Основа дифференциального забуференного угольного агара с дрожжевым экстрактом HiMedia M814-100G (уп/100 гр)

Основа питательной среды «Основа дифференциального забуференного угольного агара с дрожжевым экстрактом HiMedia M814-100G (уп/100 гр)» производства HiMedia для селективного выделения и дифференциации видов Legionella, с конечным значением pH 6,9 ± 0,2. Основа применяется для анализа клинических респираторных мазков и проб воды, при этом рост некоторых видов Legionella может проявиться только через 2 недели.

Назначение

Применяется для селективного выделения и дифференциации видов Legionella из клинических образцов и проб воды.

Тип питательной среды: дифференциальный
Назначение изделия: основа
Сертификат: ФСЗ 2009/03705
Форма выпуска: 100 г сухой среды

Состав

Состав рассчитан на 1 л среды. Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров эффективности.

Принцип действия и интерпретация

Legionella pneumophila — грамотрицательная палочковидная бактерия, вызывающая легионеллёз. Заражение дыхательных путей происходит при вдыхании переносимых по воздуху капель воды. В природных условиях бактерия обитает в цитоплазме водного простейшего Hartmanella.

К распространённым источникам Legionella относятся:

• градирни промышленных систем охлаждения воды;
• крупные централизованные системы кондиционирования воздуха;
• системы горячего водоснабжения;
• фонтаны и аналогичные устройства, использующие воду из общественной системы водоснабжения;
• природные пресноводные водоёмы, включая пруды и ручьи.

Первоначально для выделения L. pneumophila применяли агар F-G, разработанный Feeley и соавторами. Позднее в агаре F-G мясной экстракт и гидролизат казеина заменили дрожжевым экстрактом, а крахмал — активированным углём. Модифицированную среду F-G усовершенствовали добавлением буфера ACES — N-2-ацетамидо-2-аминоэтансульфоновой кислоты. Чувствительность полученного забуференного угольно-дрожжевого агара повысили добавлением альфа-кетоглутарата. Дифференциальная основа забуференного угольного агара с дрожжевым экстрактом предназначена для селективного выделения и дифференциации видов Legionella и основана на рецептуре Vickers, содержащей два красителя: бромкрезоловый пурпурный и бромтимоловый синий.

Функции компонентов среды:

• дрожжевой экстракт обеспечивает питательные вещества, необходимые для роста бактерий;
• пирофосфат железа, гидрохлорид L-цистеина и альфа-кетоглутарат стимулируют рост видов Legionella;
• активированный уголь нейтрализует токсичные метаболические продукты, образующиеся в среде, и изменяет её поверхностное натяжение;
• бромкрезоловый пурпурный и бромтимоловый синий помогают идентифицировать виды Legionella по окраске и морфологии колоний;
• полимиксин B подавляет большинство грамотрицательных бацилл;
• ванкомицин подавляет рост большинства грамположительных бактерий;
• буфер ACES поддерживает буферную ёмкость среды.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 37,37 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 121 °C и давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,103 МПа) в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. При необходимости асептически добавьте 50 ед./мл полимиксина B и 1 мг/мл ванкомицина либо асептически внесите регидратированное содержимое одного флакона добавки FD349 (добавка V.P.).
6. Тщательно перемешайте среду.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Типы образцов

• Клинические образцы: респираторные мазки.
• Пробы воды.

Сбор и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным руководствам.

Для проб воды используйте соответствующие методы отбора и обработки проб в соответствии с руководствами и местными стандартами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при работе с образцами и культурами.
• При обращении с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Руководства по безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Исследуемый образец следует культивировать как можно скорее. Мазки для культивирования можно непосредственно штриховать по поверхности чашки.
2. Рост Legionella обычно становится видимым через 3–4 дня, однако для появления некоторых видов может потребоваться до 2 недель.
3. Для окончательного подтверждения необходимо провести дополнительные биохимические исследования.

Рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении и применении в соответствии с инструкцией на этикетке и использовании в пределах срока годности при хранении при рекомендованной температуре.

Контроль качества

Внешний вид: однородный, сыпучий порошок от светло-серого до чёрного цвета.

Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется серо-чёрный непрозрачный гель.

Реакция: реакция водного раствора с массовой концентрацией 3,74 % (масса/объём) при 25 °C; pH 6,9 ± 0,2.

Диапазон pH: 6,70–7,10.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 72–96 ч с добавлением 50 ед./мл полимиксина B и 1 мг/мл ванкомицина.

Технические характеристики

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.
• Условия хранения сухой среды: в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить в сухом виде, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности продукта.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников возгорания.
• После каждого использования контейнер необходимо плотно закрывать.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при применении в течение указанного срока годности.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованной или непригодной для применения среды посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, необходимо обеззараживать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методами.