HiMedia M813I-500G Буферный агар с активированным углем и дрожжевым экстрактом

HiMedia·Арт.: 0050115·Арт. произв.: M813I-500G

HiMedia M813I-500G Буферный агар с активированным углем и дрожжевым экстрактом

Name: HiMedia M813I-500G Буферный агар с активированным углем и дрожжевым экстрактом
Brand: HiMedia
SKU: 0050115
Price: 53585 RUB
Availability: PreOrder

Под заказ53 585 руб.

Буферный агар с активированным углем и дрожжевым экстрактом HiMedia M813I-500G предназначен для селективного выделения и культивирования видов Legionella. Среда соответствует спецификациям ISO 11731-1:2017 и 11731-2:2017; вес упаковки составляет 500 г.

Описание

Принцип измерения

Среда разработана на основе модификации агара с угольным экстрактом (CYE). В состав включены активированный уголь, который выполняет роль детоксиканта, и дрожжевой экстракт как богатый источник витаминов, азота и углерода. Буфер ACES поддерживает оптимальный уровень pH для роста микроорганизмов.

Для стимуляции роста видов Legionella в состав входят L-цистин гидрохлорид, пирофосфат железа (III) и $\alpha$ -кетоглутарат. Аминокислоты являются основным источником энергии для данных бактерий, при этом L-цистин является абсолютным требованием для их метаболизма.

Для подавления contaminating-микроорганизмов (сопутствующей микрофлоры) могут быть использованы антибиотические добавки:

PCP Supplement (FD347): полимиксин B, цефазолин натрия и пимарицин.
GVPC Selective Supplement (FD143): глицин, полимиксин B сульфат, ванкомицин и циклогексимид.
MWY Selective Supplement (FD040): глицин, полимиксин B, анизомицин, ванкомицин, бромтимоловый синий и бромкрезоловый пурпурный.

Область применения

Рекомендуется для анализа проб воды (включая градирни охлаждающих систем) и других материалов. Применяется для диагностики легионеллёза (болезнь легионеров) и лихорадки Понтиак.

Методика приготовления

Базовый раствор

Суспендируйте 35,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
Добавьте 2,4 г гранул KOH и перемешайте до растворения.
Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов среды.
Стерилизуйте в автоклаве при температуре (121 $\pm$ 3) °C в течение (15 $\pm$ 1) минут.
Охладите до 45–51 °C.
В асептических условиях добавьте содержимое двух флаконов Legi Growth Supplement w/o SS (Twin Pack) (FD041A, части A и B).
Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри, постоянно помешивая для равномерного распределения частиц угля.

Примечание: согласно стандарту рекомендуется использовать 2,8 г гранул гидроксида калия (KOH).

Варианты модификации среды

BCYE-cys (без L-цистеина): готовится аналогично BCYE, но добавляется только часть B добавки Legi Growth Supplement (FD041A).
BCYE+AB (с селективной добавкой): асептически добавьте содержимое одного флакона PCP Supplement (FD347).
BCYE+GVPC (с селективной добавкой): асептически добавьте содержимое двух флаконов GVPC Selective Supplement (FD143).
Модифицированный агар Видомски-Йи (MWY): асептически добавьте содержимое одного флакона MWY Selective Supplement (FD040) на каждые 100 мл среды.

Технические характеристики

Состав (BCYE Agar по ISO 11731), г/л:

Компонент	г/л
Дрожжевой экстракт (бактериологический grade)	10,000
Активированный уголь	2,000
$\alpha$ -кетоглутарат, монокалиевая соль	1,000
Буфер ACES	10,000
Агар	12,000
Гидроксид калия (KOH) (гранулы)	2,800
L-цистин гидрохлорид моногидрат	0,400
Пирофосфат железа (III)	0,250
Конечный pH (при 25 °C)	6,8 $\pm$ 0,2

Состав (BCYE Agar M8131):

Компонент	Количество
Дрожжевой экстракт	10,000 г/л
Активированный уголь	2,000 г/л
$\alpha$ -кетоглутарат, монокалиевая соль	1,000 г/л
Буфер ACES	10,000 г/л
Агар	12,000 г/л
Конечный pH (при 25 °C)	6,8 $\pm$ 0,2
Legi Growth Supplement FD041A w/o SS (Twin Pack)
Часть A: L-цистеин гидрохлорид	200 мг
Часть B: Пирофосфат железа, растворимый	125 мг
Дистиллированная вода	5 мл

