HiMedia M748-100G Модифицированная основа среды Эдвардса

Питательная среда HiMedia M748-100G Модифицированная основа среды Эдвардса производства HiMedia предназначена для селективного и быстрого выделения Streptococcus agalactiae и других стрептококков, связанных с маститом крупного рогатого скота. Основа поставляется в виде порошка массой 100 г, используется после растворения, автоклавирования и добавления 5–7 % стерильной дефибринированной крови овцы и предназначена только для профессиональной диагностики in vitro.

Назначение

Среда рекомендована для селективного и быстрого выделения Streptococcus agalactiae и других стрептококков, связанных с маститом крупного рогатого скота.

Тип образцов:

• клинические образцы: фекалии, вагинальные мазки;
• молочные образцы.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

HM-пептон B эквивалентен мясному экстракту.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 41,33 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при 115 °C в течение 20 мин. Обозначение A соответствует давлению 10 фунтов, приблизительно 0,069 МПа.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 5–7 % по объёму стерильной крови овцы.
6. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Для молочных образцов центрифугированную пробу молока непосредственно засевают на поверхность чашки со средой. Организмы S. agalactiae, отрицательные по эскулину и образующие колонии от синих до бесцветных, дополнительно пересеивают для проведения идентификационных тестов.

Принцип действия и интерпретация

Стрептококки — грамположительные факультативно-анаэробные бактерии, входящие в состав нормальной сопутствующей микрофлоры ротовой полости, кожи, кишечника и верхних дыхательных путей человека. Стрептококки группы B являются значимой причиной системных инфекций у младенцев и в отдельных случаях — бактериального эндокардита.

Мастит — заболевание крупного рогатого скота, вызываемое микроорганизмами Streptococcus agalactiae. Streptococcus agalactiae относится к стрептококкам группы B по классификации Лэнсфилда.

Наиболее распространённые селективные агенты для выделения стрептококков — кристаллический фиолетовый и соли таллия. Среду с кристаллическим фиолетовым применяли для выделения кожных стрептококков. Позднее было установлено, что стрептококки из молока способны расти на кровяном агаре с генциановым фиолетовым, тогда как другие сапрофитные бактерии молока на этой среде подавляются. Для выделения возбудителя мастита применяли кровяной агар с эскулином и кристаллическим фиолетовым. Для той же цели использовали аналогичную среду, содержащую ацетат таллия.

Функции компонентов среды:

• пептон и HM-пептон B служат источниками углерода, азота и других необходимых питательных веществ;
• эскулин позволяет дифференцировать эскулин-положительные организмы группы D от эскулин-отрицательных организмов, включая S. agalactiae;
• хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие среды;
• кристаллический фиолетовый и сульфат таллия(I) действуют как селективные агенты для стрептококков;
• добавление крови обеспечивает дополнительные питательные вещества и служит индикатором гемолиза.

Стрептококки, вызывающие мастит, демонстрируют α-, β- или γ-гемолиз. Эскулин дифференцирует эскулин-положительные стрептококки группы D, образующие чёрные колонии, и эскулин-отрицательные Streptococcus agalactiae, образующие синие или бесцветные колонии.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• базовая среда: прозрачный или слегка опалесцирующий гель янтарного цвета;
• после добавления 5–7 % по объёму стерильной дефибринированной крови овцы: в чашках Петри образуется непрозрачный гель вишнёво-красного цвета.

Реакция

Реакция 4,13%-ного водного раствора по массе к объёму при 25 °C: pH 7,4 ± 0,2.

pH

pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления 5–7 % по объёму стерильной дефибринированной крови овцы и инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч.

Звёздочкой отмечены соответствующие номера WDCM.

Сбор и обращение с образцами

Для клинических образцов используйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным