HiMedia M821I-500G Основа солевого бульона с полимиксином

Сухая питательная среда HiMedia M821I-500G Основа солевого бульона с полимиксином — порошковая основа животного происхождения для приготовления селективного обогатительного бульона, масса 500 г. Среда предназначена для обнаружения и количественного определения видов Vibrio в пищевых образцах и кормах для животных; температура хранения продукта — 10–30 °C.

Назначение

Среда рекомендована для обнаружения и количественного определения видов Vibrio, включая Vibrio parahaemolyticus и Vibrio cholerae. Состав и критерии эффективности соответствуют требованиям ISO 8914:1990.

Тип образцов

• Пищевые образцы.
• Корма для животных.

Состав

Формула на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров эффективности.

Пептон: пептический перевар тканей животного происхождения.

Принцип действия и интерпретация

Вибрионы сравнительно легко выделяются из клинического материала и образцов окружающей среды, однако для роста некоторых видов могут потребоваться факторы роста и/или витамины.

Vibrio parahaemolyticus является основной причиной бактериальной диареи, связанной с употреблением загрязнённых пищевых продуктов. Солевой бульон с полимиксином M821 разработан согласно рекомендации Американской ассоциации общественного здравоохранения (APHA). Комитет ISO рекомендовал модификацию этой среды M8211 для обнаружения и количественного определения солеустойчивого Vibrio parahaemolyticus.

Пептон и дрожжевой экстракт обеспечивают среду азотистыми соединениями, источниками углерода и серы, микроэлементами, аминокислотами с длинной углеродной цепью и витаминами группы B, необходимыми для роста микроорганизмов. Сульфат полимиксина B подавляет рост грамположительных микроорганизмов.

После инкубации материал пересевают петлёй на твёрдую среду, например на агар TCBS (M189), для дальнейшего исследования. Vibrio parahaemolyticus образует круглые зелёные или голубоватые колонии диаметром 2–3 мм, а Vibrio cholerae — колонии жёлтого цвета.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 14,85 г порошка в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при давлении примерно 0,103 МПа (15 psi) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте восстановленное содержимое 1 флакона селективной добавки PolyB (FD003).
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные пробирки или колбы в необходимом объёме.

Подготовка образца и проведение анализа

1. Взвесьте 50 г образца и перенесите в блендер.
2. Добавьте 450 мл разбавляющей воды — фосфатно-солевого буферного раствора.
3. Гомогенизируйте образец в течение 1 мин при скорости 8000 об/мин. Полученная суспензия соответствует разведению 1:10.
4. При необходимости приготовьте в фосфатно-солевом буферном растворе разведения 1:100, 1:1000, 1:10000 или более высокие разведения.
5. Внесите три порции по 10 мл разведения 1:10 в три пробирки, содержащие по 10 мл обогатительного бульона — основы солевого бульона с полимиксином в концентрации 2×. Такая постановка соответствует порции образца массой 1 г.
6. Аналогичным образом внесите три порции по 1 мл соответствующих разведений в пробирки, содержащие по 10 мл солевого бульона с полимиксином в рабочей концентрации 1×.
7. Инкубируйте пробирки при температуре 35 ± 2 °C в течение 24 ч.
8. После инкубации выполните пересев петлёй на твёрдую среду, например агар TCBS (M189), для дальнейшего исследования и идентификации.

Контроль качества

Внешний вид

• Внешний вид порошка: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: прозрачный раствор светло-жёлтого цвета без осадка.
• Реакция: реакция водного раствора 2,97 % масс./об. при 25 °C.
• pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч с добавлением селективной добавки PolyB (FD003).

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Модель/артикул: M821I-500G
• Назначение изделия: основа питательной среды
• Тип продукта: стандартный
• Физическая форма: порошок
• Происхождение компонентов: животное
• Материал упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE)
• Масса: 500 г
• Концентрация при приготовлении: 14,85 г на 500 мл очищенной или дистиллированной воды
• Конечный pH при 25 °C: 7,4 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,20–7,60
• Температура стерилизации: 121 °C
• Давление стерилизации: примерно 0,103 МПа (15 psi)
• Время стерилизации: 15 мин
• Температура охлаждения перед внесением добавки: 45–50 °C
• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 15–30 °C

Условия хранения и срок годности

• Храните продукт при температуре 10–30 °C в плотно закрытой упаковке.
• Приготовленную среду храните при температуре 15–30 °C.
• Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков вследствие гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывайте упаковку.
• Эффективность среды обеспечивается при использовании в течение указанного срока годности и при соблюдении рекомендованных условий хранения.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и подготовки проб в соответствии с установленными руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать в автоклаве перед утилизацией.

М