Состав селективных добавок

Для BCYE+AB (PCP Supplement FD347)

Компоненты среды	Значение	Компоненты добавки PCP FD347	Значение
Полимиксин B сульфат	80 000 МЕ	Полимиксин B сульфат	80 000 МЕ
Цефазолин натрия	0,009	Цефазолин натрия	0,009
Пимарицин (натамицин)	0,070	Пимарицин (натамицин)	0,070

Для BCYE+GVPC (GVPC Selective Supplement FD143)

Компоненты среды	Значение	Компоненты добавки GVPC FD143	Значение
Глицин (без аммония)	3,000	Глицин	1,500 г
Ванкомицин гидрохлорид	0,001	Ванкомицин гидрохлорид	0,500 мг
Полимиксин B сульфат	80 000 МЕ	Полимиксин B сульфат	40 000 МЕ
Циклогексимид	0,080	Циклогексимид	40 мг

Для модифицированного агара Видомски-Йи (MWY Selective Supplement FD040)

Компоненты среды	Значение	Компоненты добавки MWY FD040	Значение
Полимиксин B сульфат	50 000 МЕ	Полимиксин B сульфат	25 000 МЕ
Глицин (без аммония)	3,000 г	Глицин	1,500 г
Анизомицин	0,080	Анизомицин	40 мг
Ванкомицин гидрохлорид	0,001	Ванкомицин	0,500 мг
Бромтимоловый синий	0,010	Бромтимоловый синий	5 мг
Бромкрезоловый пурпурный	0,010	Бромкрезоловый пурпурный	5 мг

Общие характеристики

Параметр	Значение
Происхождение	Без компонентов животного происхождения (микробный)
Тип продукта	Регулярный
Физическая форма	Порошок
Тип упаковки	ПНД (HDPE)

Внешний вид: серый или черный гомогенный свободнотекучий порошок.
Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,2% агаром.
Цвет и прозрачность готовой среды: серо-черный опалесцирующий гель.
Реакция (pH 3,5% водного раствора при 25 °C): 6,8 $\pm$ 0,2.
Диапазон pH: 6,60–7,00.

Контроль качества и интерпретация

Культуральные характеристики

Инкубация проводилась при 36 $\pm$ 2 °C в течение 2–5 дней (влажность атмосферы 90 %) с добавлением стерильного Legi Growth Supplement (FD041A).

Организм	Посевная доза (КОЕ)	Рост	Выход	Цвет колоний
Продуктивность
Legionella pneumophila ATCC 33152	50–100	обильный	$\ge$ 50 %	бело-серо-синие или пурпурные колонии с ровным краем, характерный вид «матового стекла»
Legionella pneumophila ATCC 33156	50–100	обильный	$\ge$ 50 %	бело-серо-синие или пурпурные колонии с ровным краем, характерный вид «матового стекла»
Legionella anisa ATCC 35292	50–100	обильный	$\ge$ 50 %	бело-серо-синие или пурпурные колонии с ровным краем (инкубация 5–10 дней)
Селективность
Enterococcus faecalis ATCC 29212	$\ge 10^4$	подавлен	0 %
Enterococcus faecalis ATCC 19433	$\ge 10^4$	подавлен	0 %
Escherichia coli ATCC 25922	50–100	отсутствует/слабый	$\le$ 10 %
Escherichia coli ATCC 8739	50–100	отсутствует/слабый	$\le$ 10 %
Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027	50–100	отсутствует/слабый	$\le$ 10 %
Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853	50–100	отсутствует/слабый	$\le$ 10 %

Условия эксплуатации и хранения

Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C.
Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
Особенности: продукт гигроскопичен, после вскрытия плотно закрывать бутылку для предотвращения образования комков.
Требования к безопасности: работа с культурами Legionella должна проводиться в защитном боксе (вытяжном шкафу) с использованием халатов, масок и перчаток.

Ограничения

Различные организмы могут иметь индивидуальные требования к росту и демонстрировать вариативные паттерны на данной среде.
Каждая партия протестирована на организмах, указанных в сертификате анализа (COA). Пользователю рекомендуется валидировать среду для специфических микроорганизмов согласно собственным требованиям.
Для окончательного подтверждения результатов необходимо проведение дополнительных биохимических тестов.

Утилизация

Загрязненные материалы и использованные среды должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией в соответствии с установленными лабораторными процедурами по обращению с инфекционными материалами.