Основа желточного агара Ломбарда-Доуэла для анаэробов HiMedia M744-500G (уп/500 гр)

Порошковая диагностическая питательная среда Основа желточного агара Ломбарда-Доуэла для анаэробов HiMedia M744-500G (уп/500 гр) предназначена для выявления лецитиназной активности анаэробных микроорганизмов. Среда применяется с эмульсией яичного желтка FD045 для культивирования и дифференциации требовательных анаэробных бактерий, при этом для полной идентификации необходимы дополнительные биохимические и серологические тесты.

Назначение

Среда предназначена для выявления лецитиназной активности анаэробных микроорганизмов. Основа желточного агара Ломбарда—Доуэла применяется совместно со стерильной эмульсией яичного желтка FD045 для выявления липазной, лецитиназной и протеолитической активности спорообразующих и неспорообразующих облигатных анаэробов.

Тип образца: клинические образцы, включая материал из ран.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения установленных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация

Микроорганизмы, способные расти в отсутствие кислорода, называют анаэробами. В зависимости от способности переносить кислород анаэробы подразделяют на факультативные и облигатные.

Анаэробные грамотрицательные бактерии входят в состав нормальной микрофлоры верхних дыхательных путей, ротовой полости, кишечного и мочеполового трактов человека и животных. Наиболее часто выделяемой из клинических образцов анаэробной группой является устойчивый к желчи комплекс Bacteroides fragilis; эта группа более устойчива к противомикробным препаратам, чем другие анаэробы. Fusobacterium necrophorum — высоковирулентный анаэроб, способный вызывать тяжёлые инфекции, преимущественно у детей и молодых взрослых.

Среда Ломбарда—Доуэла, или L.D.-среда, разработана Dowell и Lombard для культивирования и идентификации требовательных анаэробных бактерий. Основа желточного агара L.D. в сочетании с эмульсией яичного желтка используется для выявления липазной, лецитиназной и протеолитической активности спорообразующих и неспорообразующих облигатных анаэробов.

Агар L.D. представляет собой агар на основе переваренного казеина, обогащённый гемином, витамином K1, L-цистином и дрожжевым экстрактом. Питательные компоненты среды поддерживают рост требовательных анаэробных бактерий:

• триптон и дрожжевой экстракт обеспечивают азотистые питательные вещества;
• гемин и витамин K1 поставляют дополнительные факторы роста;
• L-цистин и L-триптофан служат источниками аминокислот;
• сульфит натрия выполняет функцию антиоксиданта;
• хлорид натрия поддерживает осмотический баланс среды;
• эмульсия яичного желтка является источником лецитина;
• сульфат магния способствует споруляции;
• двузамещённый фосфат натрия выполняет буферную функцию.

Методика приготовления среды

1. Приготовьте суспензию 40,23 г сухой основы в 900 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте среду в автоклаве при давлении 0,103 МПа (15 psi) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 60 °C.
5. В асептических условиях добавьте 100 мл стерильной эмульсии яичного желтка FD045.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте приготовленную среду в стерильные чашки Петри.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют в анаэробных условиях на среде с добавленной эмульсией яичного желтка FD045 после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч.

Контроль качества

Внешний вид

Цвет: от кремового до жёлтого.

Состояние: однородный, сыпучий порошок.

Гелеобразование

Гель плотный, сопоставимый с 2,0%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Базовая среда: прозрачный или слегка опалесцирующий гель среднего янтарного цвета.

После добавления стерильной эмульсии яичного желтка: в чашках Петри образуется непрозрачный гель жёлтого цвета.

Реакция среды

Реакция 4,02%-ного водного раствора при 25 °C: pH 7,4 ± 0,2.

Диапазон pH: 7,20–7,60.

Технические характеристики

Пробоподготовка и обращение с образцами

При работе с клиническими образцами необходимо применять соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными лабораторными правилами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера необходимо ознакомиться с этикеткой.
• При работе следует использовать защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами необходимо соблюдать правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами следует соблюдать стандартные меры предосторожности.
• Указания по безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Для полной идентификации микроорганизмов необходимо дополнительно провести биохимические и серологические тесты.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения: в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.