Основа забуференного угольного агара с дрожжевым экстрактом HiMedia M813-500G (уп/500 гр)

Элективная основа забуференного угольного агара с дрожжевым экстрактом HiMedia M813-500G для селективного выделения и культивирования видов Legionella. Применяется для анализа проб воды из градирен (охладительных башен), клинического материала и других образцов; содержит активированный уголь в качестве детоксиканта.

Принцип измерения

Среда разработана на основе модификации Эдельштейна (Edelstein), которая базируется на угольном дрожжевом экстракте (CYE) с добавлением буфера ACES и альфа-кетоглутарата для повышения чувствительности и эффективности восстановления Legionella pneumophila.

Основные компоненты и их функции:

• Активированный уголь: выступает в роли детоксиканта.
• Дрожжевой экстракт: служит богатым источником витаминов, азота и углерода.
• Буфер ACES: поддерживает оптимальный уровень pH для роста микроорганизмов.
• L-цистин, пирофосфат железа и $\alpha$-кетоглутарат: стимулируют рост видов Legionella.
• Аминокислоты: являются основным источником энергии для легионелл, при этом L-цистин является абсолютным требованием для их метаболизма.

Виды Legionella представляют собой узкие грамотрицательные палочки, не образующие спор. Они не окисляют и не ферментируют углеводы в обычных средах и не растут на агаре с кровью барана, однако демонстрируют быстрый и обильный рост на забуференном угольном агаре с дрожжевым экстрактом.

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Суспендируйте 20,0 г порошка в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Добавьте 2,4 г гранул KOH и перемешайте до растворения.
3. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов среды.
4. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx 0,07$ МПа / 15 lbs) в течение 15 минут.
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. Асептически добавьте содержимое по одной ампуле стерильных регидратированных добавок: селективной добавки MWY (FD040) и добавки для роста Legi Growth Supplement w/o SS (Twin Pack) (FD041A).
7. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри при постоянном перемешивании, чтобы частицы угля распределились равномерно.

Дополнительная селективность

Для усиления селективности в расплавленную среду по выбору могут быть добавлены:

• Селективная добавка VCAT (FD017);
• Селективная добавка C3V (FD037);
• Селективная добавка PGV (FD038).

Технические характеристики

Состав (г/л)

Общие параметры

Культуральные характеристики

Характеристики определены при инкубации в атмосфере с влажностью 90 % при температуре 35–37 °C в течение 3–4 суток с добавлением селективной добавки MWY (FD040) и добавки для роста Legi Growth Supplement w/o SS (Twin Pack) (FD041A).

* — соответствующие номера WDCM.

Область применения и работа с образцами

Типы образцов

• Клинические образцы: моча.
• Пробы воды.

Сбор и обработка

• Для клинических образцов: следуйте установленным руководствам по обращению с биоматериалом.
• Для проб воды: используйте методы сбора и обработки в соответствии с местными стандартами и руководствами.
• Все контаминированные материалы перед утилизацией должны быть стерилизованы в автоклаве.

Ограничения и меры предосторожности

• Среда предназначена для диагностики in vitro и профессионального использования.
• Требуется дальнейшее биохимическое подтверждение для окончательной идентификации возбудителя.
• При работе с культурами Legionella обязательно использование халатов, масок, перчаток и работа в вытяжном шкафу (биологическом боксе).

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C. Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание комкования. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Утилизация: автоклавирование и/или сжигание использованных препаратов.

Комплект поставки и совместимость

Основа поставляется в упаковке 500 г. Для полноценного использования среды требуются следующие добавки (поставляются по заявке):

• FD040 Legionella Selective Supplement IV (MWY) / Селективная добавка для легионелл-IV
• FD041 Legionella Supplement / Добавка для легионелл (включая вариант FD041A Legi Growth Supplement w/o SS)
• Сертификат: ФСЗ 2009/03707