HiMedia M821I-500G Основа солевого бульона с полимиксином

Основа солевого бульона с полимиксином HiMedia M821I-500G для выделения и количественного определения видов Vibrio. Среда разработана в соответствии со спецификациями стандарта ISO 8914:1990; вес упаковки 500 г.

Область применения

Среда рекомендуется для обнаружения и подсчета бактерий рода Vibrio в образцах пищевых продуктов и кормов для животных. Применяется для выделения солеустойчивых штаммов Vibrio parahaemolyticus, которые являются основной причиной бактериальной диареи при употреблении загрязненных продуктов.

Принцип измерения

Пептон и дрожжевой экстракт обеспечивают азотистые соединения, углерод, серу, микроэлементы, длинноцепочечные аминокислоты и витамины комплекса B, необходимые для роста микроорганизмов. Сульфат полимиксина B подавляет рост грамположительных организмов.

Методика проведения анализа

Подготовка среды

1. Суспендируйте 14,85 г порошка в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C и асептически добавьте содержимое одного флакона селективной добавки PolyB (FD003) в регидратированном виде.
5. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным пробиркам или колбам.

Процедура анализа

1. Взвесьте 50 г образца в блендере.
2. Добавьте 450 мл фосфатно-солевого буферного раствора и перемешивайте в течение 1 минуты при 8000 об/мин (получен разведение 1:10).
3. При необходимости приготовьте разведения 1:100, 1:1000, 1:10000 и выше в фосфатно-солевом буфере.
4. Инокулируйте три порции по 10 мл разведения 1:10 в три пробирки, содержащие по 10 мл обогащающего бульона (основа солевого бульона с полимиксином в двойной концентрации). Это соответствует порции образца 1 г.
5. Аналогично инокулируйте три порции по 1 мл разведений в 10 мл бульона одинарной концентрации.
6. Инкубируйте пробирки при температуре 35 $\pm$ 2 °C в течение 24 часов.
7. После инкубации перенесите петлёй культуру на плотную среду, например, агар TCBS (M189), для дальнейшего изучения.

Интерпретация результатов

• V. parahaemolyticus: образует круглые зеленые или голубоватые колонии диаметром 2–3 мм.
• V. cholerae: образует желтые колонии.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Общие параметры:

Контроль качества:

• Внешний вид: однородный свободнотекучий порошок от кремового до желтого цвета.
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-желтый прозрачный раствор без осадка.
• Реакция: pH 7,4 $\pm$ 0,2 для 2,97% (масса/объем) водного раствора при 25 °C.
• Диапазон pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов с добавлением селективной добавки PolyB (FD003).

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 15–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание комкования. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Меры предосторожности и утилизация

• При работе использовать защитные перчатки, одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдать стандартные правила микробиологической работы в лаборатории.
• Загрязненные материалы и использованные среды должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией.