Основа агара для выделения легионелл HiMedia M809-100G (уп/100 гр)

Основа питательной среды для выделения легионелл HiMedia M809-100G (уп/100 гр) производства HiMedia с конечным pH 6,9±0,2. HiMedia M809-100G применяют для культивирования видов Legionella из проб воды и клинического материала после добавления ростовой и селективной добавок.

Назначение и тип среды

HiMedia M809-100G предназначена для приготовления агара для выделения видов Legionella с использованием дополнительных компонентов.

• Тип питательной среды: элективный
• Назначение изделия: основа
• Сертификат: ФСЗ 2009/03709
• Тип продукта: стандартный
• Физическая форма: порошок
• Тип упаковки: ПЭВП (полиэтилен высокой плотности)
• Происхождение компонентов: без компонентов животного происхождения, микробиальное

Для приготовления готовой среды используются добавки:

• FD016 — ростовая добавка для легионелл; в методике производителя указана форма FD016A
• FD017 — селективная добавка для легионелл
• FD041 — добавка для легионелл; в методике производителя указана форма FD041A

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 18,5 г порошка в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов, что соответствует приблизительно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
3. Не нагревайте среду перед стерилизацией.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте регидратированное содержимое одного флакона ростовой добавки для легионелл FD016A или добавки для легионелл FD041A, а также селективную добавку для легионелл FD017.
6. Тщательно перемешайте среду и разлейте в стерильные чашки Петри.
7. Во время разливки перемешивайте среду, чтобы предотвратить оседание частиц активированного угля.

Принцип действия и интерпретация

Legionella — грамотрицательная бактерия, являющаяся возбудителем болезни легионеров. Естественные источники Legionella — пресноводные пруды и ручьи. Передача человеку происходит при вдыхании аэрозолей из градирен, систем горячего водоснабжения или фонтанов, содержащих бактерии.

Агар для легионелл, первоначально называвшийся F-G-агаром, был модифицирован Feely и соавторами: крахмал заменили активированным углём, а гидролизат казеина — дрожжевым экстрактом, что улучшило выделение Legionella pneumophila. Pasculle и соавторы сообщили, что добавление буфера ACES улучшает питательную ценность среды. Буфер ACES представляет собой N-2-ацетамидо-2-аминоэтансульфоновую кислоту. Edelstein предложил добавлять α-кетоглутарат для повышения чувствительности среды.

Основа агара для легионелл содержит следующие функциональные компоненты:

• дрожжевой экстракт — источник необходимых азотистых питательных веществ для роста Legionella;
• α-кетоглутарат — обеспечивает специфические пищевые потребности видов Legionella;
• активированный уголь — нейтрализует токсичные соединения, которые могут накапливаться в среде во время роста или образовываться при стерилизации;
• буфер ACES — поддерживает оптимальное значение pH для роста Legionella;
• антибиотики в составе добавок — подавляют рост различных загрязняющих бактерий и грибов.

Методика выделения из клинических образцов

Для выделения видов Legionella из клинических образцов:

1. Гомогенизируйте образцы в стерильной дистиллированной воде.
2. Исследуйте образцы микроскопически на наличие Legionella методом флуоресцирующих антител (ФА).
3. Засейте культуры с положительным результатом ФА на основу агара для легионелл.
4. Инкубируйте чашки при 35 °C в атмосфере с относительной влажностью 90 %.
5. Рост обычно появляется через 2–3 сут.
6. Продолжайте ежедневно исследовать чашки в течение 14 сут перед их утилизацией.

Тип образца

• Пробы воды
• Клинические образцы — при применении методики выделения Legionella из клинического материала

Отбор и обращение с образцами

Для проб воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов в соответствии с руководствами и местными нормативными требованиями. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать в автоклаве перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открытием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте надлежащие правила работы в микробиологической лаборатории.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности, установленные действующими руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Некоторые штаммы могут демонстрировать слабый рост из-за различий в пищевых условиях.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от серого до чёрного цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,7%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется непрозрачный гель чёрного цвета.

Реакция

Реакция 3,7%-ного водного раствора при 25 °C: pH 6,9±0,2.

Значение pH

pH: 6,70–7,10.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления ростовой добавки для легионелл FD016A, либо селективной добавки для легионелл FD017 и добавки для легионелл FD041A, после инкубации при 35–37 °C в течение 48–72 ч.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C
• Условия хранения сухого продукта: плотно закрытый контейнер
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке

После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде, чтобы предотвратить образование комков вследствие гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к комкованию продукта. Храните среду в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После каждого использования плотно закрывайте контейнер. Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение установленного срока годности.

Ожидаемые рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды ожидаются при применении в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию