Основа дифференциального забуференного угольного агара с дрожжевым экстрактом HiMedia M814-100G (уп/100 гр)

Основа дифференциального забуференного угольного агара с дрожжевым экстрактом HiMedia M814-100G для селективного выделения и дифференциации видов Legionella. Применяется для анализа клинических образцов (респираторные мазки) и проб воды; содержит ACES-буфер и активированный уголь для стабилизации среды и нейтрализации токсичных метаболитов.

Принцип измерения и интерпретация

Среда предназначена для выделения Legionella pneumophila — грамотрицательной палочки, вызывающей болезнь легионеров. В природе бактерия обитает в цитоплазме пресноводных простейших Hartmanella.

Основа базируется на модификации агара F-G, где мясной экстракт и казеиновый гидролизат заменены дрожжевым экстрактом, а крахмал — активированным углем. Для повышения чувствительности и стабильности добавлены ACES-буфер (N-2-ацетамидо-2-аминоэтансульфоновая кислота) и альфа-кетоглутарат.

Функции компонентов:

• Дрожжевой экстракт: обеспечивает необходимые питательные вещества.
• Пирофосфат железа, L-цистеин гидрохлорид и альфа-кетоглутарат: стимулируют рост видов Legionella.
• Активированный уголь: нейтрализует токсичные продукты метаболизма и модифицирует поверхностное натяжение среды.
• Бромкрезоловый пурпурный и бромтимоловый синий: индикаторы, позволяющие идентифицировать виды Legionella по цвету и морфологии колоний.
• Полимиксин B (добавляется отдельно): подавляет большинство грамотрицательных бацилл.
• Ванкомицин (добавляется отдельно): подавляет рост большинства грамположительных бактерий.

Состав

Состав, г/л:

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Суспендировать 37,37 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревать до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$ 0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C.
5. При необходимости асептически добавить 50 ед/мл полимиксина B и 1 мг/мл ванкомицина (или добавить содержимое одного флакона добавки V.P. Supplement FD349).
6. Тщательно перемешать и разлить в стерильные чашки Петри.

Работа с образцами

• Клинические образцы: респираторные мазки. Обработка проводится согласно установленным руководствам.
• Пробы воды: сбор и обработка согласно местным стандартам и руководствам.

Особенности анализа и ограничения

• Тестовый образец следует посеять как можно скорее. Мазки можно наносить непосредственно на поверхность агара.
• Рост Legionella обычно становится видимым через 3–4 дня, однако некоторым видам может потребоваться до 2 недель.
• Для окончательного подтверждения необходимо проведение дополнительных биохимических тестов.

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются при добавлении 50 ед/мл полимиксина B и 1 мг/мл ванкомицина после инкубации при 35–37 °C в течение 72–96 часов.

Технические характеристики

• Тип питательной среды: Дифференциальный
• Назначение: Основа
• Сертификат: ФСЗ 2009/03705
• Внешний вид: светло-серый или черный гомогенный свободнотекущий порошок
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,5 % раствором агара
• Цвет и прозрачность готовой среды: серо-черный, непрозрачный гель
• Реакция 3,74 % (масс./об.) водного раствора при 25 °C: pH 6,9 ± 0,2
• Диапазон pH: 6,70–7,10
• Происхождение компонентов: без использования сырья животного происхождения (микробное)
• Физическая форма: порошок
• Тип упаковки: ПНД (HDPE)

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом месте, вдали от источников возгорания. Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание комкования.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Утилизация: использованные или непригодные препараты подлежат обязательному автоклавированию или сжиганию. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, должны быть деконтаминированы.

Меры предосторожности

Продукт предназначен для диагностики in vitro и профессионального использования. При работе с образцами и культурами необходимо использовать средства индивидуальной защиты (перчатки, защитная одежда, защита глаз и лица) и соблюдать правила микробиологической безопасности.