HiMedia M813I-100G Буферный агар с активированным углем и дрожжевым экстрактом

Питательная среда HiMedia M813I-100G Буферный агар с активированным углем и дрожжевым экстрактом — порошковая основа буферного угольно-дрожжевого агара с активированным углём и дрожжевым экстрактом. Применяется для селективного выделения и культивирования видов Legionella из проб воды, включая воду из градирен, при хранении продукта при 10–30 °C.

Назначение и область применения

Среда предназначена для селективного выделения и культивирования видов Legionella из:

• воды из градирен;
• любых типов проб воды;
• других материалов.

Тип образца: пробы воды.

Состав и критерии эффективности среды соответствуют требованиям ISO 11731-1:2017 и ISO 11731-2:2017. Среда может применяться в микробиологических лабораториях для анализа воды и контроля санитарно-бактериологических параметров.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: M813I-100G
• Назначение изделия: агар
• Форма: порошок
• Масса: 100 г
• Тип продукта: стандартный
• Происхождение: без компонентов животного происхождения, микробиологическое
• Тип упаковки: HDPE (полиэтилен высокой плотности)
• Температура хранения продукта: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C

Состав среды

BCYE-агар по ISO 11731

BCYE-агар M8131

Селективные варианты культуральной среды

BCYE+AB с селективной добавкой

BCYE+GVPC с селективной добавкой

Агар Modified Widomski Yee (MWY)

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 35,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Добавьте 2,4 г гранул KOH и перемешайте до растворения.
3. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
4. Стерилизуйте в автоклаве при температуре (121 ± 3) °C в течение (15 ± 1) мин.
5. Охладите среду до 45–51 °C.
6. В асептических условиях добавьте стерильное восстановленное содержимое по одному флакону части A и части B из двух комплектов добавки для роста Legionella без SS, двойная упаковка, FD041A.
7. Тщательно перемешайте.
8. Разлейте среду в стерильные чашки Петри при постоянном перемешивании, чтобы частицы активированного угля распределились равномерно.

Согласно стандарту рекомендуется использовать 2,8 г гранул гидроксида калия.

Приготовление вариантов среды

BCYE без L-цистеина (BCYE-cys)

Приготовьте среду по составу BCYE-агара и в асептических условиях добавьте содержимое двух флаконов добавки для роста Legionella без SS, двойная упаковка FD041A, используя только часть B.

BCYE+AB с селективной добавкой

В асептических условиях добавьте восстановленное содержимое одного флакона добавки PCP FD347.

BCYE+GVPC с селективной добавкой

В асептических условиях добавьте восстановленное содержимое двух флаконов селективной добавки GVPC FD143.

Агар Modified Widomski Yee (MWY)

В асептических условиях добавьте восстановленное содержимое одного флакона селективной добавки MWY FD040 на 100 мл среды.

Принцип действия и интерпретация

Агар с угольным и дрожжевым экстрактом CYE первоначально разработан Feeley и соавторами как модификация среды F-G. В состав среды F-G входили крахмал и триптон; они были заменены на активированный уголь и дрожжевой экстракт соответственно, что обеспечило лучшее выделение Legionella pneumophila. Позднее было установлено, что добавление буфера ACES к угольно-дрожжевому агару улучшает характеристики среды. Дополнительное введение α-кетоглутарата повысило чувствительность среды. Основа буферного угольно-дрожжевого агара соответствует требованиям ISO 11731-2.

Виды Legionella представляют собой не образующие спор узкие грамотрицательные палочки. Legionella вызывает пневмонию, включая болезнь легионеров, а также лёгкое лихорадочное заболевание, известное как лихорадка Понтиак. Бактерии не окисляют и не ферментируют углеводы в обычных питательных средах и не растут на кровяном агаре овцы. На буферном угольно-дрожжевом агаре рост происходит значительно лучше и быстрее.

Аминокислоты являются основными источниками энергии для Legionella. L-цистин необходим для роста Legionella и играет важную роль в метаболизме роста. L-цистин и пирофосфат железа способствуют росту Legionella.

Функции компонентов среды:

• активированный уголь действует как детоксицирующий компонент;
• дрожжевой экстракт служит источником витаминов, азота и углерода;
• буфер ACES поддерживает оптимальный pH для роста;
• L-цистин гидрохлорид, пирофосфат железа(III) и α-кетоглутарат стимулируют рост видов Legionella.

Для селективного выделения можно применять антибиотические добавки, подавляющие сопутствующую микрофлору:

• добавка PCP FD347 содержит полимиксин B, цефазолин нат