Основа солевого бульона с полимиксином HiMedia M821-500G (уп/500 гр)

Питательная диагностическая среда «Основа солевого бульона с полимиксином HiMedia M821-500G (уп/500 гр)» предназначена для выявления и количественного определения видов Vibrio, конечный pH среды — 8,8±0,2. Основа применяется для обогащения клинических, пищевых и водных образцов, при этом для селективности перед использованием требуется асептическое добавление полимиксина B.

Назначение и область применения

Основа солевого бульона с полимиксином используется для обнаружения и количественного определения видов Vibrio.

Применяемые образцы:

• клинический материал: фекалии;
• пищевые образцы;
• образцы воды.

С добавлением полимиксина среда рекомендована для определения и подсчёта вибрионов. После обогащения необходим пересев на плотную питательную среду для дальнейшего изучения; для полной идентификации требуются дополнительные серологические и биохимические исследования.

Продукт предназначен для диагностики in vitro и профессионального применения.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения установленных рабочих параметров.

Принцип действия и интерпретация

Вибрионы относительно легко выделяются из клинического материала и образцов окружающей среды, однако для роста некоторых видов могут потребоваться факторы роста и/или витамины.

Солевой бульон с полимиксином приготовлен в соответствии с рекомендациями APHA. Триптон и дрожжевой экстракт обеспечивают азотистые соединения, углерод, серу, микроэлементы, аминокислоты с длинной цепью и витамины группы B, необходимые для роста микроорганизмов. Сульфат полимиксина B подавляет рост грамположительных микроорганизмов.

После инкубации петлю культуры пересевают на плотную среду, например агар TCBS (M189), для дальнейших исследований:

• V. parahaemolyticus образует круглые зелёные или голубоватые колонии диаметром 2–3 мм;
• V. cholerae образует колонии жёлтого цвета.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 16,5 г сухой основы в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию до полного растворения среды.
3. Простерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Асептически добавьте регидратированное содержимое одного флакона селективной добавки PolyB (FD003).
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте приготовленную среду в стерильные пробирки или колбы в требуемом объёме.

Пробоподготовка и обработка образцов

1. Взвесьте 50 г образца и перенесите в блендер.
2. Добавьте 450 мл фосфатно-солевой буферной воды для разведения.
3. Гомогенизируйте образец в течение 1 мин при скорости 8000 об/мин. Полученная суспензия соответствует разведению 1:10.
4. При необходимости приготовьте в фосфатно-буферном растворе (PCB) разведения 1:100, 1:1000, 1:10000 или более высокие.
5. Внесите по 3 × 10 мл разведения 1:10 в три пробирки, содержащие по 10 мл обогатительного бульона — основы солевого бульона с полимиксином двойной концентрации. Такая схема соответствует порции образца массой 1 г.
6. Аналогично внесите по 3 × 1 мл приготовленных разведений в 10 мл основы солевого бульона с полимиксином одинарной концентрации.
7. Инкубируйте пробирки при температуре 35±2 °C в течение 24 ч.
8. После инкубации выполните пересев петлёй на плотную среду, например агар TCBS (M189), для дальнейших исследований.

Загрязнённые материалы после использования необходимо простерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид сухой среды: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: прозрачный раствор светло-жёлтого цвета без осадка.

Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 3,3 % мас./об. при 25 °C; pH — 8,8±0,2.

Диапазон pH: 8,60–9,00.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч с добавлением селективной добавки PolyB (FD003).

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Тип питательной среды: диагностический
• Назначение изделия: основа
• Сертификат: ФСЗ 2009/03706
• Регистрация и методические документы: ФСЗ 2009/03706; методические рекомендации Роспотребнадзора МР 02.009-06. Саратов, 2006

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухой основы: 10–30 °C.
• Температура хранения приготовленной среды: 15–30 °C.
• Условия хранения: плотно закрытый контейнер, сухое проветриваемое помещение, защита от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После вскрытия: хранить продукт в сухом состоянии, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
• После использования: плотно закрывать контейнер.
• Срок применения: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение установленного срока годности и при соблюдении рекомендованной температуры хранения.

Ограничения и меры предосторожности

• Среда предназначена для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открыванием контейнера необходимо ознакомиться с этикеткой.
• При работе следует использовать защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами необходимо соблюдать правила надлежащей микробиологической работы.
• При работе с клиническими образцами следует соблюдать стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Инструкции по безопасности могут быть приведены в индивидуальных паспортах безопасности.
• Для дальнейших исследований требуется пересев на плотную среду.
• Для полной идентификации необходимы дополнительные серологические и биохимические тесты.

Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении и использовании согласно инструкции на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материал, контактировавший с клиническим образцом, должен быть обеззаражен и утилизирован в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Комплект поставки

• Основа солевого бульона с полимиксином