Основа солевого бульона с полимиксином HiMedia M821I

Диагностическая питательная среда «Основа солевого бульона с полимиксином HiMedia M821I» производства HiMedia представляет собой порошковую основу для приготовления селективного солевого бульона. Среда применяется для обнаружения и количественного определения видов Vibrio в пищевых продуктах и кормах для животных; для селективности после стерилизации добавляют регидратированное содержимое флакона PolyB Selective Supplement (FD003).

Назначение и область применения

Основа солевого бульона с полимиксином HiMedia M821I рекомендована для обнаружения и количественного определения видов Vibrio. Состав и критерии эффективности среды соответствуют требованиям ISO 8914:1990.

Тип питательной среды: диагностическая
Назначение изделия: основа
Тип образцов: пищевые продукты и корма для животных

Состав

Состав, г/л:

* Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия установленным параметрам эффективности.

Пептон: пептический перевар тканей животного происхождения.

Принцип действия и интерпретация

Виды Vibrio сравнительно легко выделяются из клинического материала и образцов окружающей среды, однако для роста некоторых видов могут потребоваться факторы роста и/или витамины.

Vibrio parahaemolyticus является основной причиной бактериальной диареи, связанной с употреблением загрязнённых пищевых продуктов. Солевой бульон с полимиксином M821 приготовлен согласно рекомендации APHA. Комитет ISO рекомендовал модификацию этой среды M8211 для обнаружения и количественного определения солеустойчивого Vibrio parahaemolyticus.

Пептон и дрожжевой экстракт обеспечивают микроорганизмы азотистыми соединениями, источниками углерода и серы, микроэлементами, аминокислотами с длинной цепью и комплексом витаминов группы B, необходимыми для роста. Сульфат полимиксина B подавляет рост грамположительных микроорганизмов.

После обогащения культуры пересевают на плотную среду, например на агар TCBS (M189), для дальнейшего исследования. На агаре TCBS V. parahaemolyticus образует округлые зелёные или голубоватые колонии диаметром 2–3 мм, а V. cholerae — колонии жёлтого цвета.

Методика подготовки среды

1. Суспендируйте 14,85 г порошка в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте среду в автоклаве при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте регидратированное содержимое одного флакона селективной добавки PolyB Selective Supplement (FD003).
6. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные пробирки или колбы в необходимом объёме.

Методика пробоподготовки и количественного анализа

1. Взвесьте 50 г образца и перенесите в блендер.
2. Добавьте 450 мл разбавляющей воды — фосфатно-солевого буфера — и гомогенизируйте образец в течение 1 мин при 8000 об/мин. Полученная суспензия соответствует разведению 1:10.
3. При необходимости приготовьте в фосфатно-солевом буфере разведения 1:100, 1:1000, 1:10000 или более высокие.
4. Внесите три порции по 10 мл разведения 1:10 в три пробирки, каждая из которых содержит по 10 мл обогатительной среды — основы солевого бульона с полимиксином двойной концентрации. Такая постановка соответствует порции образца массой 1 г.
5. Аналогично внесите три порции по 1 мл соответствующих разведений в пробирки с 10 мл основы солевого бульона с полимиксином одинарной концентрации.
6. Инкубируйте пробирки при температуре 35 ± 2 °C в течение 24 ч.
7. После инкубации выполните пересев петлёй на плотную среду, например агар TCBS (M189), для дальнейшего исследования и идентификации.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид сухой среды

Внешний вид: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Цвет и прозрачность: прозрачный раствор светло-жёлтого цвета без осадка.

Реакция среды

Реакция: реакция водного раствора концентрацией 2,97 % масс./об. при 25 °C.
pH: 7,4 ± 0,2.

Диапазон pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч с добавлением селективной добавки PolyB Selective Supplement (FD003).

Сбор и обращение с образцами

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры предосторожности

• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с этикеткой.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте надлежащие правила работы в микробиологической лаборатории при обращении с образцами и культурами.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности, установленные действующими руководствами.
• Инструкции по безопасности могут быть приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Оценка эффективности

Эффективность среды ожидается при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах установленного срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Температура хранения приготовленной среды: 15–30 °C.
• Контейнер: плотно закрытый.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде в плотно закрытом флаконе, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывайте контейнер.
• Для сохранения заявленной эффективности используйте продукт в течение указанного срока годности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры.