демонстрировать слабый рост вследствие различий в пищевых потребностях.
• Некоторые штаммы Bacillus cereus дают слабую реакцию с яичным желтком.
• Для подавления плесневой контаминации при её предполагаемом наличии допускается добавление фильтрованного стерилизованного циклогексимида в концентрации 40 мкг/мл.
• Среда предназначена для применения в течение срока годности при соблюдении рекомендованной температуры хранения и процедуры приготовления.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.
• Условия хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить в сухом виде.
• Плотное закрытие предотвращает образование комков вследствие гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывать контейнер.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение установленного срока годности.

Меры предосторожности

• Изделие предназначено для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера изучите маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При работе с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При обращении с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с утверждёнными методическими рекомендациями.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты необходимо безопасно утилизировать после автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте утверждённые лабораторные процедуры.