Основа агара для выделения легионелл HiMedia M809-500G (уп/500 гр)

Питательная среда Основа агара для выделения легионелл HiMedia M809-500G (уп/500 гр) — элективная основа с конечным pH 6,9 ± 0,2. Используется для культивирования видов Legionella из проб воды и клинического материала после добавления специализированных добавок; некоторые штаммы могут демонстрировать слабый рост из-за вариабельных условий питания.

Назначение

Основа агара применяется для культивирования видов Legionella с добавлением специализированных добавок. Тип образца — пробы воды.

Изделие зарегистрировано как медицинское изделие: ФСЗ 2009/03709.

Принцип действия и интерпретация результатов

Legionella — грамотрицательная бактерия, являющаяся возбудителем болезни легионеров. Природными источниками Legionella служат пресноводные пруды и ручьи. Передача человеку происходит при вдыхании аэрозолей из градирен, систем горячего водоснабжения или фонтанов, содержащих бактерии.

Агар для Legionella, первоначально называвшийся агаром F-G, был модифицирован Feely и соавторами заменой крахмала на активированный уголь, а гидролизата казеина — на дрожжевой экстракт. Эти изменения улучшили выделение Legionella pneumophila. Pasculle и соавторы сообщили, что добавление буфера ACES — N-(2-ацетамидо-2-аминоэтансульфоновой кислоты) — повышает питательную ценность среды. Edelstein предложил добавлять альфа-кетоглутарат для повышения чувствительности среды.

Основа агара для выделения легионелл содержит:

• дрожжевой экстракт — источник необходимых азотистых питательных веществ для роста Legionella;
• альфа-кетоглутарат — компонент, удовлетворяющий специфические пищевые потребности видов Legionella;
• активированный уголь — нейтрализует токсичные соединения, которые могут накапливаться в среде во время роста или образовываться при стерилизации;
• буфер ACES — поддерживает необходимый pH среды для оптимального роста Legionella;
• антибиотики в составе добавок — подавляют рост различных контаминирующих бактерий и грибов.

Состав

Состав на 1 л:

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия параметрам рабочих характеристик.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 18,5 г основы в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
3. Не нагревайте среду до стерилизации.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте восстановленное содержимое одного флакона ростовой добавки для легионелл Legionella Growth Supplement (FD016A) или добавки для легионелл Legionella Supplement (FD041A), а также селективной добавки для легионелл Legionella Selective Supplement (FD017).
6. Тщательно перемешайте среду и разлейте её в стерильные чашки Петри.
7. Во время разливки перемешивайте среду, чтобы предотвратить оседание частиц активированного угля.

Методика выделения легионелл из клинических образцов

1. Гомогенизируйте образцы в стерильной дистиллированной воде.
2. Исследуйте образцы микроскопически на наличие Legionella методом флуоресцирующих антител (FA).
3. Засейте культуры, положительные по результатам метода FA, на основу агара для легионелл.
4. Инкубируйте чашки при 35 °C в атмосфере с относительной влажностью 90 %.
5. Рост обычно появляется через 2–3 суток.
6. Продолжайте ежедневно исследовать чашки в течение 14 суток перед их утилизацией.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления ростовой добавки для легионелл (FD016A) либо селективной добавки для легионелл (FD017) и добавки для легионелл (FD041A), после инкубации при 35–37 °C в течение 48–72 ч.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от серого до чёрного цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,7%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется непрозрачный гель чёрного цвета.

Реакция

Реакцию определяют для водного раствора с концентрацией 3,7 % мас./об. при 25 °C.

• pH: 6,9 ± 0,2.

Диапазон pH

• pH: 6,70–7,10.

Ограничения применения

Некоторые штаммы могут демонстрировать слабый рост вследствие вариабельных условий питания.

Оценка рабочих характеристик

Рабочие характеристики среды ожидаются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения нераскрытой основы: 10–30 °C.
• Условия хранения: плотно закрытая ёмкость.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия: хранить продукт в сухом виде с плотно закрытой крышкой.
• Требование к месту хранения: сухое вентилируемое помещение, защищённое от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования ёмкость необходимо плотно закрывать.

Продукт обладает гигроскопичностью. Нарушение условий хранения может привести к образованию комков. Для сохранения рабочих характеристик рекомендуется использовать продукт в течение указанного срока годности.

Сбор и обращение с образцами

Для проб воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов в соответствии с действующими руководствами и местными нормативными требованиями.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры предосторожности

• Перед открыванием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при обращении с образцами и культурами.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности, установленные действующими руководствами.
• Требования безопасности могут быть уточнены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцом, необходимо обеззараживать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Технические характеристики

Комплект поставки и совместимые добавки

По заявке поставляются:

• FD016 — ростовая добавка для легионелл;
• FD017 — селективная добавка для легионелл;
• FD041 — добавка для легионелл.

В рабочей методике производителя указаны варианты FD016A и FD041A для добавления после восстановления; селективная добавка FD017 добавляется совместно с одним из этих компонентов.

Техническое отличие методики

В модифицированной основе агара F-G крахмал заменён активированным углём, а гидролизат казеина — дрожжевым экстрактом; в состав также введены буфер ACES и альфа-кетоглутарат для поддержания питательных и буферных свойств среды.