HiMedia M748-100G Модифицированная основа среды Эдвардса

Модифицированная основа среды Эдвардса HiMedia M748-100G предназначена для селективного и быстрого выделения Streptococcus agalactiae и других стрептококков, вызывающих мастит крупного рогатого скота. Среда используется для анализа молочных и клинических проб; вес упаковки составляет 100 г.

Принцип измерения и интерпретация

Стрептококки представляют собой грамположительные факультативно анаэробные бактерии. Мастит у крупного рогатого скота вызывается микроорганизмами Streptococcus agalactiae, относящимися к группе B по классификации Лансфилда.

Для селективного выделения стрептококков используются кристаллическое фиолетовое и соли таллия, которые подавляют рост большинства сапрофитной микрофлоры молока.

• Пептон и HM пептон B (эквивалент мясного экстракта) служат источниками углерода, азота и других необходимых питательных веществ.
• Эскулин позволяет дифференцировать эскулин-положительные организмы (стрептококки группы D), которые образуют чёрные колонии, от эскулин-отрицательных (S. agalactiae), которые образуют голубые или бесцветные колонии.
• Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс среды.
• Кристаллическое фиолетовое и сульфат таллия выступают в роли селективных агентов.
• Добавление крови обеспечивает дополнительные питательные вещества и служит индикатором гемолиза (маститные стрептококки проявляют альфа-, бета- или гамма-гемолиз).

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Суспендируйте 41,33 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 115 °C (давление $\approx$ 0,07 МПа) в течение 20 минут.
4. Охладите до 45–50 °C и асептически добавьте 5–7 % (об/об) стерильной крови овцы.
5. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри.

Процедура анализа

Центрифугированный образец молока инокулируют непосредственно на поверхность среды. Эскулин-отрицательные (голубые или бесцветные) колонии S. agalactiae подвергают дальнейшему субкультивированию для проведения идентификационных тестов.

Область применения

• Молочные пробы: диагностика мастита у КРС.
• Клинические образцы: анализ фекалий, вагинальных мазков.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Общие параметры

• Происхождение компонентов: животное
• Тип продукта: стандартный
• Физическая форма: порошок
• Материал упаковки: ПНД (HDPE)
• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до жёлтого цвета
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,5 % раствором агара
• Цвет и прозрачность основы: янтарный, прозрачный или слегка опалесцирующий гель
• Цвет среды с кровью: вишнёво-красный непрозрачный гель
• Диапазон pH: 7,20–7,60

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются при добавлении 5–7 % (об/об) стерильной дефибринированной крови овцы после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 20–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, требует плотного закрытия крышки для предотвращения комкования. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Ограничения и предостережения

• Индивидуальные микроорганизмы могут иметь вариативные паттерны роста.
• Для полной идентификации необходимо проведение дополнительных биохимических и серологических тестов.
• Только для диагностики in vitro и профессионального использования.
• Требуется использование средств индивидуальной защиты (перчатки, одежда, защита глаз и лица) и соблюдение правил микробиологической безопасности.
• Загрязненные материалы подлежат обязательному автоклавированию перед утилизацией.