Агар для теста на ДНКазу без ДНК HiMedia M741-500G (уп/500 гр)

Диагностическая питательная среда Агар для теста на ДНКазу без ДНК HiMedia M741-500G (уп/500 гр) — агаровая основа без ДНК для выявления дезоксирибонуклеазной активности. Агар для определения активности ДНКазы у бактерий и грибов после добавления ДНК, включая идентификацию патогенных стафилококков; ограничение метода — использование чистой культуры возрастом 18–24 ч.

Назначение

Питательная среда предназначена для выявления дезоксирибонуклеазной активности бактерий и грибов после добавления ДНК. Среда особенно применима для идентификации патогенных стафилококков.

При добавлении толуидинового синего среда используется для дифференциации и идентификации непигментированных видов Serratia, выделенных из клинического материала и способных быть ошибочно идентифицированными как виды Enterobacter и Klebsiella.

Агаровая основа без ДНК также может применяться для выявления активности ДНКазы и ферментации маннита после добавления маннита и индикаторного красителя бромтимолового синего.

Принцип измерения и интерпретация

Триптон и соевый пептон обеспечивают среду необходимыми питательными веществами.

Деполимеризацию ДНК под действием ДНКазы выявляют затоплением поверхности среды 1 н. раствором HCl и наблюдением прозрачных зон вокруг колоний. Для этой схемы в среду добавляют ДНК и маннит, но не добавляют бромтимоловый синий.

При отсутствии активности ДНКазы образуется мутный осадок вследствие реакции HCl с нуклеиновыми кислотами. При использовании бромтимолового синего вокруг колоний формируются жёлтые зоны.

Активность ДНКазы была впервые отмечена Weckman и Catlin у микрококков; авторы выявили корреляцию с коагулазной активностью: коагулазоположительные виды также были ДНКазоположительными. Di Salvo подтвердил результаты Weckman и Catlin и наблюдал точную корреляцию активности ДНКазы и коагулазы. В эксперименте Di Salvo для активации фермента ДНКазы в среду вводились ДНК и хлорид кальция. Schreier модифицировал среду для определения ДНКазы добавлением толуидинового синего. Модифицированная среда обеспечивала более быструю идентификацию Serratia marcescens и позволяла дифференцировать Serratia от других представителей семейства Enterobacteriaceae.

Для окончательной идентификации необходимо провести дополнительные подтверждающие тесты.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 40,0 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Добавьте 2 г ДНК, 0,025 г бромтимолового синего и 10 г маннита.
3. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
4. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 118–121 °C в течение 15 мин и давлении приблизительно 0,083–0,103 МПа (12–15 psi).
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Технические характеристики

Состав

Формула рассчитана и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

• Тип питательной среды: диагностический
• Назначение изделия: агар
• Физическая форма: порошок
• Происхождение: животного происхождения
• Тип продукта: стандартный
• Материал упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE)
• Масса упаковки: 500 г
• Сертификат: ФСЗ 2009/03705

Контроль качества

• Внешний вид: однородный, свободно сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: после добавления бромтимолового синего в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель синего цвета.
• Реакция: реакция 5,2%-ного массо-объёмного водного раствора при 25 °C; pH 7,3 ± 0,2.
• Диапазон pH: 7,10–7,50.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после добавления 2 г ДНК, 0,025 г бромтимолового синего и 10 г маннита и инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Образцы и пробоподготовка

Тип образца

Изолированный микроорганизм из пищевых образцов.

Сбор и обращение с образцами

Для образцов изолированных микроорганизмов применяйте соответствующие методы сбора и обработки образцов согласно установленным руководствам. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

• Тестируемые организмы должны находиться в чистой культуре.
• Возраст культуры должен составлять 18–24 ч.
• Для идентификации необходимо провести дополнительные подтверждающие тесты.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Срок применения: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Место хранения: сухая вентилируемая зона, защищённая от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования контейнер необходимо герметично закрывать.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в пределах установленного срока годности и при соблюдении рекомендованной температуры хранения.

Требования безопасности

Перед открытием контейнера прочитайте этикетку. При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.

При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической практики и стандартные меры предосторожности, установленные для лабораторных работ. Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

Установленные лабораторные процедуры утилизации инфекционных материалов должны соблюдаться в полном объёме. Материалы, контактировавшие с образцом, необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Оценка рабочих характеристик

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при применении в соответствии с указаниями на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.