Основа агара для выделения легионелл HiMedia M809A-500G (уп/500 гр)

Специальная питательная среда — основа агара для выделения легионелл HiMedia M809A-500G (уп/500 гр) — представляет собой сухой порошок с содержанием активированного угля 2,00 г/л, дрожжевого экстракта 10,00 г/л и агара 13,00 г/л. HiMedia M809A-500G применяют с добавками для культивирования видов Legionella из проб воды; готовая среда имеет конечное значение pH 6,9 ± 0,2 при 25 °C.

Назначение и область применения

Основа агара HiMedia M809A-500G используется с дополнительными компонентами для культивирования видов Legionella и их селективного выделения из проб воды.

• Тип питательной среды: специальная
• Назначение изделия: основа
• Тип образца: пробы воды
• Регистрационное удостоверение: ФСЗ 2009/03709
• Методические документы: МУК 4.2.2217-07
• Производитель: HiMedia
• Форма выпуска: сухой порошок
• Масса упаковки: 500 г

Угольно-дрожжевая агаровая среда применяется со специальными добавками для селективного выделения Legionella spp. Основа выпускается также в упаковке 100 г (M809A-100G) и в гранулированной форме (GM809-100G и GM809A-500G).

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация

Среда Legionella Agar первоначально называлась F-G agar. Feely и соавторы модифицировали её, заменив крахмал активированным углём, а гидролизат казеина — дрожжевым экстрактом, что улучшило восстановление Legionella pneumophila.

Добавление буфера ACES — N-2-ацетамидо-2-аминоэтансульфоновой кислоты — повышает питательную ценность среды и помогает поддерживать значение pH в диапазоне, оптимальном для роста Legionella. Добавление α-кетоглутарата повышает чувствительность среды.

Назначение компонентов:

• Дрожжевой экстракт обеспечивает необходимые азотистые питательные вещества для роста Legionella.
• Активированный уголь нейтрализует токсичные соединения, которые накапливаются в среде в процессе роста или образуются при стерилизации.
• Буфер ACES поддерживает требуемое значение pH для оптимального роста Legionella.
• Антибиотики в составе селективных добавок подавляют рост различных сопутствующих бактерий и грибов.
• Виды Legionella имеют абсолютную пищевую потребность в L-цистеине.
• Специфическую потребность Legionella в L-цистеине обеспечивает добавка FD142.
• α-кетоглутарат входит в состав добавок FD142 и FD206.

Предположительные колонии Legionella можно пересевать на Legionella Agar Base с добавкой FD142 и на Legionella Agar Base с добавкой FD206 — среду без L-цистеина. Все чашки инкубируют при 35 °C. Колонии, растущие на Legionella Agar Base с FD142 и L-цистеином, но не растущие на Legionella Agar Base с FD206 без L-цистеина, могут рассматриваться как предположительно относящиеся к видам Legionella.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 12,5 г основы в 440 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (ориентировочно 0,103 МПа) при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте содержимое одного флакона добавки для роста Legionella Growth Supplement (BCYE) (FD142).
6. Если добавка Legionella (GVPC) Selective Supplement (FD143) не используется, асептически добавьте 10 мл стерильной дистиллированной воды, чтобы довести общий объём среды до 500 мл.
7. Конечное значение pH приготовленной среды должно составлять 6,9 ± 0,2.
8. Тщательно перемешайте среду и разлейте по стерильным чашкам Петри.
9. Во время разливки перемешивайте среду, чтобы предотвратить оседание частиц активированного угля.
10. Для получения селективной среды асептически добавьте к 440 мл стерильной расплавленной и охлаждённой Legionella Agar Base регидратированное содержимое одного флакона Legionella BMPA Selective Supplement (FD144) или одного флакона Legionella (GVPC) Selective Supplement (FD143), а также содержимое одного флакона Legionella Growth Supplement (BCYE) (FD142).
11. Одновременно может быть приготовлена среда без L-цистеина: для этого асептически добавьте содержимое одного флакона Legionella Growth Supplement w/o L-Cysteine (FD206).

Технические характеристики

Физические свойства и контроль качества

• Внешний вид сухой среды: однородный сыпучий порошок серого или чёрного цвета
• Физическая форма: порошок
• Цвет и прозрачность готовой среды: чёрный непрозрачный гель в чашках Петри
• Гелеобразование: плотное; соответствует 1,3%-ному агарозному гелю
• Конечное значение pH при 25 °C: 6,9 ± 0,2
• Диапазон pH: 6,70–7,10
• Реакция: реакция 2,5%-ного водного раствора по массе/объёму после добавления Legionella Growth Supplement (FD142) при 25 °C
• Опалесценция готовой среды: присутствует
• Плотность геля: соответствует 1,3%-ному агарозному гелю
• Тип упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE)
• Происхождение компонентов: без компонентов животного происхождения, микробиологическое происхождение
• Тип продукта: стандартный

Готовая среда имеет чёрный цвет, непрозрачна и опалесцирует.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 48–72 ч с добавлением стерильной Legionella Growth Supplement (BCYE) (FD142) и Legionella (GVPC) Selective Supplement (FD143) либо Legionella Growth Supplement без L-цистеина (FD206).

* Соответствующие номера WDCM.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для проб воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов в соответствии с руководствами и местными стандартами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открытием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности, установленные действующими руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Некоторые штаммы могут демонстрировать слабый рост из-за различий в пищевых потребностях.

Оценка рабочих характеристик

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении и использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Условия хранения и срок годности

• Условия хранения сухого порошка: от 10 до 30 °C, в плотно закрытом контейнере
• Условия хранения приготовленной среды: 2–8 °C
• Требования после вскрытия: хранить в сухом виде, плотно закрывая флакон после каждого использования
• Защита при хранении: сухое проветриваемое помещение, защита от экстремальных температур и источников воспламенения
• Срок использования: до даты, указанной на этикетке

Гигроскопичность продукта может привести к образованию комков. Неправильное хранение также может вызвать комкование. После использования контейнер необходимо плотно закрывать. Рабочие характеристики сохраняются при использовании в пределах установленного срока годности.

Оригинальная упаковка представляет собой непрозрачный влагостойкий пластиковый флакон с навинчивающейся крышкой и внутренней крышкой; дополнительное укупоривание не требуется. Этикетка нанесена на русском языке и содержит инструкцию по применению, условия хранения и дату окончания срока годности. Продукт зарегистрирован в Росздравнадзоре Российской Федерации.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

Инфекционные материалы следует утилизировать в соответствии с установленными лабораторными процедурами. Материалы, контактировавшие с образцом, необходимо обеззараживать и утилизировать согласно действующим лабораторным методикам.

Сравнительный контекст

В отличие от основы без специальных добавок, приготовленная Legionella Agar Base может использоваться как неселективная или селективная среда в зависимости от добавления FD142, FD143, FD144 или FD206; FD206 позволяет проводить контроль роста без L-цистеина.

Спецификация производителя