HiMedia M805-100G Основа агара с желчью и эскулином для Bacteroides

Сухая питательная среда HiMedia M805-100G Основа агара с желчью и эскулином для Bacteroides производства HiMedia в форме порошка массой 100 г. Применяется для селективного выделения, предварительной идентификации и культивирования группы Bacteroides fragilis из клинических образцов; среда высокоселективна, поэтому параллельно используют неселективную среду.

Назначение

Среда рекомендована для селективного выделения, предварительной идентификации и культивирования группы Bacteroides fragilis. Тип образцов: клинический материал — гной, образцы из ран и язв.

Состав

Состав рассчитан на приготовление 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация

Bacteroides — наиболее распространённый представитель нормальной кишечной микрофлоры. При нарушении нормального слизистого барьера желудочно-кишечного тракта эти микроорганизмы могут вызывать тяжёлые инфекции; при попадании в кровоток они способны распространяться практически в любой орган.

Группа Bacteroides fragilis более устойчива к антимикробным препаратам, чем большинство других анаэробов. Среда, разработанная Livingston, Kominos и Yee, используется как первичная среда для селективного выделения и предварительной идентификации группы Bacteroides fragilis.

Селективность обеспечивается следующими компонентами:

• бычья желчь подавляет почти все анаэробные грамотрицательные палочки, за исключением Bacteroides fragilis;
• гентамицин, вносимый в виде селективной добавки, подавляет большинство микроорганизмов, кроме устойчивых к желчи эскулин-положительных Bacteroides;
• для микроорганизмов группы Bacteroides fragilis требуется минимальная ингибирующая концентрация гентамицина 80 мкг/мл или выше.

Дифференциальное выявление группы Bacteroides fragilis основано на гидролизе эскулина. B. fragilis гидролизует содержащийся в среде эскулин с образованием эскулетина и декстрозы. Образовавшийся эскулетин реагирует с цитратом аммония железа с формированием коричнево-чёрного комплекса, который осаждается вокруг колоний и образует чёрный ореол.

Питательную основу среды составляют триптон и соевый пептон, являющиеся источниками азота и углерода, аминокислот с длинной цепью, витаминов и других необходимых питательных веществ. Гемин поддерживает рост требовательных анаэробных бактерий, включая виды Bacteroides.

Среду можно непосредственно инокулировать исследуемым образцом. Из-за высокой селективности одновременно с этой средой следует инокулировать неселективную среду.

Группа B. fragilis хорошо растёт на этой среде. B. vulgatus обычно не гидролизует эскулин, поэтому окрашивания окружающей среды не происходит.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 61,52 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения и полностью растворите среду.
3. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 121 °C в течение 15 мин; давление при стерилизации — 15 фунтов, ориентировочно ≈0,10 МПа.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте восстановленное содержимое двух флаконов селективной добавки I (FD062).
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Сбор и обработка образцов

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с материалом в соответствии с установленными лабораторными руководствами.

Загрязнённые материалы после использования необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального использования.
• Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при работе с образцами и культурами.
• При обращении с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Правила безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Для полной идентификации колоний чистых культур требуется проведение дополнительных биохимических исследований.
2. Среда обладает высокой селективностью, поэтому параллельно с ней необходимо инокулировать неселективную среду.

Технические характеристики

• Назначение изделия: агар
• Масса: 100 г
• Температура хранения: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C
• Конечный pH при 25 °C: 7,0 ± 0,2
• pH: 6,80–7,20

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с гелем 1,5%-ного агара.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель янтарного цвета с голубоватым оттенком.

Реакция

Реакция 6,15%-ного водного раствора по массе к объёму при 25 °C: pH 7,0 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики получены при добавлении селективной добавки I (FD062) после анаэробной инкубации при 35–37 °C в течение 40–48 ч.

Обозначения:

• * — соответствующие номера WDCM.
• ^ — ранее известен как Bacteroides vulgatus.

Ожидаемые рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении и применении согласно инструкции на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Хранение и срок годности

• Храните порошок при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Приготовленную среду храните при температуре 20–30 °C.
• Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывайте контейнер.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в пределах установленного срока годности.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты необходимо безопасно утилизировать автоклавированием и/или сжиганием.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте утверждённые лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.