HiMedia M744-100G Основа L.D. яично-желточного агара

Основа питательной среды HiMedia M744-100G Основа L.D. яично-желточного агара — порошковая среда с конечным pH 7,4 ± 0,2. Изделие предназначено для выявления лецитиназной активности анаэробных микроорганизмов, включая анализ клинических образцов — раневого материала, и предназначено для профессионального применения in vitro.

Назначение

Основа L.D. яично-желточного агара используется для выявления лецитиназной активности анаэробных микроорганизмов. В сочетании со стерильной яично-желточной эмульсией среда также применяется для выявления липазной и протеолитической активности спорообразующих и неспорообразующих облигатных анаэробов.

Состав

Расчётный состав на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Технические характеристики

Методика приготовления среды

1. Приостановить 40,23 г порошка в 900 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизовать в автоклаве при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладить среду до 60 °C.
5. В асептических условиях добавить 100 мл стерильной яично-желточной эмульсии FD045.
6. Тщательно перемешать.
7. Разлить в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Микроорганизмы, способные расти в отсутствие кислорода, относят к анаэробам. В зависимости от способности переносить кислород анаэробы подразделяют на факультативные и облигатные.

Анаэробные грамотрицательные бактерии входят в состав нормальной микрофлоры верхних дыхательных путей, ротовой полости, кишечного и мочеполового тракта человека и животных. Наиболее часто выделяемой из клинических образцов анаэробной группой является устойчивый к желчи комплекс Bacteroides fragilis; эти микроорганизмы устойчивее к противомикробным препаратам, чем другие анаэробы. Fusobacterium necrophorum — высоковирулентный анаэроб, способный вызывать тяжёлые инфекции, преимущественно у детей и молодых людей.

Среда L.D., или среда Ломбард—Доуэлла, разработана Доуэллом и Ломбардом для культивирования и идентификации требовательных анаэробных бактерий. Основа L.D. яично-желточного агара вместе с яично-желточной эмульсией используется для выявления липазной, лецитиназной и протеолитической активности облигатных анаэробов, образующих и не образующих споры.

Агар L.D. представляет собой агар на основе переваренного казеина, обогащённый гемином, витамином K₁, L-цистином и дрожжевым экстрактом. Питательные компоненты среды поддерживают рост требовательных анаэробных бактерий:

• триптон и дрожжевой экстракт обеспечивают азотистые питательные вещества;
• гемин и витамин K₁ поставляют дополнительные факторы роста;
• L-цистин и L-триптофан служат источниками аминокислот;
• сульфит натрия действует как антиоксидант;
• хлорид натрия поддерживает осмотический баланс среды;
• яичный желток в составе добавляемой эмульсии является источником лецитина;
• сульфат магния способствует спорообразованию;
• гидрофосфат динатрия буферизует среду.

Тип образца

Клинические образцы: раневой материал.

Сбор и обращение с образцами

При работе с клиническими образцами необходимо применять соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным лабораторным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, свободно сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 2,0%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Базовая среда: прозрачный или слегка опалесцирующий гель среднего янтарного цвета.
• После добавления стерильной яично-желточной эмульсии: в чашках Петри образуется непрозрачный гель жёлтого цвета.

Реакция среды

Реакция 4,02%-ного водного раствора при 25 °C:

• pH: 7,4 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют в анаэробных условиях на среде с добавлением яично-желточной эмульсии FD045 после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч.

Область применения и ограничения

Среда предназначена для профессионального диагностического применения in vitro.

Для полной идентификации микроорганизмов необходимо дополнительно провести биохимические и серологические тесты.

Рабочие характеристики среды ожидаются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Меры предосторожности

• Только для профессионального применения.
• Перед открыванием контейнера необходимо ознакомиться с этикеткой.
• При работе следует использовать защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами необходимо соблюдать надлежащие правила микробиологической работы.
• При работе с клиническими образцами следует соблюдать стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.
• После использования контейнер необходимо плотно закрыть.

Хранение и срок годности

Хранить продукт при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере. Приготовленную среду хранить при температуре 2–8 °C.

Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке. После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде, чтобы предотвратить образование комков вследствие гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к образованию комков.

Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После каждого использования контейнер следует плотно герметизировать. Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в пределах установленного срока годности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов путём автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать утверждённые лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.