Основа модифицированной среды Тайера-Мартина HiMedia M795-500G (уп/500 гр)

Основа питательной среды Основа модифицированной среды Тайера-Мартина HiMedia M795-500G (уп/500 гр) производства HiMedia — порошковая основа для приготовления селективной среды с конечным pH 7,4 ± 0,2. Изделие предназначено для селективного выделения и подсчёта видов Neisseria, особенно Neisseria gonorrhoeae, из клинических образцов; некоторые штаммы Neisseria могут не расти в присутствии антибиотиков.

Назначение

Основа модифицированной среды Тайера-Мартина предназначена для селективного выделения и количественного определения видов Neisseria, особенно Neisseria gonorrhoeae. Среда применяется при исследовании мазков из зева, влагалищных выделений, прямой кишки и уретры, включая образцы со смешанной микрофлорой.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с рабочими характеристиками среды.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 51,5 г порошка в 900 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Разлейте среду во флаконы порциями по 90 мл.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа) при 121 °C в течение 15 мин.
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. В асептических условиях добавьте следующие стерильные растворы:
   1. 20 мл крови, лизированной нагреванием при 55–56 °C в течение 1 ч, на 90 мл среды.
   2. Раствор антибиотиков до конечной концентрации 3 мкг ванкомицина на 1 мл среды и 7,5 мкг колистина метансульфата на 1 мл среды.

Принцип действия и интерпретация

Лабораторная диагностика гонореи основана на выявлении внутриклеточных диплококков в мазках, а также на выделении и идентификации Neisseria gonorrhoeae с помощью культуральных методов.

Для выделения Gonococcus применялось множество сложных питательных сред, однако среда, предложенная Тайером и Мартином, позволяет получать выраженный рост целевых микроорганизмов. Исходная формула представляла собой обогащённый шоколадный агар с антибиотиками ристоцетином и полимиксином B и рекомендовалась для выделения N.gonorrhoeae и N.meningitidis. При этом исходная среда подавляла рост других видов Neisseria, а также Pseudomonas и Proteus. Тайер и Мартин сообщили об успешном применении ванкомицина, колистина метансульфата и нистатина. Такая комбинация обеспечивала рост N.gonorrhoeae и подавляла рост стафилококков и сапрофитных видов Neisseria.

Карпентер и Мортон описали улучшенную среду для выделения гонококков в течение 24 ч. Позднее была продемонстрирована эффективность GC-среды, дополненной гемоглобином и концентратом дрожжевого экстракта, для выделения гонококков. Впоследствии среда Тайера-Мартина была разработана для первичного выделения N.gonorrhoeae и N.meningitidis из образцов со смешанной микрофлорой, полученных из зева, влагалища, прямой кишки и уретры.

Тайер и Мартин использовали ванкомицин, колистин и нистатин. Мартин и Лестер добавили антибиотик триметоприм для повышения селективности среды. Основа модифицированной среды Тайера-Мартина применяется для селективного выделения и подсчёта патогенных видов Neisseria, особенно N.gonorrhoeae. В 1947 году Карпентер и Мортон сообщили об улучшенной среде для выделения Gonococcus в течение 24 ч.

Пептон обеспечивает микроорганизмы питательными веществами. Крахмал нейтрализует токсичные жирные кислоты, если они присутствуют в агаре. Добавление лизированной после нагревания крови обеспечивает поступление витаминов, аминокислот, коферментов и других компонентов, стимулирующих рост патогенных видов Neisseria. Ванкомицин и колистин метансульфат подавляют грамположительные и грамотрицательные бактерии соответственно.

Некоторые штаммы видов Capnocytophaga могут расти на этой среде при посеве образцов из ротоглотки. Основа модифицированной среды Тайера-Мартина с добавлением шоколадного агара и антибиотиков снижает перерастание гонококков и менингококков контаминирующими микроорганизмами, подавляет рост сапрофитных видов Neisseria и стимулирует рост патогенных видов Neisseria.

Для успешного выделения гонококков необходима высокая влажность. Все предположительно относящиеся к Neisseria изоляты следует подтверждать с помощью тестов на ферментацию углеводов и серологических тестов. Некоторые штаммы Neisseria могут не расти в присутствии антибиотиков.

Типы образцов

• Мазок из зева.
• Влагалищные выделения.
• Мазок из прямой кишки.
• Мазок из уретры.

Сбор и обращение с образцами

При работе с клиническими образцами необходимо применять соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными лабораторными правилами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными правилами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 2,0%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Основная среда: прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-янтарного цвета.
• После добавления стерильной лизированной крови и добавок: в чашках Петри образуется непрозрачный гель шоколадного цвета.

Реакция

Реакция 5,15%-ного водного раствора при 25 °C: pH 7,4 ± 0,2.

pH

pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после добавления крови с последующим нагреванием и раствора антибиотиков — 3 мкг ванкомицина и 1,5 мкг колистина метансульфата на 1 мл среды — после инкубации при 35–37 °C в течение 40–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.
• Условия хранения сухой среды: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты истечения срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в