Агар для теста на ДНКазу без ДНК HiMedia M741-500G (уп/500 гр)

Диагностический агар для теста на ДНКазу без ДНК HiMedia M741-500G (производство HiMedia) предназначен для определения дезоксирибонуклеазной активности бактерий и грибов. Среда используется для идентификации патогенных стафилококков и дифференциации непигментированных видов Serratia, выделенных из клинических источников.

Принцип измерения

Среда используется для выявления способности микроорганизмов вырабатывать фермент дезоксирибонуклеазу (ДНКазу), которая расщепляет ДНК. Триптон и соевый пептон обеспечивают необходимые питательные вещества.

Деполимеризация ДНК (ДНКазная активность) может быть определена двумя способами:

1. При использовании среды с добавлением ДНК и маннита (без бромтимолового синего): поверхность среды заливают 1 N HCl; вокруг колоний с ДНКазной активностью образуются прозрачные зоны. В отсутствие активности образуется мутный осадок из-за реакции HCl с нуклеиновыми кислотами.
2. При добавлении бромтимолового синего: вокруг ДНКаз-положительных колоний формируются жёлтые зоны.

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Растворить 40,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Добавить 2 г ДНК, 0,025 г бромтимолового синего и 10 г маннита.
3. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
4. Стерилизовать в автоклаве при температуре 118–121 °C (давление $\approx$ 0,08–0,1 МПа) в течение 15 минут.
5. Охладить до 45–50 °C и разлить по стерильным чашкам Петри.

Процедура анализа

1. Использовать чистые культуры микроорганизмов возрастом 18–24 часа.
2. Посеять исследуемый образец на поверхность подготовленного агара.
3. Инкубировать при температуре 35–37 °C в течение 18–24 часов.
4. Оценить изменение цвета среды или прозрачность после обработки HCl (согласно выбранному методу).

Технические характеристики

Состав (г/л)

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,5 % агаром.
• Цвет и прозрачность: после добавления бромтимолового синего образуется синий прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
• Реакция: pH 5,2 % водного раствора при 25 °C составляет 7,3 $\pm$ 0,2.
• Диапазон pH: 7,10–7,50.

Культуральные характеристики

Характеристики определены при добавлении 2 г ДНК, 0,025 г бромтимолового синего и 10 г маннита после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 часов.

Область применения

Применяется для анализа изолированных микроорганизмов из проб пищевых продуктов. Рекомендуется для дифференциации Serratia marcescens от других представителей семейства Enterobacteriaceae, а также для подтверждения активности коагулазы у микрококков через корреляцию с ДНКазной активностью.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания.
• Хранение готовой среды: при температуре 20–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание комкования.

Меры предосторожности и утилизация

• При работе использовать защитные перчатки, одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности.
• Загрязнённые материалы и использованные среды подлежат обязательной стерилизации в автоклаве или сжиганию перед утилизацией.