Основа солевого бульона с полимиксином HiMedia M821I

Диагностическая питательная среда Основа солевого бульона с полимиксином HiMedia M821I для определения и подсчета видов Vibrio. Применяется для анализа пищевых продуктов и кормов для животных; состав и критерии эффективности соответствуют стандарту ISO 8914:1990.

Принцип измерения

Среда предназначена для селективного обогащения культур вибрионов. Пептон и дрожжевой экстракт обеспечивают организм азотистыми соединениями, углеродом, серой, микроэлементами, длинноцепочечными аминокислотами и витаминами группы B, необходимыми для роста. Селективность обеспечивается добавлением сульфата полимиксина B, который подавляет рост грамположительных микроорганизмов.

Методика проведения анализа

Подготовка среды

1. Суспендируйте 14,85 г порошка в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте до полного растворения.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C и в асептических условиях добавьте содержимое 1 флакона селективной добавки PolyB (FD003).
5. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным пробиркам или колбам.

Процедура анализа

1. Пробоподготовка: Взвесьте 50 г образца в блендере. Добавьте 450 мл фосфатно-солевого буферного раствора и перемешивайте в течение 1 минуты при 8000 об/мин (получение разведения 1:10). При необходимости приготовьте разведения 1:100, 1:1000, 1:10000 и выше в фосфатно-цитратном буфере (PCB).
2. Инокуляция:
   • Внесите 3 порции по 10 мл разведения 1:10 в 3 пробирки, содержащие 10 мл бульона двойной концентрации (соответствует порции 1 г образца).
   • Аналогично внесите 3 порции по 1 мл разведений в 10 мл бульона одинарной концентрации.
3. Инкубация: Инкубируйте пробирки при температуре 35 $\pm$ 2 °C в течение 24 часов.
4. Посев: После инкубации перенесите петлёй культуру на плотную среду, например, агар TCBS (M189), для дальнейшего изучения.

Интерпретация результатов

• V. parahaemolyticus: образует круглые зеленые или голубоватые колонии диаметром 2–3 мм.
• V. cholerae: образует желтые колонии.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Общие параметры:

• Происхождение компонентов: животное
• Физическая форма: порошок
• Тип упаковки: ПНД (HDPE)
• Внешний вид: однородный свободнотекучий порошок от кремового до желтого цвета
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-желтый прозрачный раствор без осадка
• Реакция 2,97% водного раствора (при 25 °C): pH 7,4 $\pm$ 0,2
• Диапазон pH: 7,20–7,60

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов с добавлением селективной добавки PolyB (FD003).

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение готовой среды: при температуре 15–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать для предотвращения комкования. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Меры предосторожности и утилизация

При работе со средой и образцами необходимо использовать защитные перчатки, одежду, средства защиты глаз и лица, соблюдая правила микробиологической безопасности. Загрязненные материалы и использованные среды подлежат обязательной стерилизации в автоклаве или сжиганию перед утилизацией.