HiMedia M833-100G Основа агара для Bacillus cereus

Селективная основа агара для Bacillus cereus HiMedia M833-100G предназначена для выделения и количественного учета бактерий Bacillus cereus из пищевых и клинических образцов. Среда обеспечивает рост даже небольшого количества клеток и спор в присутствии многочисленных пищевых контаминантов; вес упаковки составляет 100 г.

Принцип измерения и интерпретация

Среда основана на модификации агара Холбрука и Андерсона. Она является высокоспецифичной и селективной для выделения Bacillus cereus.

• Механизм селективности: Добавление сульфата полимиксина B (в конечной концентрации 100 ед/мл) подавляет рост сопутствующей бактериальной флоры. При подозрении на наличие плесеней в посеве допускается добавление циклогексимида (40 мкг/мл), прошедшего фильтрационную стерилизацию.
• Индикация: Бромтимоловый синий служит индикатором pH для определения ферментации маннита. Bacillus cereus не ферментирует маннит, поэтому цвет индикатора вокруг колоний не меняется.
• Морфология колоний: Типичные колонии Bacillus cereus имеют неправильные (кренированные) края, диаметр около 5 мм, характерный цвет от бирюзового до «павлиньего синего» и окружены зоной осаждения яичного желтка того же цвета.
• Особенности: Некоторые штаммы Bacillus cereus проявляют слабую реакцию с яичным желтком. На данной среде Bacillus cereus неотличим от Bacillus thuringiensis.

Роль компонентов:

• Пептон и пируват натрия: улучшают осаждение яичного желтка и стимулируют споруляцию.
• Бромтимоловый синий: индикатор ферментации маннита.

Методика проведения анализа

Для выделения и подсчета Bacillus cereus в пищевых продуктах рекомендуется следующий метод:

1. Распределите 0,1 мл гомогенизированного образца, разведенного в пептонной воде (M028), на поверхность среды.
2. Инкубируйте при температуре 37 °C в аэробных условиях в течение 24–48 часов.
3. При инкубации в течение 24 часов рост контаминантов значительно снижается.
4. Результаты выражаются как количество колоний Bacillus cereus на грамм веса образца продукта.
5. Перед окончательной интерпретацией необходимо провести подтверждающие тесты.

Приготовление и стерилизация

1. Растворите 20,5 г порошка в 475 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте содержимое одного флакона регидратированной добавки PolyB Selective Supplement (FD003) и 25 мл стерильной эмульсии яичного желтка (FD045).
6. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Область применения

• Пищевые и молочные образцы: контроль качества и безопасности продукции.
• Клинические образцы: исследование экссудата из абсцессов и ран.
• Ветеринария: диагностика маститов (особенно у овец и телок).

Технические характеристики

Состав, г/л:

Общие параметры:

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются при использовании добавки PolyB Selective Supplement (FD003) и эмульсии яичного желтка (FD045) после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов.

Ограничения и предупреждения

• Идентификация: Bacillus cereus и Bacillus thuringiensis имеют идентичные характеристики на данной среде, что затрудняет их дифференциацию.
• Подтверждение: Идентификация по морфологии колоний и реакции с желтком является предварительной; для подтверждения необходимо проведение дополнительных биохимических тестов.
• Вариативность: Некоторые штаммы Bacillus cereus могут демонстрировать слабый рост из-за различий в тропности к питательным веществам.
• Безопасность: Только для профессионального использования в In Vitro диагностике. При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности и используйте средства индивидуальной защиты.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом месте. Из-за гигроскопичности продукта плотно закрывайте крышку во избежание комкования.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Утилизация: Использованные среды и материалы, контактировавшие с клиническими образцами, подлежат обязательному автоклавированию или инсинерации.